福建省自然科学基金(2007J0085)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 碱性成纤维细胞生长因子基因修饰的骨髓基质干细胞／乙交酯-丙交酯共聚物复合体对大鼠脊髓损伤的修复作用被引量：1
- 2011年
- 目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因修饰的骨髓基质干细胞（BMSCs）与乙交酯-丙交酯共聚物（PLGA）构成的复合体移植于大鼠脊髓半横切处对大鼠脊髓修复的疗效。方法240只B半横切脊髓损伤大鼠随机平均分成4组（每组60只）后行相关材料移植：A组移植bFGF—BMSCs＋PLGA。B组移植bFGF—BMSCs，C组移植BMSCs，D组仅用生理盐水冲洗。术后3d、2周、3周、8周、12周时每个时间点各组随机取12只大鼠先行BBB运动功能评分及SEP监测；后处死大鼠并取损伤区脊髓组织，6只用于RT-PCR检测bFGF基因mRNA的表达，6只用于免疫组化检测神经丝蛋白-200、生长相关蛋白-43、胶质纤维酸性蛋白的表达，并采用HE染色行形态学观察。结果BBB评分结果：2周之前各组BBB评分均小于2分，差异均无统计学意义（P〉0．05）；3周以后各组评分恢复加快且A组评分高于其他组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。SEP监测结果：术前所有大鼠均可监测到SEP，术中SEP显示达到潜伏期延长10％或波幅降低50％的脊髓损伤标准，术后3周之前所有大鼠均监测不到SEP，8周之后各组只有部分大鼠能监测到SEP。RT-PCR结果、HE染色及免疫组化结果均显示A组较其他组可明显促进轴突再生。结论大鼠脊髓半横切损伤后，单纯BMSCs移植可在一定程度上促进神经再生，移植bFGF—BMSCs可改善治疗，而移植bFGF-BMSCs＋PLGA复合体可进一步提高疗效。
- 刘文革王振宇李建东姚志鹏
- 关键词：骨髓细胞
- 绿荧光蛋白基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞复合聚丙交酯-乙交酯膜的形态学观察被引量：2
- 2010年
- 目的 观察绿荧光蛋白（GFP）基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞（rMSCa）与聚丙交酯-乙交酯（PLGA）膜材料复合培养,为后续种子细胞.基因-支架材料-神经营养因子复合方法构建组织工程化脊髓的可行性提供依据.方法 GFP的过表达慢病毒载体（lv-GFP）转染的rMSCs-GFP按8000个细胞/cm2与PLGA膜材料复合培养,以普通培养板上的rMSC-GFP作为对照;荧光显微镜下观察细胞的形态学特性,噻唑蓝法测定每天细胞的生长增殖情况;流式细胞仪测定PLGA膜材料上第3天rMSCs-GFP的细胞周期,用FTTC标记的抗体CD34、CD90和用PE标记的抗CD44、CD106、CD45、CD11b对在膜材料上培养的第3天rMSCs-GFP进行流式细胞鉴定.结果 rMSCs-GFP在PLGA膜上贴壁生长,绝大多数MSCs可见绿色荧光,为成纤维细胞样形态,散在分布,第3天时细胞增多,开始变为多角形,第7天时细胞基本铺满膜,多为多角形和短梭形,与普通培养板上细胞相似,细胞的生长增殖在PLGA膜上与培养板上大致相同,细胞周期也大致相同[G1期细胞占89.7%,132期细胞占3.3%,S期细胞占7.0%,差异无统计学意义（P〉0.05）],细胞在PLGA膜上高表达CDg0（99.48%）、CD44（95.25%）、CDl06（77.12%）.结论 骨髓间充质干细胞是脊髓组织工程适宜的种子细胞,重组GFP的过表达慢病毒感染的后的MSCs与PLGA膜材料具有良好的组织相容性,可进一步复合方法体外构建组织工程脊髓.
- 刘文革林海淋
- 关键词：骨髓间充质干细胞聚丙交酯-乙交酯
