河北省科技支撑计划项目(10246139D)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：蔡建辉问明温军业徐伟立杨冬野更多>>
- 相关机构：河北医科大学第二医院河北省人民医院河北大学更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- T淋巴细胞与细胞治疗的研究进展被引量：4
- 2013年
- 恶性肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能有着密切的关系,机体维持正常的免疫功能状态,有赖于各种免疫细胞之间的相互协作或相互制约,以产生适度的免疫应答,使之即能清除异物抗原,又不致损伤机体组织[1].机体的抗肿瘤免疫机制可分为细胞免疫、体液免疫和细胞因子免疫三大类,大量研究表明T淋巴细胞介导的细胞免疫与肿瘤关系密切.T细胞来源于骨髓的多能干细胞,体液中T细胞亚群的分析和组织内的定位检测是判断细胞免疫功能的一项重要指标,对恶性肿瘤复发、转移和判断治疗以及各种传染病的诊断、研究、免疫治疗和判断预后等方面均具有重要意义[2-5].
- 温军业问明杨冬野张海强暴雷耿炜张瑞峰温东业蔡建辉
- 关键词：T淋巴细胞细胞治疗免疫功能状态细胞免疫功能机体组织体液免疫
- C57BL／6小鼠鼠尾静脉注射不同方法的对比被引量：2
- 2013年
- 经鼠尾静脉注射给药或细胞回输治疗是免疫学小鼠动物实验中的常用操作技术，我们通过比较小鼠鼠尾静脉的不同注射方法，寻找穿刺成功率更高、安全、可靠的方法。
- 温军业问明杨冬野耿玮张海强蔡建辉
- 关键词：C57BL尾静脉注射静脉注射给药回输治疗注射方法
- 干扰肿瘤微环境对细胞毒性T淋巴细胞瘤体内归巢和杀伤活性的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨应用低剂量环磷酰胺(cyclophosphamide,CYC)干扰荷瘤小鼠体内微环境对改善过继回输的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)瘤体内归巢和杀伤活性的作用。方法建立C57BL/6荷瘤小鼠模型并分为对照组、CYC注入(CYCI)组、0.9%Na Cl溶液注入(NSI)+CTL组和CYCI+CTL组,每组40只,分别给CYCI组、CYCI+CTL组每只小鼠腹腔注入CYC(20mg/kg),NSI+CTL组小鼠注入等量0.9%Na Cl溶液。检测注射前后不同时间小鼠瘤体内调节性T细胞(Treg)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)水平变化。于注射后第4天回输CFSE-CTL,每只0.2 ml,含5×l06个细胞。流式检测对比NSI+CTL组和CYCI+CTL组瘤体内CFSE-CTL比例。结果 NSI+CTL组小鼠Treg、IL-10、TGF-β水平随着瘤体增长而逐渐增高;CYCI+CTL组比NSI+CTL组回输的CFSE-CTL在肿瘤内归巢明显增加和持久(P<0.05)。各组肿瘤体积除对照组和CYCI组外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论提前应用低剂量CYC干预荷瘤小鼠体内微环境,可降低瘤体内Treg、IL-10和TGF-β水平,使过继回输的CTL在肿瘤中的归巢聚集明显增强,杀伤肿瘤效率提高。
- 徐伟立蔡建辉李索林问明温军业
- 关键词：过继性免疫治疗细胞毒性T淋巴细胞肿瘤微环境免疫逃逸
- 通过干扰肿瘤微环境改善抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞瘤体内存留、分布和免疫杀伤效率的研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察低剂量环磷酰胺（CYC）抑制荷瘤小鼠体内微环境对改善细胞毒性T淋巴细胞（CTL）瘤体内存留、分布和功能的作用。方法体外制备黑色素瘤抗原特异性CTL并进行荧光染料2一羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记和培养。建立C57BL/6小鼠荷瘤模型并分为生理盐水腹腔注射（NSI）＋CTL组和环磷酰胺腹腔注射（CYCI）＋CTL组，各40只，每组小鼠分别腹腔注入等量生理盐水（NS）或环磷酰胺（CYC）。检测注射前、后小鼠脾脏调节性T细胞（Tregs）和血清白细胞介素（IL）-10、转化生长因子（TGF）．B水平。注射后第4天回输CTL，流式细胞检测对比两组瘤体内CTL荧光强度和细胞周期。