国家高技术研究发展计划(2007AA06Z414)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：马梅王子健饶凯锋刘芸李娜更多>>
- 相关机构：中国科学院生态环境研究中心中华人民共和国环境保护部环境保护部华南环境科学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- 酵母双杂交技术构建重组维甲酸X受体(RXR)基因酵母被引量：2
- 2008年
- 应用酵母双杂交技术构建重组维甲酸X受体(RXR)基因酵母,用以筛选具有类/抗维甲酸活性的化合物.构建含有RXR基因的酵母表达质粒pGBT9-RXRβ,称为诱饵质粒;构建含有RXR协同激活因子GRIP1基因的酵母表达质粒,形成靶质粒pGAD424-GRIP1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,构建RXRβ-GRIP1双杂交酵母.考察RXRβ-GRIP1酵母与典型的RXR配体化合物天然激素-9-顺维甲酸的结合情况.结果表明,9-顺维甲酸能够诱导RXRβ-GRIP1酵母酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,EC50值为1.5×10-7mol·L-1.构建的RXRβ-GRIP1酵母与报道的RXRβ-TIF2酵母相比,对9-顺维甲酸的EC50值接近,但诱导活性较高.进一步建立了检测环境污染物诱导/抑制RXRβ-GRIP1酵母β-半乳糖苷酶活性的实验方法,用于检测三丁基锡乙酸盐化合物、Aroclor1254以及水厂进水和出水样品.证明三丁基锡乙酸盐能够较强地诱导RXRβ-GRIP1酵母酶活性;而Aroclor1254能够显著抑制9-顺维甲酸诱导的RXR酶活性,是RXR拮抗剂;水厂进水样品能够抑制9-顺维甲酸诱导的酶活性,而现行工艺对RXR拮抗剂有很好的去除效果.证实了该重组基因酵母用于环境污染物类/抗维甲酸干扰效应的筛选可行性。
- 李剑饶凯锋马梅王子健
- 关键词：酵母双杂交维甲酸受体重组基因酵母
- 酚类化合物雌激素效应的比较研究被引量：10
- 2009年
- 采用重组人雌激素受体基因片段(hER)及共激活因子(GRIP1)双杂交酵母检测体系,检测9种酚类物质的类雌激素和抗雌激素效应.结果表明,所检测的化合物中有3种同时表现出雌激素诱导与抑制活性;2种只表现出雌激素诱导活性;1种只表现出雌激素抑制活性;3种均没有雌激素诱导与抑制活性.结构分析表明:酚类中产生雌激素活性的物质具有取代基位于对位且邻位没有大的取代基团的结构;烷基在对位的酚类物质也能显示出雌激素拮抗活性.所采用的双杂交酵母检测体系适用于外源物质的雌激素活性检测,具有较高的灵敏度;结合外源物的雌激素诱导与抑制活性,用于分析污染物的体内作用方式。
- 刘芸李娜马梅饶凯锋王子健
- 关键词：酚类物质
- 东江下游污染源和纳污水体的雌激素效应水平被引量：4
- 2011年
- 利用重组双杂交酵母快速检测技术分析了东江下游两个污水厂、8个工业废水排放口和6条受纳河流水体共16个样品中的雌激素效应物质浓度,并按照雌二醇当量(EEQ)计算了水中雌激素效应水平。在被检测废水样品中,排水的EEQ值处于0.3～2.8ng/L之间,其中造纸厂与纸制品厂排水具有明显雌激素效应。采自河涌的6个样品有4个样品检出雌激素活性,雌激素效应水平在1.9～8.8ng EEQ/L之间。结果表明,东江下游行业废水处理厂出水中的EEQ浓度应与河涌水体中的EEQ在相同数量级,与国内报道的其他地区河流及工厂排水污染水平类似。污染较为严重的河涌水体雌激素水平明显高于污水处理厂及工厂排水,推断污染河涌水体中的雌激素效应物质应来自未经处理的污染源。
- 刘芸彭晓武郭庶许振成
- 关键词：雌激素效应废水纳污水体
