国家杰出青年科学基金(39425006)
- 作品数：24 被引量：135H指数：8
- 相关作者：顾晓松张沛云王晓冬姚登兵崔学芝更多>>
- 相关机构：南通医学院东南大学南通医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金江苏省自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 坐骨神经生后发育过程中CNTF基因表达的研究被引量：1
- 1999年
- 目的 观察大鼠生长发育过程中外周神经组织CNTF基因表达的变化.方法 采用RT-PCR的方法,半定量分析正常大鼠坐骨神经发育过程中CNTF mRNA表达量.结果 正常大鼠生后仅1d,其坐骨神经中即可见CNTF mRNA表达,但表达量较低;出生14d后,表达量明显增加;30d时表达量达高峰,60d时的表达量稍有下降趋势.结论 大鼠出生后其坐骨神经中CNTF基因表达量随着周围神经的发育过程而有相应的变化.提示CNTF在周围神经生后发育过程中具有重要作用.
- 顾晓松丁斐曹铮姚登兵
- 关键词：MRNA坐骨神经发育RT-PCR
- 医用可降解材料聚乙醇酸与脊髓生物相容性实验研究被引量：3
- 2000年
- 目的 :探索医用可降解材料聚乙醇酸 (Polyglycolic Acid,PGA)与大鼠中枢神经系统脊髓的生物相容性。方法 :取成年 SD大鼠行腰 1脊髓左半切洞损伤 ,植入医用可降解材料聚乙醇酸纤维 ,术后分期取聚乙醇酸纤维行改良三色染色 ,同时部分标本用抗 GFAP单抗 ,抗 NF单抗免疫组织化学特异性染色胶质细胞和神经轴突。结果 :脊髓胶质细胞及神经元突起附着 PGA纤维迁移生长 ,随着时间延长 ,PGA纤维上细胞数量增多 ,神经突起长度增加 ,生长状态活跃。结论
- 朱兴华邓传宗王晓冬张沛云顾晓松
- 关键词：聚乙醇酸生物相容性
- 实验性铅中毒对睾丸神经生长因子基因表达的影响被引量：18
- 2000年
- 目的 探讨实验性铅中毒对睾丸组织神经生长因子 (NGF)基因表达的影响。 方法 小鼠以 0 .5 %醋酸铅自由饮服 8周 ,测定血铅和睾丸铅含量。采用原位杂交法 (以地高辛标记 NGF DNA为探针 )和 RT- PCR方法 ,观察睾丸组织 NGF m RNA含量的变化。 结果 铅染毒小鼠血铅和睾丸组织铅含量明显升高 ;原位杂交结果显示 ,铅染毒小鼠睾丸杂交信号明显减少 ;RT- PCR结果表明 ,铅染毒小鼠睾丸组织 NGF m RNA表达量明显下降。 结论 铅中毒可使睾丸组织
- 丁斐顾晓松姚登兵王晓冬
- 关键词：神经生长因子MRNA睾丸铅中毒
- dd-PCR法研究中草药促神经生长过程中的基因差异表达被引量：6
- 1999年
- 目的 :为探讨中药促神经生长的分子机理提供实验依据。方法 :采用 dd-PCR方法 ,从体外培养大鼠背根神经节细胞加中药组和不加中药组中获得两者的差异表达片段 ,并克隆测序分析。结果 :获得 7个差异条带 ,其中 2个条带的 c DNA序列分别与酪氨酸磷酸酶受体 ( PTPR) m RNA、促生长素抑制素受体 ( SSTR) m RNA的序列部分同源。结论 :在中药促神经生长过程中 。
- 刘梅顾晓松刘炎崔学芝邱一华张沛云
- 关键词：神经生长DD-PCR基因表达
- 周围神经65KD蛋白对培养鼠胚脊髓运动神经元的影响
- 1999年
- 目的了解周围神经损伤后其远侧端特异性表达的65KD蛋白对鼠胚脊髓运动神经元的影响。方法选用SD大鼠坐骨神经横断后二周的动物模型,自然凝胶系统电泳分析损伤后神经远侧端中的蛋白组分,将65KD蛋白区带胶条与14天鼠胚脊髓运动神经元联合培养。结果损伤后二周的坐骨神经远侧端中特异性地出现表达增强的65KD蛋白;与含65KD蛋白区带胶条联合培养的脊髓运动神经元细胞存活数量多、突起生长旺盛。结论坐骨神经损伤后其远侧端组织中65KD蛋白表达增强,该蛋白具有促进鼠胚脊髓运动神经元存活与突起生长的作用。
- 张沛云顾晓松崔学芝周亚军何江虹
- 关键词：KD脊髓运动神经元蛋白鼠胚突起生长周围神经
- 培养的周围神经组织特殊三色染色法被引量：1
- 1999年
