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国家自然科学基金(81101410)

作品数：11 被引量：57H指数：5
相关作者：刘芬钱克俭曾振国邵强赵宁更多>>
相关机构：南昌大学第一附属医院临沂市人民医院深圳市第二人民医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生

主题

  • 8篇炎症
  • 8篇肺泡
  • 8篇肺泡巨噬
  • 8篇肺泡巨噬细胞
  • 7篇炎症反
  • 7篇炎症反应
  • 6篇细胞
  • 4篇细胞炎症
  • 4篇细胞炎症反应
  • 3篇胆碱
  • 3篇多糖
  • 3篇乙酰
  • 3篇乙酰胆碱
  • 3篇脂多糖
  • 3篇脂多糖诱导
  • 2篇肾小管
  • 2篇脓毒
  • 2篇脓毒症
  • 2篇缺糖
  • 2篇缺氧

机构

  • 11篇南昌大学第一...
  • 2篇临沂市人民医...
  • 2篇深圳市第二人...
  • 1篇南昌大学

作者

  • 11篇刘芬
  • 9篇曾振国
  • 9篇钱克俭
  • 6篇邵强
  • 5篇赵宁
  • 4篇聂成
  • 3篇丁成志
  • 3篇夏亮
  • 3篇江榕
  • 3篇李勇
  • 2篇张建国
  • 2篇吴明
  • 2篇李明利
  • 2篇冯永文
  • 2篇李东海
  • 2篇王燕
  • 2篇彭菲菲
  • 1篇陈晓娟
  • 1篇卿城
  • 1篇揭克敏

