湖北省自然科学基金(2005ABA201)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
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- 发文基金：湖北省自然科学基金武汉市青年科技晨光计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种简便快速筛选重组子的方法被引量：7
- 2005年
- 将转化后的单菌落置于快检缓冲液中,振荡后,直接通过琼脂糖凝胶电泳比较质粒大小,2 h内可筛选出重组子.详细介绍了快检缓冲液配方、快检效果、注意事项以及与其它方法的优势比较.
- 张桂敏刘振李春华马立新
- 关键词：重组子
- 硅胶破碎法抽提真菌染色体DNA被引量：4
- 2006年
- 在进行基因组步行PCR克隆真菌木聚糖酶基因的研究中,探索并建立了一套可在普通分子生物学实验室采用的高得率、高质量真菌染色体DNA的抽提方法.采用液氮研磨和硅胶破碎相结合提高染色体DNA得率,采用亚精胺法纯化提高DNA的纯度.抽提的染色体DNA用琼脂糖凝胶电泳、限制酶切、PCR反应及紫外吸收光谱等方法进行了鉴定,结果显示此方法可以获得分子量大、样品纯的染色体DNA,可有效地用于PCR扩增,并能被限制酶有效地消化.
- 张桂敏唐文杰班静马立新
- 关键词：真菌染色体DNA
- 土壤微生物DNA木聚糖酶基因多样性的研究被引量：7
- 2006年
- 采用国产硅胶GF254(60型)代替进口Glass bead的改良方法抽提土壤微生物DNA,然后设计了一对扩增木聚糖酶基因片段的新简并引物,对抽提的土壤微生物DNA进行PCR扩增。扩增片段连接pMD18T载体,转化大肠杆菌,重组片段通过酶切进行RFLP分析后,测序分析得到10个木聚糖酶基因片段。对所得片段翻译的氨基酸序列进行BLAST分析表明有8个片段与来自放线菌的木聚糖酶具有较高的同源性,2个与假单胞菌的木聚糖酶具有较高的同源性。所得10个木聚糖酶片段的氨基酸序列同源性比较显示,第27个氨基酸均为天冬酰胺(N),暗示这些来自土壤微生物DNA的基因片段编码耐碱的木聚糖酶。通过构建系统进化树,发现扩增的木聚糖酶片段之间的相似性均在70%以上。
- 张桂敏庄永红刘婷马立新
- 关键词：木聚糖酶基因多样性