- 目的 :以特殊三角染色法显示培养的周围神经组织中轴索及雪旺氏细胞等结构。方法 :大鼠背根神经节体外培养后 ,用苏木素精、固绿 FCF、变色素 2 R及磷钨酸等配制三色染色液染色。结果 :神经轴索呈蓝绿色 ,雪旺氏细胞核为红色或紫红色 ,胞质为浅灰色。结论
- 孟凡迅王晓冬张沛云柯靖顾晓松
- 关键词：神经组织细胞培养轴索雪旺氏细胞
- 睫状神经营养因子的研究进展
- 2000年
- 睫状神经营养因子 ( CNTF)能够促进感觉、运动和交感神经元存活 ,在神经系统发育、分化和损伤修复过程中发挥重要作用。CNTF与白血病抑制因子、白细胞介素 - 6有相似的空间结构 ,它们的受体复合物由 3个亚基组成 ,即作为结合蛋白的 α亚基 ,以及信号传递体的 gp1 30和 L IFRβ。
- 朱道立
- 关键词：睫状神经营养因子受体神经发育
- Tropic1808基因重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2002年
- 目的 制备Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,并对其生物学特性进行鉴定。方法 用Tropic180 8基因重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠 ,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤 (SP2 / 0 )细胞融合 ,经ELISA筛选和有限稀释法获得分泌单克隆抗体的细胞株 ,WesternBlot等方法对其生物学特性进行鉴定。结果 获得 2株识别Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体的细胞株Ⅱ 4B、Ⅲ 4C。WesternBlot法显示该抗体特异性地识别Tropic180 8基因重组蛋白 ;ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清及体内成瘤后产生的腹水的抗体效价分别为 1∶80、 1∶6 0 0 ;杂交瘤细胞染色体数平均为 90～ 10 0 ;亚类鉴定单抗的重链为小鼠IgG1,轻链为κ型。结论 成功地制备了Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,为进一步研究Tropic180 8基因重组蛋白的功能提供了良好的基础。
- 陈雪张沛云王晓冬吴坚
- 关键词：单克隆抗体
- 生后不同时期大鼠坐骨神经NGF基因的表达被引量：9
- 2000年
- 采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势。开始时增加速度较慢 ,但随鼠龄的增加而逐渐加快 ,至 49d时达到最快 ,然后逐渐减慢 ,到 12 0 d时已接近生后稳定表达水平。
- 丁斐徐炜岚顾晓松姚登兵
- 关键词：NGFMRNART-PCR年龄变化坐骨神经
- Tropic1808基因的原核表达及其表达产物的生物活性被引量：11
- 2001年
- Tropic180 8基因是新近获得的一个鼠源性的cDNA .Tropic180 8基因开放阅读框架片段通过PCR方法从质粒中扩增后 ,重组入表达载体pET 2 1a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) .用IPTG诱导目的蛋白的表达 ,SDS PAGE并凝胶图象分析确定目的蛋白表达水平占细菌总蛋白的 14%以上 .表达蛋白在N端融合有 16个氨基酸 ,将表达蛋白电转移至PVDF膜 .氨基酸序列分析表明 ,其N端第 17～ 2 5位氨基酸序列与Tropic180 8基因编码序列一致 .利用融合部分含T7·Tag ,通过亲和层析纯化表达蛋白 ,经Westernblot检测为目的蛋白 ,加入到无血清培养的新生SD大鼠背根神经节 (DRG)中 ,观察到表达蛋白对DRG具有促进存活和促进突起生长的作用 .
- 崔学芝顾晓松张沛云王志刚姚登兵
- 关键词：原核表达氨基酸序列分析背根神经节生物活性神经再生
