国家自然科学基金(81101412)
- 作品数：11 被引量：49H指数：5
- 相关作者：申捷何岱昆张琳邵义如钟志越更多>>
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- 光气吸入性肺损伤大鼠细胞因子群的变化及乌司他丁的干预被引量：3
- 2014年
- 目的 建立大鼠光气吸入性肺损伤观察模型,观察大鼠血浆细胞因子群的动态变化及不同剂量乌司他丁干预的作用.方法 对104只雄性SD大鼠进行随机分组为空气对照组,乌司他丁干预对照组,光气染毒组及不同剂量乌司他丁干预组,每组8只.动态恒量染毒,干预组染毒后即刻经腹腔注射药物,并在2、6、24 h后处死实验动物,取肺组织行病理观察;检测肺湿/干比;半定量反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测mRNA表达,取血浆行Bio-Plex细胞因子检测共18种.结果 与空气对照组比较,光气染毒早期（2 h）大鼠血浆中白细胞介素（IL）-1α、IL-6粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、γ-干扰素（INF-γ）,巨噬细胞炎症蛋白3α（MIP-3α）,血管内皮生长因子（VEGF）浓度明显升高,随时间推移逐步下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.血浆IL-4、IL-10浓度早期（2、6h）下降,后期（24 h）上升至正常或高于正常水平,血浆IL-13含量早期（2 h）下降不明显,后期（24 h）仍有上升,差异均有统计学意义（P＜0.05）.乌司他丁干预组的IL-1α、IL-6、GM-CSF、INF-γ、MIP-3α、VEGF、ING-α水平在不同时间点有不同程度下降,IL-4、IL-10、IL-13血浆浓度上升,差异有统计学意义（P＜0.05）.乌司他丁干预组肺损伤程度较染毒组有不同程度改善,且高剂量干预组改善更明显.乌司他丁干预组的肺组织IL-10,IL-4,IL-13-mRNA相对表达量上调与血浆细胞因子结果一致.结论 大鼠光气吸入性肺损伤时部分炎症细胞因子群随时间推移产生动态变化.乌司他丁可改善大鼠光气吸入性肺损伤的程度,调节炎症因子合成及释放,抑制炎症反应,且呈剂量依赖性.
- 黎俊王静钟志越何岱昆张静申捷
- 关键词：光气肺损伤白细胞介素类乌司他丁
- 褪黑素对大鼠光气吸入致肺损伤的保护作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨褪黑素（MT）对光气致大鼠肺损伤的抗氧化保护作用及其可能机制。方法50只SD雄性大鼠随机分为光气染毒组、空气对照组、MT处理组、地塞米松处理组（DX处理组）和阴性对照组，每组10只，除空气对照组外吸入8．33mg／L光气，染毒5rain，于染毒后1h分别从尾静脉注入MT（10mg／kg）、地塞米松（2．5mg／kg）、l％乙醇生理盐水（1ml／kg），于6h后处死动物，测定肺组织湿干比，支气管肺泡灌洗液中总蛋白含量及中性粒细胞计数以及肺匀浆中丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD）及髓过氧化物酶（MPO）活力；光学显微镜下观察肺组织病理；蛋白质印迹（Westernblot）法测定肺组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和核转录因子（NF．xB）的蛋白含量。结果与空对照气组比较，光气染毒组肺湿干比、BALF中中性粒细胞计数及蛋白含量均升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。光气染毒组大鼠肺组织中的MDA含量、MPO活力较空气对照组明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。与光气染毒组比较，MT处理组MDA含量和MPO活力均降低，SOD活力升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。与光气染毒组比较，MT处理组和DX处理组iNOS及NF—xB蛋白质表达均降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论MT对光气致肺损伤有保护作用，其机制可能与清除自由基抗氧化及抑制iNOS、NF．xB的表达有关。
- 张琳申捷甘正艺何岱昆钟志越
- 关键词：光气褪黑素丙二醛超氧化物歧化酶呼吸窘迫综合征
- 褪黑素对光气吸入性肺损伤中p38MAPK信号通路的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨褪黑素（MT）对大鼠光气吸入性肺损伤p38 MAPK信号通路的影响.方法 50只SD雄性大鼠随机分为光气染毒组、空气对照组、MT处理组、生理盐水对照组和p38 MAPK抑制剂SB203580处理组,每组10只,复制大鼠光气吸入性肺损伤的模型.分别于不同处理后6h后处死动物,检测肺湿干比,肺泡灌洗液（BALF）中丙二醛（MDA）,一氧化氮（NO）含量及髓过氧化物酶（MPO）活力,分别采用免疫组化及蛋白质印迹（Western blot）法检测p38 MAPK及活性形式磷酸化蛋白P-p38的定性定量表达变化情况.Western blot方法测定肺组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白含量.结果 与空气对照组比较,光气染毒组肺湿干比升高,BALF中性粒细胞数增多,差异有统计学意义（P＜0.01）;MT干预组中性粒细胞计数和肺湿干比低于光气染毒组,差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫组化结果显示,空气对照组肺脏p-p38MAPK表达的阳性信号较弱;光气染毒组P-p38MAPK阳性信号较空气对照组明显增强,主要分布在浸润的炎细胞和血管内皮细胞中,且在很多细胞胞浆与胞核中均呈阳性;MT及SB203580处理组p-p38MAPK阳性细胞分布与光气组类似,但胞核阳性细胞明显减少,且信号明显减弱.光气染毒组MDA和NO含量及MPO活力明显升高,与空气组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）,MT和SB203580干预组水平MDA和NO含量及MPO活力较光气染毒组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.05）,但仍高于空气对照组.Western blot检测结果显示,光气染毒组较空气对照组iNOS和p-p38表达较强,差异有统计学意义（P＜0.01）.MT和SB203580干预组的iNOS和p-p38表达的水平均低于光气染毒组水平,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.05）.结论 MT和SB203580处理对光气致肺损伤有显著的保护作用,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路激活,进而抑制iNOS的表达,与清除自由基抗氧化有关.
