教育部科学技术研究重点项目(210010)
- 作品数：2 被引量：3H指数：2
- 相关作者：阮海华赵辉王昌禄陶永清李健娇更多>>
- 相关机构：天津商业大学天津科技大学天津市食品生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 过表达沙门氏菌效应蛋白SopB对HeLa细胞骨架的影响被引量：2
- 2013年
- [目的]研究沙门氏菌感染宿州细胞过程中,沙门氏菌Ⅲ型分泌系统的效应蛋白SopB对宿主细胞细胞骨架的影响,同时寻找SopB蛋白调控细胞骨架变化的相关结构域。[方法]利用基因克隆的方法分别构建含鼠伤寒沙门氏菌LT2效应蛋白SopB的全长基因、SopBN末端基因片段及SopB肌醇磷脂酶活性中心氨基酸C460突变体的重组质粒,使其均在HeLa细胞中过量表达,对表达结果进行检测。[结果]SopB重组质粒在HeLa细胞中均能正常表达,其中SopB蛋白的过表达能显著改变HeLa细胞的细胞骨架,使细胞由正常的细胞形态转变为圆形。[结论]通过比较SopB各基因片段对细胞形态的影响,发现SopB过表达在改变HeLa细胞骨架方面与其N末端第46～112位氨基酸残基间的肽断直接相关,而与其肌醇磷脂酶活性关系不大。
- 阮海华赵霞张振奇
- 关键词：沙门氏菌属细胞骨架
- 沙门菌效应分子SopB激活HeLa细胞MAPK蛋白激酶的磷酸化被引量：3
- 2011年
- 目的研究沙门菌感染宿主细胞的过程中,沙门菌III型分泌系统分泌的效应蛋白SopB对宿主细胞蛋白激酶MAPK的激活作用,同时寻找SopB蛋白与MAPK激活有关的结构域。方法通过基因克隆的方法将沙门菌SopB全长基因以及各种SopB truncation均被克隆至pCS2-EGFP质粒载体中,利用磷酸钙转染法将该SopB重组质粒转染至HeLa细胞,24h后通过westernblot方法利用磷酸化的pERK1/2、p-p38以及pJNK抗体检测HeLa细胞MAPK蛋白激酶受SopB激活的情况。结果在HeLa细胞中过量表达SopB蛋白能够显著诱导蛋白激酶MAPK的磷酸化激活,进一步在HeLa细胞中表达SopB各种truncation片段证实,SopB对HeLa细胞MAPK蛋白激酶的激活与其N末端29个氨基酸直接相关。结论 SopB可以激活宿主细胞MAPK信号途径,且这种活性与其N末端29个氨基酸有关。
- 陶永清刘崇基李健娇徐新王津晗韩娜张磊赵辉阮海华王昌禄
- 关键词：沙门菌属丝裂原激活蛋白激酶类蛋白激酶类泛素化磷酰化