实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测对比两组瘤体内干扰素（IFN）-γ、IL-2、颗粒酶、穿孔素mRNA表达。激光共聚焦观测两组CFSE阳性CTL分布。对比肿瘤体积。结果两组小鼠于CYC或Ns注射后第4天Tregs/CD4＋（0．05±0．00比0．27±0．07，P〈0．05）和IL-10[（26．894-0．12）ng/L比（47．644-1．40）ng/L，P〈0．05]显著降低；TGF-B第7天降至最低[（4．004-0．12）ng/L比（9．804-0．36）ng/L，P〈0．05]。CTL回输后第3天始CYCI＋CTL组瘤体内荧光强度比NSI＋CTL组明显增高且持久（91．904±1．37比39．70±2．10，P〈0．05）；两组各期细胞比例差异无统计学意义（P〉0．05）。两组瘤体内颗粒酶、穿孔素、IL-2和IFN-γ表达差异均有统计学意义（P〈0．05）；两组间肿瘤生长抑制自CTL回输后第6～15天尤为显著（P〈0．05）。结论采用低剂量CYC对体内微环境进行提前干预，可同时降低Treg、IL-10和TGF-8水平，使回输CTL在肿瘤内的归巢存留明显增强，杀伤效率提高，肿瘤生长抑制。
- 徐伟立
- 关键词：细胞免疫治疗细胞毒性T淋巴细胞免疫逃逸
- 循环应用低剂量环磷酰胺联合过继免疫治疗的抗黑色素瘤作用被引量：3
- 2013年
- 目的:观察循环应用低剂量环磷酰胺(CTX)对荷瘤鼠调节性T细胞(Tregs)的影响,及联合细胞毒性T细胞(CTLs)过继免疫治疗的实际抗瘤效果并探讨其中可能的机制。方法:通过皮下接种瘤细胞制备黑色素瘤荷瘤鼠模型;腹腔注射CTX,每隔7天给药一次,共3次;应用流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tregs)的变化。体外培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(DCs),制备肿瘤抗原特异性的CTLs。在腹腔注射CTX后4天,鼠尾静脉注射CTLs,每隔7天治疗一次,共3次。绘制各组肿瘤生长曲线。结果:随着荷瘤时间的延长,荷瘤鼠CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比例逐渐升高。循环应用CTX能够延长对Tregs的抑制,维持其在相对较低水平。循环CTX+CTLs疫苗治疗组的抑瘤作用最为明显(P<0.05);治疗组中未见免疫性白斑等自身免疫病及明显化疗毒副反应。结论:循环应用低剂量CTX能够规律有效地调控Tregs,显著提高CTLs过继免疫治疗的疗效。
- 李卫泊尹昱张峻岭谢绍建蔡建辉
- 关键词：环磷酰胺黑色素瘤细胞毒性T细胞过继性细胞免疫治疗
- 低剂量环磷酰胺对黑素瘤荷瘤小鼠体内免疫抑制微环境的干预作用被引量：3
- 2014年
- 目的:检测低剂量环磷酰胺(cyclophosphamide,CYC)腹腔注射对黑素瘤荷瘤小鼠体内微环境中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)、免疫抑制因子白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)水平的影响,探讨CYC介导抑制肿瘤微环境的分子机制。方法:建立小鼠荷黑素瘤B16细胞模型,模型鼠随机分为实验组(CYC腹腔注射,每只20 mg/kg)和对照组(同体积0.9%NaCl溶液腹腔注射)。注射前和注射后1、4、7、11和15 d,用流式细胞仪检测小鼠外周血和瘤组织内CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率;ELISA法检测血清和肿瘤组织中IL-10和TGF-β水平;观察比较各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况。结果:与对照组相比,实验组小鼠外周血和肿瘤组织中Treg百分率以及IL-10和TGF-β表达水平均明显降低(P<0.05);实验组小鼠外周血及肿瘤组织中Treg百分率和IL-10水平变化均正相关(外周血:rs=0.943,P=0.005;肿瘤组织:rs=0.812,P=0.050)。2组小鼠肿瘤生长差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔注射低剂量CYC可降低荷瘤小鼠外周血和肿瘤组织中Treg百分率和免疫抑制因子IL-10、TGF-β水平,从而有效干预荷瘤小鼠体内免疫抑制微环境,但对肿瘤生长无明显抑制作用。
- 徐伟立蔡建辉李索林问明温军业
- 关键词：环磷酰胺白细胞介素10