传媒

  • 5篇中华危重病急...
  • 3篇中华急诊医学...
  • 1篇解放军医学杂...
  • 1篇实验与检验医...
  • 1篇南昌大学学报...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 4篇2015
  • 4篇2014
  • 1篇2013
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
MicroRNA-132增强乙酰胆碱对肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用被引量：4
2015年
目的 观察调控microRNA-132 （miR-132）联合乙酰胆碱（ACh）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的作用.方法 分别采用FAM荧光标记的mimic/inhibitor阴性对照（NC）、miR-132 mimic/inhibitor、mimic/inhibitor NC转染大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,通过荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测miR-132的表达.转染后细胞给予LPS（1μg/mL）刺激或LPS＋ ACh（10 μmoL/L）处理,采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）及白细胞介素-6（IL-6）浓度.两组间均数比较采用独立样本t检验,以P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 通过在NR8383细胞中转染mimic FAM NC确定50 nmol/L为转染mimic的最佳浓度.与mimic NC组相比,miR-132 mimic组细胞中miR-132的表达上调了（21.54±2.14）倍（P=0.001）.LPS组中结果发现miR-132 mimic上清液中TNF-α（P=0.683）、IL-1β（P=0.770）、IL-6（P=0.872）水平较mimic NC差异均无统计学意义;LPS＋ ACh＋ mimic NC组TNF-α（P=0.008）、IL-1β（P =0.004）、IL-6 （P =0.003）水平与LPS＋mimic NC组相比均下降;LPS＋ ACh＋ miR-132 mimic组TNF-α（P=0.001）、IL-1β （P =0.001）、IL-6 （P =0.001）水平与LPS＋ ACh＋ mimic NC组相比均下降.通过转染inhibitor FAM NC确定100nmol/L为转染inhibitor的最佳浓度.LPS组miR-132 inhibitor上清液中TNF-α（P=0.800）、IL-1β（P =0.449）、IL-6 （P =0.418）水平较inhibitor NC差异均无统计学意义.LPS＋ ACh组结果显示miR-132 inhibitor可逆转ACh介导的TNF-α （P =0.018）、IL-1β （P =0.022）、IL-6 （P=0.032）水平的下降.结论 在体外培养环境,单独给予LPS时过表达miR-132或抑制miR-132活性不影响肺泡巨噬细胞炎症反应,但miR-132可增强ACh对LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用.
刘芬李勇赵宁李东海江榕曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
关键词：乙酰胆碱肺泡巨噬细胞炎症反应白细胞介素-1Β白细胞介素-6
体内转染微小RNA-146a对脓毒症小鼠肺的保护作用被引量：11
2015年
目的：观察体内转染微小RNA-146a（miR-146a）对脓毒症小鼠肺脏的保护作用。方法选择健康雄性BALB/C小鼠24只，按随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、转染组、转染对照组，每组6只。转染组小鼠经气管内预先滴入转染试剂in vivo-jetPEITM处理的miR-146a模拟物（agomir），转染对照组滴入in vivo-jetPEITM处理的阴性对照物。转染12 h后采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型；假手术组仅开腹游离盲肠，不进行结扎穿刺。各组于术后24 h处死动物，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测肺组织 miR-146a表达，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，测定肺组织湿/干质量（W/D）比值，光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤病理评分。结果脓毒症组、转染组、转染对照组小鼠肺组织miR-146a表达量分别上调至假手术组的（3.56±0.43）、（27.64±3.46）、（3.72±0.54）倍（P＜0.05或P＜0.01），且转染组miR-146a表达上调量明显高于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01）；而脓毒症组与转染对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。与假手术组比较，脓毒症组、转染组、转染对照组BALF中TNF-α水平均明显升高（ng/L：511.65±43.47、305.74±34.76、492.27±42.21比50.72±7.23，均P＜0.01），转染组TNF-α水平明显低于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01）。与假手术组比较，脓毒症组、转染组、转染对照组肺W/D比值明显升高（6.11±0.32、5.02±0.29、6.05±0.43比4.18±0.10，均P＜0.01），转染组明显低于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01），且转染组肺损伤病理评分较脓毒症组及转染对照组明显下降（分：6.12±0.75比10.53±1.52、9.73±1.08，均P＜0.01）。结论通过体内转染in vivo-jetPEI^TM荷载的miR-146a agomir可以上调脓毒症小鼠肺组织miR-146a表�
张建国丁成志邵强刘芬曾振国聂成钱克俭
关键词：体内转染脓毒症急性肺损伤
线粒体DNA诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的实验研究被引量：4
2014年
目的观察线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)刺激肺泡巨噬细胞后炎症因子的动态变化,探讨mtDNA对肺泡巨噬细胞的致炎效应。方法取SD大鼠肝脏组织用改良的碱变性法进行mtDNA的提取、纯化。将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)分为mtDNA组(5μg·mL-1,A组),mtDNA组(10μg·mL-1,B组),空白对照组(C组),分别在A、B组中加入mtDNA 5μg·mL-1、10μg·mL-1,在0、3、6、12和24 h时相点收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和IL-6的表达水平。结果 A组和B组在3、6、12和24 h TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量显著高于C组(P<0.01),且在3、6、12和24 h时B组的表达量高于A组(P<0.05)。结论 mtDNA能够诱导肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β和IL-6等炎症因子的表达,且呈剂量依赖性,推测mtDNA具有促炎作用。
