国家自然科学基金(30672234)
- 作品数：5 被引量：11H指数：4
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- F10基因过表达对A549细胞致瘤性的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨F10基因过表达对肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响及其机制。方法取SPF级裸鼠（4~5周龄）18只,随机均分为A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组（n=6）,依次接种野生A549细胞（A549-WT）、转染了空载体的对照细胞株（Mock-A549）和已构建的过表达F10基因的A549细胞（F10＋A549）5×106个于颈背部皮下。接种后每3～4d称体重并观察,记录肿瘤发生时间,绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。各组裸鼠于接种5周后处死,进行大体观察后取瘤组织块制备石蜡切片,HE染色后行病理组织学观察,并采用免疫组化法检测Caspase-3、Bax和Bcl-2在瘤组织中的表达。结果 A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组裸鼠的成瘤时间分别为12.0±1.4、11.7±1.0、8.5±1.4d,组间比较差异有统计学意义（F=13.523,P=0.000）,A549-WT组和Mock-A549组裸鼠成瘤时间长于F10＋A549组（P〈0.05）,而前两组比较差异无统计学意义（P=0.660）。大体观察可见,F10＋A549组成瘤体积较A549-WT和Mock-A549组明显增大。F10＋A549组肿瘤的在体生长速度较A549-WT和Mock-A549组增快,差异有统计学意义（P〈0.05）,而后两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肿瘤组织HE切片显示,A549-WT和Mock-A549组成瘤组织中存在较多坏死细胞,HE染色表现为均质红染、无定形物质结构,而F10＋A549组成瘤组织边缘细胞坏死较少,细胞增生明显,且肿瘤组织局部可见微血管生成。免疫组化检测显示,Bcl-2蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中几乎无表达,而在F10＋A549组瘤组织中表达较多,阳性细胞呈弥漫性分布。Bax和Caspase-3蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中的表达均较强,尤以A549-WT组为显著,但在F10＋A549组瘤组织中表达均很弱。结论 F10基因可通过下调Caspase-3和Bax表达、上调Bcl-2表达而增强肺癌A549细胞株在裸鼠体内的致瘤性。
- 宋亚丽张弓庞战军朱秀兰杨晓萍李雅芳全松邢福祺
- 关键词：肺肿瘤A549细胞致癌性试验
- F10下调通过细胞色素C促进KLE细胞凋亡被引量：2
- 2008年
- 目的建立F10基因表达稳定下调的KLE细胞系,探讨F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机制。方法将两条合成的寡核苷酸退火后形成的双链DNA连接到逆转录病毒载体pRetroQ上构建表达质粒pRetroQ-iF10,脂质体转染KLE细胞,嘌呤霉素筛选,获得单细胞克隆;荧光定量RT-PCR鉴定阳性克隆。流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量RT-PCR和western blot检测细胞色素C和Bcl-2表达。结果两个抗性克隆呈现F10 mRNA表达显著下调。F10基因沉默的KLE细胞克隆凋亡率较对照组增加近9倍,细胞色素C mRNA表达上调、胞浆细胞色素C表达增加,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调。结论成功构建F10基因表达稳定下调的KLE细胞系,F10基因表达下调导致细胞凋亡;细胞色素C的释放可能是F10沉默诱导KLE细胞凋亡的途径之一。
- 崔艳国全松邢福祺
- 关键词：RNA干扰
- 葡萄胎发病新基因F10在原发性肝癌中的表达分析被引量：6
- 2007年
- 目的通过检测原发性肝细胞癌中F10基因的表达,探讨该基因对肝细胞癌发生和发展的可能作用。方法采用地高辛标记F10探针,原位杂交检测人肝细胞癌组织及癌旁组织F10基因的表达水平;通过实时荧光定量PCR方法,在PEABI7000型荧光定量PCR仪上检测肝细胞癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织F10基因拷贝数。结果原位杂交结果表明肝癌组织F10基因阳性表达,癌旁组织F10基因不表达;荧光定量PCR显示8例肝细胞癌标本中有6例肿瘤组织中F10基因表达明显高于癌旁组织,其中2例高出4倍以上。结论原发性肝癌组织中存在F10基因的高表达,相应的癌旁组织中未见其表达,提示F10基因在肝细胞癌的发生、发展中起一定的作用。
- 周瑾邢福祺余良宽庞战军冯桂萍
- 关键词：原位杂交实时荧光定量聚合酶链反应
- 葡萄胎发病新基因F10在子宫内膜癌的表达分析被引量：7
- 2008年
- 周瑾余良宽冯桂萍庞战军邢福祺
- 关键词：原位杂交子宫内膜肿瘤
- RNAi下调F10基因表达对KLE细胞凋亡的影响被引量：8
- 2008年
- 目的探讨小分子双链RNA对KLE细胞中F10基因的沉默效应,并确定F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响。方法采用体外转录法制备针对F10基因的dsRNA;脂质体转染KLE细胞,荧光定量PCR检测dsRNA转染KLE细胞不同时间后细胞中F10基因的表达水平;流式细胞仪检测F10基因沉默后KLE细胞凋亡的改变。结果体外转录法能制备足够的dsRNA;F10基因表达水平的检测证实转染KLE细胞的dsRNA下调了F10基因表达,20nmol/LdsRNA转染48h的效应最为显著,基因下调达到83%;20nmol/LdsRNA转染48h,KLE细胞凋亡百分率从0.36%增加至8.91%。结论体外转录制备的针对F10基因的dsRNA能特异有效沉默KLE细胞中的F10基因;F10基因的表达下调可诱导KLE细胞的凋亡。
- 崔艳国全松邢福褀
- 关键词：RNAI
