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溶瘤腺病毒介导RNA干扰人端粒酶逆转录酶抑制HeLa细胞生长被引量：1: 2009年; 目的观察表达人端粒酶逆转录酶siRNA(hTERT-siRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-TERT-siRNA对体外培养人宫颈癌HeLa细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法以溶瘤腺病毒ZD55-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒AD-TERT-siRNA和增殖缺陷腺病毒AD-EGFP作为对照组。不同滴度四种病毒分别感染HeLa细胞,结晶紫法检测细胞毒作用,MTT法测定细胞生长抑制率;RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学(ICC)法分别检测hTERT的mRNA、蛋白质及抗原表达,Western blot和ICC法分别测定腺病毒E1A蛋白及抗原表达。结果对HeLa细胞的生长抑制作用和细胞毒作用ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA和ZD55-EGFP>AD-EGFP;ZD55-TERT-siRNA和ZD55-EG-FP感染的HeLa细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA>ZD55-EGFP、AD-EGFP。结论溶瘤腺病毒介导RNA干扰hTERT能有效抑制HeLa细胞生长及hTERT基因表达。; 刘艳华郑骏年毛立军孙方浩温儒民张宝福李望刘俊杰裴冬生; 关键词：溶瘤腺病毒 RNA干扰

表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA的增殖腺病毒对肝癌细胞的抑制作用被引量：1: 2008年; 目的观察表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA（hTERT—siRNA）的增殖腺病毒（ZD—hTERT）对人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡影响。方法ZD—hTERT、增殖腺病毒ZD—EGFP、表达hTERT—siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad—hTERT、增殖缺陷腺病毒Ad—EGFP分别感染人肝癌Bel-7402细胞。Western blot法检测E1A表达；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot法检测hTERT表达；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活；结晶紫染色法检测细胞毒作用；原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡。结果感染ZD—hTERT、ZD-EGFP的Bel-7402细胞表达E1A；抑制hTERT表达作用依次为ZD—hTERT〉Ad—hTERT〉ZD—EGFP〉Ad—EGFP；抑制Bel-7402细胞生长及细胞毒作用依次为ZD—hTERT〉ZD—EGFP=Ad—hTERT〉Ad—EGFP。感染ZD—hTERT、ZD—EGFP、Ad—hTERT、Ad—EGFP的Bel-7402细胞凋亡率（％）分别为（88．1±2．2）、（39．2±2．1）、（42．1±5．1）、（7．5±2．1），ZD—hTERT诱导凋亡作用最高（P〈0．01）。结论表达hTERT—siRNA的增殖腺病毒能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞hTERT基因表达，进而抑制其增殖，促进其凋亡。; 徐为刘俊杰宋文哲毛立军高超韩东裴冬生郑骏年; 关键词：腺病毒 HTERT基因

表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒抑制人肾癌ACHN细胞Ki67基因表达及增殖研究: 2008年; 目的:研究表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒(ZD55-Ki67)对肾癌ACHN细胞Ki67基因表达及增殖抑制作用。方法:ZD55-Ki67、溶瘤腺病毒ZD55、表达Ki67-siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad-Ki67感染人肾癌ACHN细胞。Western印迹法检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹、免疫组织细胞化学法检测Ki67表达;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;MTT法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果:感染ZD55-Ki67、ZD55的ACHN细胞表达E1A;抑制Ki67表达作用依次为ZD55-Ki67>Ad-Ki67>ZD55。ZD55-Ki67、ZD55、Ad-Ki67感染的ACHN细胞凋亡率(%)分别为(56.3±3.1)、(25.3±2.5)、(37.0±3.0),均显著高于对照组(5.5±2.1)(P<0.01),每种病毒之间均有显著差异(P<0.01);存活率(%)分别为(40.9±2.2)、(71.3±6.6)、(86.8±3.1),每种病毒之间均有显著差异(P<0.01);对ACHN细胞的细胞毒作用ZD55-Ki67>ZD55>Ad-Ki67。结论:表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒具有显著的抑制肾癌ACHN细胞Ki67基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。; 史震郑骏年毛立军郑宏祥温儒民李望刘俊杰; 关键词：溶瘤腺病毒 KI67基因 RNA干扰

荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒对人肾癌细胞增殖的抑制作用被引量：5: 2008年; 目的研究荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒（ZD-hTERT）对肾癌Ketr-3细胞增殖抑制作用。方法ZD-hTERT、溶瘤腺病毒ZD-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad-hTERT感染人肾癌Ketr-3细胞。Westernblot检测E1A表达；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Westernblot检测hTERT表达；原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活；结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果感染ZD-hTERT、ZD-EGFP的Ketr-3细胞表达E1A；抑制hTERT表达作用依次为ZD-hTERT〉Ad-hTERT〉ZD-EGFP。感染ZD-hTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT的Ketr-3细胞凋亡率（％）分别为（65．9±1．4）、（26．5±2．8）、（16．3±3．2）。感染ZD．hTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT的Ketr-3细胞存活率（％）分别为（30．9±3．6）、（51．6±3．8）、（87．9±3．1），每种病毒之间差异有统计学意义（P〈0．01）；对Ketr-3细胞的细胞毒作用ZD-hTERT〉ZD-EGFP〉Ad-hTERT。结论表达hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒具有显著的抑制。肾癌Ketr．3细胞hTERT基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。; 陈仁富郑骏年李望刘艳华毛立军刘俊杰温儒民孙方浩裴冬生; 关键词：溶瘤腺病毒 HTERT基因 RNA干扰肾癌

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江苏省高校自然科学研究项目(06KJB320114)