- 张琳何岱昆邵义如徐道剑申捷
- 关键词：光气褪黑素氧化性应激
- 腺病毒重组血管生成素-1对大鼠光气急性肺损伤基质金属蛋白酶的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨腺病毒重组血管生成素-1（adenovirus-delivered angiopoietin-1,Ad.Ang-1siRNA）对大鼠光气急性肺损伤基质金属蛋白酶-2,9（matrix metalloproteinase,MMP-2,9）及其组织抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1）表达的影响.方法 复制大鼠光气吸入性肺损伤动物模型.随机分为空气对照组（吸入与光气染毒组同等流量的空气）、空气空白Ad组（空气暴露后1h通过尾静脉注射1×108 pfu/ml Ad）、空气转染Ad/Ang1组（空气暴露后1h通过尾静脉注射1×108 pfu/ml Ad.Ang1 siRNA）、光气染毒组（吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5 min）、光气空白Ad组（给予同等剂量的光气吸入,光气染毒后1h通过尾静脉注射1×108 pfu/ml Ad）、光气转染Ad/Ang1组（给予同等剂量的光气吸入,光气染毒后1h通过尾静脉注射1×108 pfu/ml Ad.Ang-1 siRNA）.染毒36 h后收集血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织.用双抗体夹心酶标免疫分析法（ELISA法）测定各组血清和BALF中Ang-1、MMP-2,9和TIMP-1蛋白含量;用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法对肺组织Ang-1、MMP-2,9和TIMP-1mRNA表达量进行半定量研究;Western blot技术检测肺组织中MMP-2,9和TIMP-1蛋白表达量.结果 与空气对照组比较,光气染毒组和光气转染Ad/Ang1组血清、BALF中MMP-2,9蛋白含量及肺组织中MMP-2,9 mRNA和蛋白表达量明显升高,BALF中TIMP-1蛋白含量和肺组织中TIMP-1mRNA及蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）;血清中TIMP-1蛋白含量无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）.与光气染毒组比较,光气转染Ad/Ang1组血清、BALF中MMP-2,9蛋白含量和肺组织中MMP-2,9 mRNA及蛋白表达量明显减低,差异有统计学意义（P＜0.05）,BALF中TIMP-1蛋白含量和肺组织中mRNA及蛋白表达量无明显变化.结论 Ad.Ang-1siRNA可能通过抑制MMP-2,9表达来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤,但对TIMP-1表达无明显
- 何岱昆邵义如申捷张琳王静
- 关键词：腺病毒血管生成素-1光气呼吸窘迫综合征基质金属蛋白酶
- NLRP3炎症小体参与光气致急性肺损伤的炎症反应被引量：10
- 2017年
- 目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体介导的白细胞介素-1β（IL-1β）等炎性因子释放在大鼠光气致急性急性肺损伤（ALI）发病机制中的作用。方法将20只大鼠随机分为2组，空气对照组（吸入与光气染毒组同等流量的空气）10只，光气染毒组（吸入8．33mg／L纯度为100％的光气5min）10只。染毒6h后收集血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。制作肺脏石蜡切片，HE染色观察形态学改变，免疫组化检测肺组织中NLRP3蛋白表达水平。蛋白质免疫印迹试验（Western blot）技术和反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）mRNA和蛋白的表达。采用双抗体夹心酶标免疫分析法（ELISA法）测定各组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33水平；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法对肺组织IL-1β、IL-18和IL-33mRNA水平进行半定量研究。结果成功复制光气吸入性肺损伤模型。染毒6h后HE染色形态学观察可见，光气染毒组肺组织中有大量炎性细胞浸润，免疫组化染色结果显示，光气染毒组大鼠肺泡间隔增厚，肺组织中可见较多NLRP3阳性细胞。与空气对照组（mRNA：NLRP3为21．49±1．44，Caspase-1为23．38±1．37；蛋白含量的相对值：NLRP3为0．0906i-0．0257，Caspase-1为0．0942±0．0346）比较，光气染毒组肺组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达量（mRNA：NLRP3为28．19±1．11，caspase．1为28．67±0．89；蛋白含量的相对值：NLRP3为0．6556±0．1714，caspase．1为0．9641±0．2846）明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；ASCmRNA和蛋白表达量无明显变化，差异无统计学意义（P〉0．05）。与空气对照组（肺组织mRNA：IL-1β为15．25±0．72、IL-18为23．16±0．60、IL-33为22．48±1．25；血清IL-1β为109．6±1．9、IL-18为