刘芬曾振国李勇黄彩雪赵宁钱克俭
关键词：肺泡巨噬细胞炎症因子
乙酰胆碱对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响被引量：5
2015年
目的：观察乙酰胆碱（ACh）对脂多糖（LPS）诱导肺泡巨噬细胞炎症反应模型大鼠胆碱能抗炎通路的作用，以及胆碱酯酶抑制剂毒扁豆碱（Phy）对ACh抗炎作用的影响。方法体外培养NR8383大鼠肺泡巨噬细胞株并分为空白对照组、LPS组（1 mg/L LPS刺激12 h）、LPS＋ ACh组（LPS刺激前加入终浓度0.01、0.1、1、10、100μmol/L的ACh处理5 min）、 LPS＋Phy组（LPS刺激前加入1 mmol/L的Phy处理5 min）、 LPS＋ACh＋Phy组（LPS刺激前加入1 mmol/L Phy及10μmol/L Ach分别处理5 min）5组。收集各组细胞上清液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-1β、IL-6）的含量；同时测定乙酰胆碱酯酶（AChE）活性。结果① LPS组细胞上清液中TNF-α（ng/L：605.09±57.13比34.07±8.62）、IL-1β（ng/L：377.09±28.55比32.33±10.62）、IL-6（ng/L：558.04±77.45比42.62±11.21）含量均较空白对照组显著升高（均P＜0.05），证实肺泡巨噬细胞炎症反应模型构建成功。②与LPS组相比，终浓度0.01、0.1和1μmol/L的ACh对 LPS刺激的肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量影响较小（均P＞0.05）；而终浓度10μmol/L及100μmol/L的ACh可显著降低细胞上清液中TNF-α（ng/L：451.19±30.67、332.19±32.19比604.96±22.56）、IL-1β（ng/L：261.08±24.78、143.98±28.39比367.06±10.44）、IL-6（ng/L：342.75±54.60、235.48±29.75比562.69±63.34）的含量（均P＜0.05）。③ LPS组细胞上清液中AChE活性较空白对照组显著增加（kU/L：5.21±0.63比3.09±0.10，P＜0.05）；与LPS组相比，给予1 mmol/L胆碱酯酶抑制剂Phy预处理可成功抑制AChE的活性（1.51±0.12比5.21±0.63，P＜0.05）。④与LPS＋ ACh组相比，LPS＋ ACh＋ Phy组可显著降低细胞上清液中TNF-α（ng/L：183.17±35.44比451.19±30.67）、IL-1β（ng/L：91.49±12.27比261.08±24.78）、IL-6（ng/L：108.17±22.82比342.75±54.60）的含量（均P
刘芬赵宁李东海曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
关键词：乙酰胆碱脂多糖肺泡巨噬细胞炎症反应
转染微小RNA-146a对肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-α 表达的影响被引量：12
2013年
目的观察转染微小RNA-146a（miR-146a）对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响，探讨转染miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383，分别以25、50、100nmol／LCy^TM3 标记的Pre-miR^TM阴性对照转染细胞，选择转染效率最高的浓度作为实验浓度。将NR8383细胞分成两组，转染组转染50nmol／LPre-miRTMmiR-146a前体，对照组转染50nmol／LCyr^TM3标记的Pre-miRTM阴性对照，采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测转染后细胞内miR-146a的mRNA表达。用脂多糖（LPs）lmg／L刺激细胞6h后，采用酶联免疫吸附试验（EusA）测定细胞培养上清液内TNF-α蛋白表达，采用RT-qPCR检测细胞内TNF-αmRNA表达。结果以50nmol／LCy^TMm3标记的Pre-miRTM阴性对照转染细胞效率最高，约为80％。与对照组（作为1）相比，转染组细胞内miR-146a的mRNA表达上调了（24．55±6．14）倍（P〈0．01）。LPS刺激后，转染组细胞上清液TNF-α蛋白含量（ng／L）较对照组明显下降（211．5±30．4比616．6±423，P〈0．01），细胞内TNF-αmRNA表达下调了（47±6）％（P〈0．05）。结论转染miR-146a能下调肺泡巨噬细胞炎症因子TNF-α的表达，表明miR-146a能抑制LPS诱导肺泡巨噬细胞的炎症反应。
刘芬曾振国聂成丁成志邵强卿城钱克俭
关键词：肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-Α
巨噬细胞胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响被引量：3
2017年
目的探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响。方法分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组。采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)m RNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性。结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3组之间巨噬细胞ACh E m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368)。结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤。调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向。
吴明吴乐锋陆俊福李明利李赟徐迹刘文兰刘芬冯永文
关键词：炎症介导素类肾小管
急性缺糖缺氧通过增强胆碱酯酶表达促进肾小管细胞的炎性损伤被引量：1
2016年
