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苏云金芽胞杆菌标记重组菌株的构建与杀虫基因水平转移被引量：11: 2005年; 利用SOE法将构建的绿色荧光蛋白基因gfp和苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白基因cry1Ac10的嵌合基因克隆到穿梭载体pAD4412上获得重组质粒pBMBZGC10,再通过电转化法导入苏云金芽胞杆菌无质粒突变株CryB中获得重组菌株CryB(pBMBZGC10).将重组菌株CryB(pBMBZGC10)的发酵液按30、60和90ml共3个浓度梯度,菌数约为107～108·ml-1,分次喷洒供试植株小白菜、蕹菜和番茄,结果表明,cry1Ac10基因没有向供试土壤细菌、真菌和放线菌转移,也未在供试植物根、茎和叶中检测到该基因.; 周琴孙明李林杨在清喻子牛; 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因

Bt毒素在三种矿物表面的吸附与解吸被引量：3: 2008年; 研究了Bt库斯塔克亚种(kurstaki)毒素(65kDa)在高岭土、针铁矿和氧化硅表面的吸附和解吸特性.结果表明:在磷酸盐缓冲体系(pH8)中,3种矿物的等温吸附曲线均符合Langmuir方程(R2>0.9661),它们对Bt毒素的吸附顺序为:针铁矿(高岭土(二氧化硅.矿物对Bt毒素的吸附1h就基本达到了吸附平衡.在pH6～8范围内,针铁矿、高岭土和二氧化硅对Bt毒素的吸附量随pH值的升高而降低.10℃～50℃范围内,针铁矿和氧化硅对Bt毒素吸附量随温度升高有所下降(8.39%和47.06%),高岭土对Bt毒素吸附则略有升高(5.91%).红外光谱分析显示,Bt毒素被矿物吸附后结构仅有微小变化.被矿物吸附的Bt毒素不易被去离子水解吸,水洗3次总解吸率为28.48%～42.04%.; 周学永高建保蔡鹏黄巧云; 关键词：苏云金芽胞杆菌毒素矿物解吸

Influence of Formate on Bioactivity Material-thuringiensin Synthesized by Bacillus thuringiensis YBT-032: 2008年; The biological method to synthesize thuringiensin and the influence of formate on thuringiensin biosynthesis were investigated. Addition of 1.00 g/L formate to growth medium of bacillus thuringiensis YBT-032 resulted in significant enhancements in productions of citrate, α-ketoglutarate, intracellular adenine and thuringiensin. These results demonstrate that added formate attends metabolism of cell, facilitates carbon metabolic flux in tricarboxylic acid cycle and hexose monophosphate pathway. As a carbon source, formate facilitates cell growth, increases glucose consumption and enhances the ability of cell to synthesis adenine analogues, and subsequently thuringiensin. Thuringiensin production rate significantly enhanced from 6.44 to 8.46 mg·g-1·h-1 and transformation ratio from glucose to thuringiensin increased by 43.30%.; 王志喻子牛; 关键词：杀菌活性苏云金芽孢杆菌生物活性材料

Btk蛋白在红壤胶体上的吸附解吸行为及其对杀虫活性的影响被引量：5: 2009年; 研究了苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种(Btk)两种分子量不同的杀虫蛋白(65 kDa和130 kDa)在红壤胶体上的吸附、解吸和杀虫活性。Btk杀虫蛋白容易被红壤胶体吸附,0.5 h即达到吸附平衡,65 kDa蛋白的吸附速率高于130 kDa蛋白。两种Btk杀虫蛋白在0.1 mol L^(-1)Tris缓冲液(pH 8)中的等温吸附曲线均符合Langmuir方程(R^2>0.992),65 kDa蛋白的吸附量高于130 kDa蛋白。在10～50℃范围内,温度升高吸附量略有降低。pH 6～8范围内,吸附量随pH升高而下降。两种Bt蛋白在红壤胶体吸附前后对棉铃虫均具有杀虫活性,而且吸附后杀虫活性提高了2～5倍。解吸实验表明,Btk杀虫蛋白与红壤胶体结合比较牢固,吸附态65 kDa蛋白和130 kDa蛋白经3次去离子水解吸,总解吸率分别为37.2%和22.9%,经3次pH8的Tris缓冲液解吸,总解吸率分别为20.7%和14.8%。红外光谱分析表明,两种分子量的Bt蛋白在吸附前后结构没有明显变化。透射电镜分析表明,吸附前后红壤胶体颗粒粒径未发生改变。吸附态Bt蛋白杀虫活性提高且不易被解吸,提示转Bt基因作物释放蛋白可能存在环境风险。; 周学永高建保蔡鹏黄巧云喻子牛; 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白红壤解吸

