无锡市社会发展科技计划项目(20040006)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：陈剑峰张烽田小武更多>>
- 相关机构：南通大学南京中医药大学更多>>
- 发文基金：无锡市社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 银杏内酯、刺五加皂甙对体外培养大鼠脊髓运动神经元缺血缺氧的作用被引量：2
- 2006年
- 目的:观察银杏内酯(ginkgolides,Gin)、刺五加皂甙(acanthopannxsenticosussaponins,ASS)对脊髓运动神经元缺血缺氧有无保护作用,并探讨其可能的机制。方法:无菌下取出孕15dSD大鼠的胚鼠,分离胚鼠脊髓运动神经元进行原代分离培养,免疫组化鉴定后建立缺血缺氧诱导的神经元凋亡模型。取运动神经元培养在24孔板中,分为对照组(无缺氧损伤)、缺氧诱导组、Gin保护组、ASS保护组、神经胶质细胞源性神经营养因子(glialcellderivedneurotrophicfactor,GDNF)保护组,每组10孔。其中保护组分别于缺氧前24h每孔加入Gin37.5μg/ml,ASS50μg/ml,GDNF0.1μg/ml(每孔800μl),缺氧后继续培养3d。倒置显微镜及电镜下观察细胞形态学变化,MTT法测定神经元细胞活性,检测细胞外液LDH释放量,提取细胞匀浆液,Western印渍法检测运动神经元HIF-1α的表达。结果:神经元的细胞活性Gin组(0.25±0.059)、ASS组(0.21±0.028)和GDNF组(0.20±0.026)均比缺氧诱导组(0.15±0.012)高(P<0.01),且Gin组效果优于ASS组(P<0.05),GDNF作用与ASS相仿(P>0.05);LDH释放量Gin组(22.8±1.645)、ASS组(28.6±1.309)和GDNF组(26.5±0.885)均比缺氧诱导组(40.7±1.885)低(P<0.01);神经元HIF-1α的相对表达量缺氧诱导组(0.72±0.027)比对照组(0.16±0.003)高(P<0.01),Gin组(1.28±0.019)、ASS组(1.15±0.016)和GDNF组(1.12±0.016)均高于缺氧诱导组及对照组(P<0.01)。结论:Gin、ASS和GDNF均可提高体外缺血缺氧损伤的脊髓运动神经元的细胞活性,对细胞的缺血缺氧损伤有明显的保护作用,Gin的保护作用强于ASS,ASS的保护作用与GDNF相仿;其保护作用的发挥,可能与增强细胞膜的稳定性及提高细胞HIF-1α的表达有关。
- 陈剑峰田小武张烽
- 关键词：银杏内酯刺五加皂甙缺血缺氧运动神经元缺氧诱导因子-1
- 刺五加皂苷对体外培养大鼠脊髓运动神经元缺氧损伤的保护作用被引量：6
- 2006年
- 目的:观察刺五加皂苷(acanthopanax senticosus saponins,ASS)对脊髓运动神经元缺氧损伤有无保护作用,并探讨其可能机制。方法:对胚鼠运动神经元进行原代分离培养,免疫组化鉴定后建立缺氧诱导的神经元凋亡模型。取运动神经元培养在24孔板中,每组10孔,分为4组:对照组,无缺氧损伤;缺氧损伤组;ASS保护组,缺氧前24 h加入50μg/ml的ASS;神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)保护组,缺氧前24 h加入0.1μg/ml的GDNF。倒置显微镜及电镜下观察细胞形态学变化;MTT法测定神经元细胞活性;检测细胞外液LDH释放量来观察ASS对神经元细胞膜稳定性的影响。提取细胞匀浆液,Western印迹法检测分析ASS对缺氧的运动神经元HIF-1α表达的影响。结果:形态学观察显示ASS、GDNF保护组神经元缺氧损伤较缺氧损伤组明显减轻。ASS保护组神经元的细胞活性(0.21±0.028)比缺氧损伤组(0.15±0.012)高(P<0.05),而LDH的释放量(28.6±1.309)比缺氧损伤组(40.7±1.885)低(P<0.01);缺氧损伤组的神经元HIF-1α的相对表达量(0.72±0.027)比对照组(0.16±0.003)高(P<0.01),但ASS保护组HIF-1α的表达(1.15±0.016)最高(P<0.01)。ASS对大鼠脊髓运动神经元缺氧损伤的保护作用与GDNF相仿。结论:ASS可以提高体外缺氧损伤的运动神经元的细胞活性,对细胞的缺氧损伤有明显的保护作用,其保护作用的发挥,可能与增强细胞膜的稳定性及提高细胞HIF-1α的表达有关。
- 陈剑峰张烽
- 关键词：缺氧运动神经元脊髓
