辽宁省科学技术计划项目(2001225001-13)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：鲁艳明张淑兰赵彦艳孟丽荣更多>>
- 相关机构：中国医科大学澳门理工学院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小分子干扰RNA诱导卵巢上皮性癌细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2006年
- 鲁艳明张淑兰赵彦艳
- 关键词：卵巢癌细胞凋亡小分子HER-2基因SKOV3细胞
- siRNA特异性抑制卵巢癌细胞生长因子受体-2基因表达及其意义的研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制卵巢癌细胞表皮生长因子受体-2(HER-2)基因的表达及其细胞效应。方法实验分为以下3组空白对照组(未经转染的人卵巢癌SKOV-3细胞)、转染非特异性的siRNA组及转染特异性的siRNA组。干涉后5d加顺铂。采用半定量PCR技术(RT-PCR)和Western印迹法检测HER-2mRNA和蛋白的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞对顺铂的化学敏感性的变化,分析观察细胞生物学特性的改变。结果HER-2siRNA对HER-2mRNA表达明显抑制,作用能持续10d左右;干涉第7天后开始出现蛋白质表达的明显减弱,转染特异性siRNA组的蛋白质阳性表达率为(25·5±0·8)%,非特异性siRNA组为(95·7±0·8)%,空白对照组为(96·6±1·2)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0·001)。干涉后随着HER-2mRNA表达下降,细胞凋亡增加,第6天凋亡率最高,达(53·2±1·0)%,转染非特异性siRNA组为(4·1±0·3)%,空白对照组为(4·1±0·3)%,差异有统计学意义(P<0·001);干涉后,转染特异性siRNA组的细胞存活率为(58·4±0·8)%,转染非特异性siRNA组为(68·0±0·6)%,空白对照组为(67·0±0·3)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0·001)。结论体外合成的siRNA能有效抑制SKOV-3细胞中HER-2表达,促进细胞的凋亡,提高细胞对顺铂的敏感性,RNAi为卵巢癌的基因治疗提供了一种新策略。
- 鲁艳明张淑兰孟丽荣赵彦艳
- 关键词：受体卵巢肿瘤顺铂
- HER-2 siRNA对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响被引量：7
- 2005年
- 目的:观察表皮生长因子受体2(HER-2)siRNA转染SKOV-3细胞抑制HER-2表达后对卵巢癌细胞耐药性的影响.方法:体外转录合成HER-2序列特异性双链RNA(dsRNA),转染SKOV-3细胞株中,RT-PCR方法检测转染前后HER-2基因的mRNA的表达,MTT法检测顺铂对转染前后卵巢癌细胞的生长抑制率.结果:HER-2siRNA转染72 h后,对SKOV-3细胞HER-2 mRNA表达明显抑制.在不同浓度顺铂(0.05～50μg/ml)的作用下,转染HER-2 siRNA与转染非特异性siRNA、空白对照组相比,差异有十分显著性意义(P＜0.01).细胞对顺铂的敏感性约提高10倍.结论:体外转录合成的siRNA能有效抑制SKOV-3细胞中HER-2的表达,提高细胞对顺铂的敏感性,RNA干扰技术为卵巢癌的治疗提供了一种新策略.
- 鲁艳明张淑兰
- 关键词：双链RNA卵巢癌表皮生长因子受体2
- HER-2基因沉默对卵巢癌细胞体外增殖能力的影响被引量：2
- 2006年
- 目的体外转录合成HER-2siR-NA,转染卵巢癌细胞,检测其对细胞生长增殖能力的影响。方法采用real-timePCR检测HER-2mRNA表达情况,采用细胞计数及MTT绘制细胞生长曲线及检测细胞增殖率的变化,并同时采用TUNEL法检测细胞凋亡形态学的变化。结果特异性干涉组细胞HER-2基因的表达水平明显下降,real-timePCR结果显示在干涉后第3天及第6天,特异性干涉组与非特异性干涉组及空白对照组相比,差异有统计学意义,P值均为0.000;而非特异性干涉组与空白对照组之间相比,差异无统计学意义,P值分别为0.653和0.522。特异性干涉组细胞的增殖能力在48、72及96h不同时间点与非特异性干涉组及空白对照组相比,差异均有统计学意义,P值分别为0.023、0.000和0.030。TUNEL结果显示,特异性干涉组出现细胞胞质浓缩,胞核浓聚致密的斑点状,大小不一,形成凋亡小体。结论体外转录合成的HER-2siRNA能特异抑制HER-2基因表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,siRNA有望成为卵巢癌分子靶向治疗的一个新工具。
- 鲁艳明张淑兰赵彦艳
- 关键词：RNA干扰HER-2卵巢肿瘤
