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KGF-2单克隆抗体间接ELISA筛选方法的建立被引量：3: 2010年; 目的建立KGF-2单克隆抗体间接ELISA的筛选方法 ,制备KGF-2单克隆抗体.方法以KGF-2为抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.通过棋盘滴定方法确定间接ELISA的抗原包被浓度及一抗、二抗最佳工作浓度;利用建立特异性好的间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞株.结果通过棋盘滴定最终确定了500μg/L的抗原包被浓度、1∶1 000的一抗血清稀释倍数及1∶2 000的二抗血清稀释倍数;筛选到两株可稳定分泌抗体、效价较高的杂交瘤细胞株.结论该研究建立了灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于KGF-2单克隆抗体的制备及检测.; 朱佳男姚娜官丽莉车莹李校堃; 关键词：杂交瘤细胞

过表达α-synuclein的细胞毒性及对损伤性刺激的影响: 2010年; 目的构建过表达α-synuclein的细胞模型,研究过表达α-synuclein的细胞毒性作用及其分子机制,为揭示帕金森病(PD)可能的发病机制和寻找治疗药物潜在靶点提供依据。方法脂质体法转染及过表达α-synuclein稳定株的构建,MTT法、PI染色、荧光显微镜观察用于检测过表达α-synuclein对细胞活性和分化、撤血清及MPP+损伤的影响,荧光素酶报告基因检测和Western印迹检测用于研究过表达α-synuclein对NF-κB信号通路及相关蛋白的影响。结果过表达α-synuclein对细胞的分化表型无明显影响,但能明显降低DA能细胞存活率,并显著增加撤血清损伤及MPP+毒性对细胞的损伤程度。过表达α-synuclein能够明显加重MPP+对NF-κB转录激活活性的抑制作用,其机制可能与抑制IκB-α的磷酸化有关。结论基于遗传背景与环境因素相结合的PD研究模型能够更好地拟合其病理过程,更加科学合理。NF-κB信号通路活性的抑制可能是PD发病的又一新机制,针对该通路上相关蛋白的深入研究可能成为PD治疗药物开发的新型研究方向。; 金金苑玉和杨波孙建栋陈乃宏; 关键词：Α-SYNUCLEIN 细胞毒性 MPP+NF-ΚB

左旋奥硝唑剂量递增人体耐受性及药动学研究被引量：7: 2011年; 目的研究中国健康志愿者静脉滴注左旋奥硝唑剂量递增的耐受性、安全性及药动学。方法 20名健康男性、20名健康女性受试者按体重分层随机分入4组,分别接受500,1 000,1 250,1 500 mg单次用药试验;单次用药试验结束清洗2周后,500 mg剂量组再次接受每天早、晚500 mg连续5 d的多次用药试验;1 000 mg剂量组再次接受1 000 mg奥硝唑(阳性对照比较不良反应)的单次用药试验。观察不良事件,HPLC测定血浆中左旋奥硝唑浓度,BPSS2.0计算主要药动学参数。结果单次静脉滴注左旋奥硝唑500,1 000,1 250,1 500 mg的不良反应为0/9,0/10,0/10,2/10;多次静脉滴注左旋奥硝唑500 mg的不良反应为3/10;单次静脉滴注消旋奥硝唑1 000 mg的不良反应为5/10。单次用药500,1 000,1 500 mg,多次用药500 mg的ρmax分别是(8.63±2.57),(18.6±4.08),(27.5±10.6),(23.4±4.67)mg·L-1;AUC0-60分别为(109.5±24.0),(293.1±69.9),(422.9±84.0),(412.3±99.4)mg.h.L-1。结论中国健康志愿者静脉滴注左旋奥硝唑500～1 500 mg单剂量,500mg多剂量是安全,能够耐受的;500～1 500 mg内呈线性药动学特征,多次用药后体内有一定蓄积。; 赵亚男吴佩孙华杨菁菁过怿赟柳晓泉; 关键词：耐受性药动学

异地衣糖和藏红花醇提物对海马齿状回长时程增强影响的比较研究: 2009年; 长时程增强是神经系统信息储存的细胞水平模型,被认为是学习和记忆的形成机制。长时程增强电生理技术常用于促进记忆药物的筛选实验。海马齿状回长时程增强筛选研究发现,异地衣糖能在20 pulses/100Hz的刺激条件下诱导出长时程增强,而单独应用该刺激条件并不能诱导出长时程增强。研究经验表明具有这样作用的受试药物,往往能够拮抗30%乙醇抑制30 pulses/60Hz刺激条件诱导的长时程增强,比如藏红花醇提物。但在随后的研究中发现,异地衣糖不能拮抗30%乙醇对30 pulses/60Hz刺激条件诱导的长时程增强,提示异地衣糖与藏红花醇提物的促进长时程增强作用机制不同,是通过某一未知的新机制实现的。; 贺文彬张俊龙薛薇胡金凤武冬慧陈乃宏; 关键词：海马长时程增强

鹿茸醇提取物对大鼠海马长时程增强的易化作用被引量：4: 2009年; 目的研究鹿茸醇提物对海马CA3区Schaffer侧枝-CA1区通路长时程增强的影响。方法采用立体定位仪固定大鼠头部,按照脑立体定位图谱确定刺激电极坐标和记录电极坐标,在体电生理技术检测海马CA1区长时程增强。本研究共包括3组实验,LRE和LRW对基础突触传递的作用,实验分为两组LRE(500mg/kg)组和LRW(500mg /kg)组,每组各5只大鼠;LRE和LRW对强高频刺激S-HFS诱导LTP的影响,实验分为3组,即溶剂对照组(Vehicle)(n=8)、LRE(500mg/kg)组(n=5)和LRW(500mg k/g)组(n=5);LRE和LRW对弱高频刺激W-HFS诱导LTP的影响,实验分为5组,即Vehicle组(n=7)、LRW(500mg/kg)组(n=6)、LRE(100mg/kg)组(n=5)、LRE(250mg/kg)组(n=5)、LRE(500mg/kg)组(n=5)。结果单独给予20pulses100Hz的弱刺激不能诱导出长时程增强;灌胃给予鹿茸醇提物500mg/kg,作用30min后,应用同等强度的弱刺激能够成功诱导出长时程增强;而鹿茸水提物则无此作用。结论鹿茸醇提物能够易化海马CA1区长时程增强,具有潜在的促智作用。; 贺文彬张俊龙薛薇胡金凤王晓峰陈乃宏; 关键词：海马突触可塑性长时程增强易化作用

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国家科技重大专项(2008ZX09101)