国家教育部博士点基金(20060610068)
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
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- 相关机构：四川大学华西医院华西医科大学四川大学更多>>
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- Cdc42小干扰RNA对结肠癌细胞恶性表型的影响
- 2009年
- 目的研究细胞周期分裂蛋白Cell divisioncy cle42(Cdc42)小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌细胞恶性表型的影响.方法Western blot检测五种结肠癌细胞系中Cdc42的表达。设计并合成靶向Cdc42编码区的三对siRNA及阴性对照RNA,应用LipofectamineTM2000分别转染结肠癌细胞系中高表达Cdc42的Lovo和SW620细胞,RT-PCR和Western-blot分别检测48h后Cdc42mRNA及蛋白的表达。Cell Counting Kit-8检测细胞的增殖能力,损伤刮擦实验和Transwell小室法分别检测细胞迁移与侵袭能力的变化。结果RT-PCR和Western blot检测显示,Cdc42-siRNA能显著下调Cdc42mR-NA和蛋白水平,尤其Cdc42-siRNA1;siRNA处理后的肿瘤细胞增殖受到抑制,细胞迁移、侵袭能力也显著降低。结论Cdc42-siRNA可有效抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。提示Cdc42可能成为抑制结肠癌细胞增殖和转移新的分子靶点。
- 刘素蕊张思源刘明朱亚杰周继陶黄娟唐秋琳陈向征郎楠毕锋
- 关键词：结肠癌CDC42RHOSIRNA
- Rac1小干扰RNA对胃肠道肿瘤细胞恶性生物学行为的影响被引量：8
- 2009年
- 目的观察Rac1小干扰RNA(Rac1 siRNA)对胃肠道肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法Rac1 siRNA在lipofectamineTM2000介导下转染胃癌SGC803细胞和结直肠癌Lovo细胞,转染48h后,采用半定量RT-PCR和Western blot技术分别检测Rac1mRNA及蛋白的表达;Cell Counting Kit-8检测Rac1siRNA转染细胞的增殖变化;损伤刮擦实验和体外侵袭实验(Transwell小室)分别检测转染细胞株的迁移与侵袭能力;用流式细胞仪检测转染细胞株的凋亡。结果成功转染Rac1 siRNA的肿瘤细胞,RT-PCR及Western blot显示Rac1 mRNA和蛋白表达在相应的肿瘤细胞中都明显下降;Rac1 siRNA对肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭均有显著的抑制作用并能促进肿瘤细胞的凋亡。结论Rac1与胃肠道肿瘤细胞的恶性生物学行为密切相关。Rac1 siRNA能够部分逆转胃癌细胞SGC803和肠癌细胞Lovo的恶性生物学行为。
- 黄娟郎楠刘明陈济周继陶朱亚杰刘素蕊唐秋琳陈向征毕锋
- 关键词：RAC1SIRNA
- RhoA小干扰RNA对胃癌AGS细胞基因表达谱的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:应用RhoA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染胃癌细胞系AGS细胞,采用高通量基因芯片技术,筛选基因表达谱的变化,为进一步研究RhoA信号转导通路奠定基础。方法:用pSilencer3.1载体构建RhoA/siRNA重组质粒。Effectene转染试剂转染AGS细胞,空载体pSilencer3.1转染对照组。应用G418筛选转染细胞系,获得稳定转染细胞;美国Agilent基因芯片检测细胞基因表达谱变化。结果:基因芯片检测全基因组,发现表达上调的有1151个基因,表达下调的有1079个基因,涉及信号转导、细胞周期、细胞凋亡等相关信号分子。生物信息学分析显示,与细胞凋亡有关的caspase家族,以及细胞周期调控基因存在明显的差异表达。结论:基因芯片结果提示干扰RhoA表达后,与凋亡和增殖有关的分子在RhoA介导的肿瘤细胞异常增殖信号转导中起着重要的调控作用,为下一步研究其信号调控网络机制提供重要的信息。
- 张思源张祥海石芳邱萌罗德云李志平唐秋琳邓禹毕锋
- 关键词：胃癌SIRNA基因芯片
- 酵母双杂交筛选原癌基因proto-Dbl的上游调控分子
- 2010年
- 目的探讨VL domain对Dbl癌基因活性的调控机制。方法本文通过酵母双杂交的方法 ,以proto-Dbl的VL domain为诱饵蛋白对人胎脑文库进行筛选。结果研究共获得7个能与VL domain相互作用的蛋白。结论 Proto-Dbl VL domain相互作用蛋白的发现将为揭示proto-Dbl的功能奠定基础。
- 唐秋琳赵晓斐陈向征刘明陈济毕锋
- 关键词：原癌基因酵母双杂交
