国家自然科学基金(30170034) 作品数:4 被引量:5 H指数:2 相关作者: 夏玉先 赵华 刘迎春 李艳玲 彭国雄 更多>> 相关机构: 重庆大学 重庆师范大学 福建医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
可溶性人TRAIL蛋白诱导肝癌细胞的凋亡 被引量:2 2006年 为研究可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对肝癌细胞株SMMC7721的生长抑制效应及凋亡诱导作用.采用显微镜、台盼蓝排斥试验、MTT比色试验、TUNEL法和DNA断裂实验等方法检测细胞增殖和细胞凋亡.通过显微镜观察到核染色质凝集等凋亡的形态学变化,台盼蓝排斥试验、MTT比色试验结果显示,sTRAIL蛋白可显著抑制SMMC7721细胞的生长和增殖,并且TUNEL法检测到经sTRAIL处理后的细胞凋亡指数与对照比较有显著差异,DNA断裂实验亦观察到典型的DNA梯形条带,这些结果提示sTRAIL可诱导肝癌细胞株SMMC7721发生凋亡,具有抗肝癌的作用. 唐蓓关键词:TRAIL 肝细胞 凋亡 绿僵菌产海藻糖水解酶培养条件研究(英文) 被引量:2 2004年 丝状真菌绿僵菌能产生一系列二糖水解酶,其中包括海藻糖水解酶。这些酶在绿僵菌对昆虫的致病过程中起着重要的作用。本文研究了不同碳源、氮源对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae var. acridum菌株CQMa102产生与分解昆虫血淋巴中海藻糖等二糖相关的海藻糖水解酶活性的影响。结果表明:分别以葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、山梨醇和可溶性淀粉为碳源,金龟子绿僵菌均可产生海藻糖水解酶,但最佳碳源是可溶性淀粉,因为由其诱导产生的海藻糖水解酶具有最高的总活性和比活性以及更多的同工酶,山梨醇次之。硝态氮(NaNO3)作为唯一氮源时,几乎检测不出海藻糖水解酶活性,而铵态氮((NH4)2SO4)或NaNO3和有机氮(蛋白胨和酵母浸膏)混合氮源作氮源时,海藻糖水解酶活性都很高。在绿僵菌菌丝提取液和滤液的海藻糖水解酶活性比较中发现:CQMa102在多数碳源的培养基中产生的海藻糖水解酶主要分泌到培养基中,仅有少数结合在细胞壁上。 李艳玲 赵华 王中康 殷幼平 彭国雄 蔡绍皙 夏玉先关键词:金龟子绿僵菌 碳源 氮源 同工酶 丝状真菌 金龟子绿僵菌酸性海藻糖酶基因的序列特性分析 被引量:1 2008年 目的获得酸性海藻糖酶基因(ATM1)并对其序列进行分析。方法根据已知序列设计引物,PCR扩增出金龟子绿僵菌ATM1的cDNA和DNA序列,对其推导的氨基酸序列基于多序列局部比对和结构的序列比对进行分析。结果ATM1cDNA序列包含开放阅读框(ORF)3219bp,3’端非翻译区(3’UTR)175bp和5’端非翻译区(5’UTR)498bp。结论成功获得ATM1基因,通过序列分析确定出4组保守性功能序列。ATM1基因在CQMal02基因组中为单拷贝。 刘迎春 夏玉先关键词:真菌 海藻糖酶 金龟子绿僵菌酸性海藻糖酶基因的克隆及其序列特征分析 2008年 根据酸性海藻糖酶的蛋白质序列设计引物,PCR扩增出CQMa102 ATM1的cDNA和DNA序列,登录号分别为:DQ237957,EF190950.序列分析表明,ATM1 DNA序列含有3个内含子,其开放阅读框(ORF)编码1个含1 073个氨基酸的蛋白质,具有1个20个氨基酸的信号肽序列和含有30个可能的N-糖基化位点(Asn-Xaa-Ser/Thr).NCBI序列比对(Blastn)显示该蛋白与Aspergillus fumigatus的alpha、alpha-trehalose glucohydrolase,Aspergillus nidulans的酸性海藻糖酶前体和Talaromyces emrsonii的酸性海藻糖酶分别有62%、59%和57%的氨基酸相似性,与另外两个真菌Saccharomyces cerevisiae(Ath1p)和Candida albi-cans(Atc1p)的酸性海藻糖酶也具有约25%的氨基酸相似性.Southern杂交表明,ATM1基因在CQMa102基因组中为单拷贝. 刘迎春 赵华 夏玉先关键词:金龟子绿僵菌 蝗虫 昆虫病原真菌