目的探讨急性缺糖缺氧导致肾小管细胞损伤的机制。方法分离培养大鼠肾内巨噬细胞、肾小管上皮细胞,构建两者共培养(transwell)模型,细胞分成对照组及缺糖缺氧(Oxygen and glucose deprivation,OGD)组,给予缺糖缺氧处理细胞1h后再正常培养24h,ELISA法检测两组上清液TNF-α,IL-1β和IL-10的浓度,噻唑蓝(MTT)检测肾小管细胞活力及RTq PCR及Western Blot检测AChE的mRNA和蛋白的表达。结果在共培养上清液中,对照组与OGD相比,TNF-α(pg/ml):(231.67±36.28)VS(428.67±43.16)(P<0.05),IL-1β(pg/ml):(116.67±21.64)VS(219.63±43.86)(P<0.05),IL-10(pg/ml):(235.67±39.35)VS(432.67±49.72)(P<0.01)。肾小管细胞活力明显降低,分别为(88.41±18.25)VS(46.98±13.87)(P<0.01),OGD组巨噬细胞AChE mRNA和蛋白水平均高于对照组,分别上调了(3.82±0.73)和(2.17±0.46)倍(P<0.01)。结论急性缺糖缺氧增强了肾脏巨噬细胞胆碱酯酶的表达,通过炎症介质,介导了急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤。
吴明吴乐锋李明利陆俊福赖凯徐迹刘芬冯永文
关键词：缺糖缺氧胆碱酯酶
微小RNA-132在脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应中的表达变化被引量：8
2014年
目的观察脂多糖（LPS）诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后微小RNA-132（miR-132）的动态变化，以初步探讨miR-132在肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用。方法将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组和以终浓度1mg／LLPS刺激3、6、12及24h组，分别收集各时间点上清液及细胞，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-0I（TNF-仅）、白细胞介素（IL-113和IL-6）的含量，采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞中miR-132的表达。结果与空白对照组相比，LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后3h上清液中TNF-α．含量（ng／L：364．83±46．29比34．07±8．62，P〈O．01）、IL-113含量（ng／L：153．83±43．67比32．334-10．62，P〈0．05）、IL-6含量（ng／L：183．854-43．52比42．62±11．21，P〈0．05）即明显升高，随时间延长均逐渐升高至12h达峰值（TNF-α：605．09±57．13，IL-1B：377．09±28．55，IL-6：558．04±77．45，均P〈O．01），24h时均有所下降（TNF-α：281．95±41．61，IL-18：263．17±51．36，IL-6：438．74±79．94），但仍显著高于空白对照组（均P〈0．01）。LPS刺激后3h，miR-132表达水平较空白对照组上调了（1．12±0．11）倍（P=0．995），6、12、24hmiR-132表达较空白对照组分别上调了（5．98±0．65）、（7．64±0．53）和（8．92±0．83）倍（均P〈0．01）。结论LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后，miR-132表达随时间延长逐步上调，其可能参与调控大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应。
刘芬江榕李勇曾振国赵宁夏亮聂成钱克俭
关键词：脂多糖肺泡巨噬细胞炎症反应
乙酰胆碱酯酶在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中的变化被引量：3
2014年
目的 观察脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激大鼠肺泡巨噬细胞NR8383后乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,ACHE）的表达变化,为研究胆碱能抗炎通路的调控提供新的实验依据.方法 将体外去致热源培养的NR8383细胞分为对照组及LPS（1μg/mL）刺激组,于刺激后3、6、12、24 h各时间点分别离心收集上清液及细胞沉淀,采用酶联免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA）测定上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的变化,实时定量PCR检测细胞中AChE mRNA的表达改变,蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测细胞中AChE蛋白的表达变化,乙酰胆碱酯酶T-CHE测试盒检测上清液中AChE活性的变化.组间多重比较采用单因素方差分析,进一步采用LSD-t检验进行两两比较,P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与对照组相比,TNF-α的含量在LPS刺激NR8383细胞后3h开始显著上升（P＜0.05）,12 h达高峰,24 h下降但仍明显高于对照组水平（P＜0.05）.与对照组相比,AChE mRNA于刺激后3h开始上升,升高（3.19±0.44）倍（P＜0.05）,6h后达高水平并维持于此水平,6、12、24 h分别上调[（5.65±0.63）、（5.40±0.71）、（5.35±0.77）[倍（与对照组相比,均P＜0.05）;AChE蛋白的表达及上清液中AChE的活性在LPS刺激后12 h与各自对照组相比均上升[AChE蛋白：（1.37±0.01） vs.（1.05±0.02）,P＜0.05; AChE活性：（6.14±1.13） U/mLvs.（2.64±0.85） U/mL,P＜0.05],随后呈下降趋势,于LPS作用24 h时均低于各自对照组[AChE蛋白：0.65±0.05,P＜0.05,AChE活性：（0.56±0.19）U/mL,P＜0.05].结论 LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后,AChE的表达增加,提示其可能参与肺泡巨噬细胞炎症反应的调控;LPS刺激后24 h,AChE mRNA仍处于高表达水平,AChE蛋白及活性却下降,提示在肺泡巨噬细胞炎症反应中可能存在AChE转录后水平的调控.
刘芬江榕李勇曾振国聂成赵宁黄彩雪夏亮钱克俭
关键词：乙酰胆碱酯酶脂多糖肺泡巨噬细胞炎症反应脓毒症
MicroRNA-146a调控肺泡巨噬细胞炎症反应的机制被引量：3
2015年
microRNA是一类大小约22个核苷酸长度的内源性非编码小分子RNA[1],主要通过识别并结合靶基因mRNA的3＇端非编码区,在转录后水平抑制蛋白的翻译或促进靶基因的降解[2-3].有研究发现微小RNA参与肺内炎症反应的调控[4],miR-146a是其中较有代表性的一个.本课题组前期研究发现,用LPS刺激肺泡巨噬细胞,miR-146a的表达水平升高,并且升高程度与TNF-α mRNA呈负相关[5];转染miR-146a能下调LPS诱导肺泡巨噬细胞TNF-α的表达[6],表明miR-146a能抑制LPS诱导肺泡巨噬细胞的炎症反应.本实验拟进一步探讨miR-146a调控肺泡巨噬细胞炎症反应的机制,为体内试验提供理论依据.
张建国陈晓娟丁成志邵强曾振国刘芬钱克俭
关键词：肺泡巨噬细胞炎症反应LPS诱导非编码区微小RNA
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