- 何岱昆邵义如申捷张琳张静张峰
- 关键词：光气急性肺损伤炎症
- ICU患者泛耐药鲍氏不动杆菌肺部感染治疗效果分析被引量：10
- 2016年
- 目的探讨头孢哌酮/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星、替加环素对重症监护病房(ICU)泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)肺部感染治疗效果。方法回顾性分析2012年3月-2014年1月医院ICU收治的PDRAB肺部感染患者65例,其中A组23例患者应用头孢哌酮/舒巴坦治疗、B组24例患者应用头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星治疗、C组18例患者应用替加环素治疗,3组均治疗14d;监测3组治疗前后患者白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)变化,记录并比较各组患者临床疗效、脱机成功率及30d病死率。结果 A、B、C组治疗前WBC、CRP、PCT比较差异均无统计学意义,治疗后各指标均较治疗前呈降低趋势(P<0.05),且以C组PCT降低更显著,C组患者治疗总有效率88.89%、脱机成功率56.25%,均高于A组82.61%、41.74%和B组的83.33%、43.55%,差异有统计学意义(P<0.05);C组患者30d病死率22.56%,明显低于较A、B组的36.85%、35.20%(χ2=12.43,P=0.040)。结论替加环素可以提高ICU内肺部感染PDRAB患者脱机成功率和生存率,降低病死率,有较好的临床疗效。
- 张宝成钟志越李宏治梁晓俊黎俊何岱昆申捷
- 关键词：重症监护病房泛耐药鲍氏不动杆菌肺部感染
- 严重化学性肺损伤中西医结合临床救治与基础研究
- 2021年
- 危化品泄露,煤矿、化工厂、粉尘爆炸,建筑物坍塌所致狭窄空间中氮氧化物中毒等,迅速导致中毒患者并发严重化学性肺损伤,可致重大人员伤亡.此类事故有突发、群体、快速和高度致命的特点,可在瞬间大批致伤且临床处理困难.因此,中西医结合开展严重化学性肺损伤的机制及临床治疗研究特别重要.
- 无岳茂兴申捷李奇林尹进南邵义如李瑛郑琦涵冯斌朱晓腿吴兑
- 关键词：临床治疗研究氮氧化物中毒中西医结合临床粉尘爆炸
- 核转录因子-κB参与光气吸入性肺损伤NLRP3炎性小体的表达被引量：9
- 2018年
- 目的通过四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂（PDTC）阻断核转录因子-κB（NF—κB）信号传导通路，探讨NF-κB信号通路对光气吸人性急性肺损伤（ALI）大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）的表达和细胞焦亡的影响。方法采用大鼠光气吸入性肺损伤动物模型。将30只大鼠随机（随机数字法）分为三组，空气对照组（吸入与光气染毒组同等流量的空气）10只，光气染毒组（吸入8．33mg／L纯度为100％的光气5min）10只，PDTC干预组（吸人8．33mg／L纯度为100％的光气5min，腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC 100mg／kg）10只。染毒6h后收集血清，支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿／干质量比（W/D）。制作肺脏石蜡切片，HE染色观察形态学改变，免疫组织化学检测肺组织中NLRP3蛋白表达水平。RT-PCR方法对肺脏组织中NF-κBp65、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）mRNA的水平进行半定量研究。蛋白质免疫印迹试验（Western blot）技术检测肺脏组织中NF-κBp65、NLRP3、ASC和caspase-1的蛋白含量。采用双抗体夹心酶标免疫分析法（ELISA法）测定各组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33水平。采用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）法检测肺脏组织的细胞焦亡情况。结果成功复制光气吸入性肺损伤模型。染毒6h后HE染色形态学观察发现：光气染毒组肺组织中大量炎性细胞浸润，免疫组织化学染色结果显示：光气染毒组肺组织中可见较多NLRP3阳性细胞。与空气对照组相比，光气染毒组肺脏组织中NF-κBp65、NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达量明显升高（P〈0．05）；与光气染毒组比较，PDTC干预组NF-κBp65、NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达量明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。与空气对照组相比，光气染毒组血清和BALF
