国家高技术研究发展计划(2007AA06Z404)
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
- 相关作者：侯晓林吴国娟孙英健苗虹吴永宁更多>>
- 相关机构：北京农学院中国疾病预防控制中心中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：理学医药卫生更多>>
- 抗诺氟沙星噬菌体单链抗体库的构建与筛选
- 应用噬菌体展示和重组抗体技术制备抗诺氟沙星(NFLX)单链抗体库,筛选获得抗NFLX高特异性、高亲和力的单链抗体scFv。将NFLX与BSA化学偶联获得的免疫源,免疫Balb/C小鼠,提取脾细胞RNA,反转录获得cDNA...
- 郑志明金社胜肖希龙候晓林
- 关键词：诺氟沙星噬菌体展示技术单链抗体
- 文献传递
- 抗诺氟沙星噬菌体单链抗体库的构建与筛选被引量：11
- 2010年
- 应用噬菌体展示和重组抗体技术制备抗诺氟沙星(NFLX)单链抗体库,筛选获得抗NFLX高特异性、高亲和力的单链抗体scFv。将NFLX与BSA化学偶联获得的免疫源,免疫Balb/C小鼠,提取脾细胞RNA,反转录获得cDNA。以针对鼠源重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因的特异性引物,扩增获得VH基因和VL基因。通过SOE-PCR法将VH基因和VL基因通过柔性多肽Linker((Gly4Ser)3)拼接成VH-Linker-VL片段,酶切(sfiⅠ+NotⅠ)处理后,插入噬粒载体pCANTAB5E,并转化宿主菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07拯救,构建抗NFLX噬菌体单链抗体库。以包被抗原NFLX-OVA包被96孔板,亲和富集法,经三轮淘筛,间接Elisa初步检测重组scFv的特异性抗原结合活性。成功构建噬菌体单链抗体库,获得鼠源抗NFLX特异性的scFv,噬菌体中scFv插入率为90%,获得库容约为1.3×106的抗NFLX噬菌体单链抗体库,筛选得到5株抗NFLX的scFv。为运用噬菌体展示抗体技术制备特异性抗药物单抗及进一步建立药残检测新技术奠定了基础。
- 郑志明金社胜肖希龙候晓林
- 关键词：诺氟沙星噬菌体展示技术单链抗体
- 基质固相分散术-UPLC法检测禽蛋中对位红和苏丹红被引量：15
- 2010年
- 建立禽蛋中对位红和苏丹红Ⅰ～Ⅳ号5种色素的液相色谱检测方法。采用基质固相分散术,以氧化铝作基质分散基体,混合均匀的样品用正己烷-丙酮(99.5:0.5,V/V)直接洗脱,吹干后定容测定,外标法定量。5种色素的平均回收率为63.8%～96.2%,平均变异系数为0.52%～10.07%,检测限为0.01～0.02mg/kg。在检测的100个样品中,1例检出苏丹红Ⅳ号。
- 侯晓林孙英健吴国娟苗虹吴永宁
- 关键词：禽蛋对位红苏丹红高效液相色谱基质固相分散
