国家自然科学基金(30070408)
- 作品数：5 被引量：38H指数：3
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- 大肠杆菌感受态细胞差热—热重实验
- 大肠杆菌感受态的建立一般认为是由于细胞在低温Ca2+等因子诱导下,细胞膜通透性发生改变,膜通透性的改变使细胞可以摄取DNA,是一个被动的过程。研究显示大肠杆菌感受态建立涉及PHB的重新合成,而且我们发现大肠杆菌在简单的转...
- 欧剑虹谢志雄陈向东沈萍
- 关键词：大肠杆菌感受态细胞
- 文献传递
- 聚-β-羟基丁酸(PHB)在细菌建立感受态中的作用被引量：4
- 2002年
- 介绍了PHB作为细胞膜上的物质运输通道成分在细菌感受态中的结构、分布、分析方法以及其可能的作用 ,阐明了PHB的合成与细菌感受态建立的关系和PHB在感受态细胞摄取外源DNA时的作用方式 ,同时也对控制生物体合成PHB的相关基因和酶作了简要介绍 ,并探讨了研究PHB的实际意义。
- 李文化谢志雄陈向东沈萍
- 关键词：PHB运输通道感受态
- 水平基因转移被引量：23
- 2003年
- 简要介绍了水平基因转移(horizontalgenetransfer,HGT)的基本概念以及进行转移的主要方式:由质粒或病毒等介导的水平基因转移和基因的"直接"水平转移。并结合基因组序列分析,重点阐述远缘生物之间发生的广泛的基因交流,以及其与进化、系统发育和基因工程生物安全性问题的探讨。
- 欧剑虹谢志雄陈向东倪丽娜沈萍
- 关键词：水平基因转移进化系统发育
- Ce3+对大肠杆菌感受态建立和转化的影响
- 有关Ca诱导大肠杆菌建立感受态的机制目前还不十分清楚,一般认为可能与细胞膜的通透性增加有关。1996年Baur等发现在从自然环境中采集的含一定离子的天然水样中,大肠杆菌可以建立感受态。细胞膜上的β-聚羟基丁酸(PHB)复...
- 谢志雄欧剑虹赵儒铭沈萍
- 关键词：大肠杆菌感受态
- 文献传递
- Fura-2荧光探针研究Ca^(2+)对大肠杆菌细胞的跨膜作用被引量：9
- 2004年
- 以Fura 2 /AM作为荧光探针 ,研究了Ca2 + 对大肠杆菌HB10 1细胞的跨膜作用 .考察了不同浓度外源钙离子处理不同生长时期细胞的跨膜行为 ,并采用停流技术测定了荧光动力学 .结果表明大肠杆菌在用CaCl2 溶液处理后 ,胞外Ca2 + 可大量进入胞内 ,且进入细胞的钙离子量与胞外钙离子浓度相关 ;处于对数生长前期的细胞与对数生长后期和稳定期的细胞相比 ,胞内自身Ca2 + 浓度低 ,但其摄取外源Ca2 + 的能力最强 ,这应该与其生理代谢活性是相关的 ,而且这一时期是大肠杆菌细胞最易建立人工诱导感受态的时期 .该研究对于测定革兰氏阴性菌细胞内Ca2 + 浓度及胞外离子的跨膜传导行为 。
- 刘志洪李文化沈萍蔡汝秀
- 关键词：钙离子大肠杆菌荧光动力学基因工程
- 大肠杆菌HB101感受态细胞的显微观察与分析
- 1970年Mandel&.Higa发现大肠杆菌经CaCl2处理后可以摄取噬菌体DNA而被转染,在此基础上建立了化学转化方法,但其原理、机制还不十分明了。一般认为是由于细菌在低温、Ca2+等因子诱导下,细胞膜通透性发生改变...
- 谢志雄陈向东李文化庞代文沈萍
- 关键词：透射电子显微镜大肠杆菌感受态细胞
- 文献传递
- 大肠杆菌在低Ca^(2+)条件下对外源DNA的摄取被引量：3
- 2001年
- 含一定浓度 Ca2 +的 L B培养基 ,接种大肠杆菌 HB10 1,37℃振荡培养至 OD6 0 0 为 0 .5左右 ,培养前或培养后加入 p BR32 2质粒 ,4℃放置一段时间后经氨苄青霉素筛选和质粒检测发现 ,大肠杆菌不经过高 Ca2 + 下的冰浴处理和热激活等过程就能够直接摄取外源 DNA;通过对转化子质粒拷贝数和氨苄青霉素抗性测定发现 ,这种转化方式进入菌体内的质粒 DNA同样能够进行有效的复制和表达 ,与传统的人工转化结果无本质区别 ;在一定范围内 ,大肠杆菌的转化频率与环境中的 Ca2 + 浓度成正相关 ,并且这种准自然条件下的转化需要一定的时间 .
- 李文化谢志雄郭培懿陈向东沈萍
- 关键词：大肠杆菌基因工程微生物外源DNA钙离子浓度
- Ce^(3+)对大肠杆菌感受态建立和转化的影响被引量：3
- 2003年
- 利用Mg2+、Ce3+取代Ca2+诱导大肠杆菌感受态的建立,发现Mg2+、Ce3+不能独立诱导大肠杆菌建立感受态,只有在存在Ca2+的情况下才能诱导大肠杆菌建立感受态,Mg2+和Ce3+在低浓度时可以提高转化效率,但在高浓度时对转化有抑制作用,结果表明Ce3+与Ca2+一样,可能对大肠杆菌转化具有生理性调节作用。
- 谢志雄欧剑虹赵儒铭沈萍
- 关键词：大肠杆菌感受态生理调节