- 何岱昆邵义如周芳庆张琳张琳
- 关键词：光气急性肺损伤
- 甲基强的松龙对光气吸入性肺损伤大鼠NLRP3炎症小体的影响被引量：5
- 2018年
- 目的探讨甲基强的松龙（MP）对光气吸人性急性肺损伤中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体及其下游炎症因子的影响。方法将40只大鼠随机分为4组，空气对照组（吸人与光气染毒组同等流量的空气）、光气染毒组（吸入8．33mg／L纯度为100％的光气5min）、生理盐水对照组（吸入同等剂量的光气1h后尾静脉注入2mg／kg生理盐水）、MP干预组（吸入同等剂量的光气1h后尾静脉注入2mg／kg甲基强的松龙），每组10只。不同处理后6h收集血清，支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。制作肺组织石蜡切片，HE染色观察形态学改变，免疫组化检测肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平。蛋白质免疫印迹试验（Western blot）技术和RT—PCR方法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）mRNA和蛋白的表达。采用双抗体夹心酶标免疫分析法（ELISA法）测定各组血清和BALF中白细胞介素（IL）-16、IL-18和IL-33水平。结果染毒6h后HE染色形态学观察可见，光气染毒组肺组织中有大量炎性细胞浸润。免疫组化染色结果显示，光气染毒组大鼠肺泡间隔增厚，肺组织中可见较多NLRP3、ASC和caspase-1阳性细胞；MP干预组肺组织中有炎性细胞浸润较光气染毒组明显减少，同时NLRP3和caspase-1阳性细胞较光气染毒组减少，而ASC阳性细胞无明显减少。与空气对照组比较，光气染毒组肺组织中NLRP3、ASC和caspase-1mRNA和蛋白表达量明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；与光气染毒组比较，MP干预组NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达量明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05），而ASCmRNA和蛋白表达量无明显减少。与空气对照组比较，光气染毒组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33蛋白含量明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与光气染�
- 周芳庆何岱昆邵义如申捷
- 关键词：光气急性肺损伤炎症反应
- Wnt/β-Catenin信号通路在骨髓间充质干细胞治疗内毒素致急性肺损伤中的作用被引量：5
- 2015年
- 目的 探讨Wnt/β-Catenin信号通路在骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗急性肺损伤中的作用.方法 采用6只SPF雄性进行贴壁分离法分离培养骨髓间充质干细胞.采用细菌脂多糖诱（LPS）导急性肺损伤,72只6周龄SPF级雄性SD大鼠,体质量约180～220 g,随机（随机数字法）分为4组,分别为：Control组（n=18）采用PBS处理;LPS组（n=18）采用细菌脂多糖诱导急性肺损伤;LPS＋ MSCs组（n=18）在进行急性肺损伤的诱导后直接移植MSCs;Control＋ MSCs组（n=18）在注射PBS后再移植MSCs.每组分别取LPS注射后6、24和48 h三个时间点.通过肺组织免疫组化分析及免疫印迹分析法检测Wnt信号通路成分的水平.实时定量PCR检测Wnt信号通路的靶基因的表达水平.结果 相比于PBS对照组,移植MSCs的能够显著降低急性肺损伤大鼠的湿干比,同时能显著提高急性肺损伤大鼠的血氧分压的水平.通过组织免疫组化分析,发现Wnt5a在急性肺损伤的肺组织中表达水平有显著的升高,移植的MSCs能够显著降低Wnt5a的水平.免疫印迹结果显示MSCs能够通过降低GSK-3β的磷酸化和β-catenin水平起到治疗的作用.通过实时定量PCR的结果显示MSCs处理能够显著降低Wnt信号靶基因Vegf、Axin2及Klf4的表达.结论 MSCs对急性肺损伤的治疗作用是通过影响Wnt5a的水平,降低GSK-3β和β-catenin的磷酸化及提高Wnt信号靶基因的表达得以发挥的,Wnt信号通路参与到MSCs治疗急性肺损伤的过程中.
- 徐道剑张琳黎俊张静何岱昆钟志越申捷
- 关键词：急性肺损伤内毒素间充质干细胞