利用绿色荧光蛋白基因gfp研究芽胞杆菌的启动子活性被引量：8: 2004年; 利用绿色荧光蛋白基因gfpmut3,分别标记苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)的cry3A启动子Pcry3A、BtI_BtII启动子PBtI_BtII和来自蜡状芽胞杆菌特异启动子P4 4- 1 2 以研究其表达差异。其中 ,Pcry3A和PBtI_BtII分别与gfpmut3构成融合基因 ,以调控gfpmut3在苏云金芽胞杆菌中的表达。将重组质粒pGFP_30 4 (含P4 4- 1 2 )、pGFPExpA(含Pcry3A_gf pmut3融合基因 )和pGFPExpB(含PBtI_BtII_gfpmut3融合基因 )分别导入大肠杆菌 (Escherichiacoli)和苏云金芽胞杆菌后发现 ,P4 4- 1 2 和PBtI_BtII在大肠杆菌与苏云金芽胞杆菌中均可表达gfpmut3,其中PBtI_BtII在大肠杆菌中具有极强的启动基因表达的能力。而Pcry3A 不能启动gfpmut3在大肠杆菌中表达 ,在苏云金芽胞杆菌中启动的gfpmut3表达的荧光强度也较弱。进一步通过荧光显微镜和生物活性检测器对含重组质粒pGFP_30 4、pGFPExpA和pGFPExpB的转化子分别进行荧光检测及微量热检测。结果表明 ,3种启动子驱动下的gfpmut3基因均可在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB1 71中表达并检测得到不同的发光类型。微量热法检测发现P4 4_1 2; 周琴孙明喻子牛; 关键词：绿色荧光蛋白基因芽胞杆菌启动子微量热

绿色荧光蛋白基因gfp在苏云金芽胞杆菌中表达的初步研究被引量：5: 2003年; 将携带蜡状芽胞杆菌特异启动子的gfpmut3a基因克隆到穿梭载体pHT30 4后 ,电转化至苏云金芽胞杆菌BMB171,CryB、IPS78 11、4Q7、HD 80 2 1中。通过荧光显微镜和Bio assayReader对含重组质粒pGFP 30 4的 5个受体菌分别进行荧光检测及定量分析。结果表明 ,gfpmut3a基因仅在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171、CryB、IPS78 11、4Q7中表达并可检测得到菌体发光 ,并建立了一套适合于苏云金芽胞杆菌的GFP标记与检测方法。; 周琴孙明周俊初喻子牛; 关键词：绿色荧光蛋白基因 GFP 苏云金芽胞杆菌基因表达细菌杀虫剂生物农药

Adsorption and Insecticidal Activity of Toxin from Bacillus thuringiensis on Rectorite被引量：4: 2007年; 从书籍的右页仪式上的杆菌 thuringiensis 紧张 WG-001 的毒素的吸附和解吸附作用在不同毒素或书籍的右页仪式集中被学习， pH 和温度。吸附的毒素的杀虫活性被决定致死浓度杀死 Heliothis 有佩带徽章权利的人的 50% 幼虫评估一(LC50 ) 。在钠碳酸盐的书籍的右页仪式上的毒素的吸附缓冲(pH 9 ) 在 0.5 1.0 h 和毒素的吸附等温线以内的到达平衡跟随了兰米尔方程(R2 > 0.99 ) 。在从 9 ～ 11 的 pH 范围(碳酸盐缓冲区) ，吸附的毒素与增加 pH 减少了。吸附数量与增加 rectorite:toxin 比率减少了。吸附没被在 10 和 50 ° C 之间的温度显著地影响。X 光检查衍射分析由毒素显示了书籍的右页仪式的置闰的出现。红外线的吸收光谱证明毒素的绑定没改变它的结构。吸附的毒素的 LC50 价值是比免费毒素的那些小的。书籍的右页仪式保护了毒素免受紫外线照射损坏的伤害。水里的吸附的毒素的解吸附作用在一个碳酸盐缓冲区从 37.5% ～ 56.4% 并且从 27.4% ～ 41.8%。解吸附作用百分比也与增加 rectorite:toxin 比率减少了。; ZHOU Xue-YongHUANG Qiao-YunCAI PengYU Zi-Niu; 关键词：杀虫剂土壤污染

不同生态系统中细菌遗传物质的转移被引量：1: 2005年; 核苷酸序列分析和全基因组序列分析表明,细菌的进化通常是由于不同种属之间遗传物质水平转移而推进.基因转移的主要方式有转化、转导和接合.本文综述了有关自然界不同生态系统中细菌遗传物质转移的研究,这些研究可以促使更好地评估基因的水平转移.同时在农业生产或环境补救时人们会特意向环境中释放天然或重组细菌,了解环境中基因的水平转移对于安全评估这些细菌造成的后果也是必需的.; 林晓燕李林孙明喻子牛; 关键词：细菌基因水平转移生态系统

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国家自然科学基金(30170032)

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