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pcDNA3.1/CXCR7真核细胞表达载体的构建及其在内皮细胞中的表达鉴定: 2013年; 目的:CXCR7是基质衍生因子1(stroma derived factor-1,SDF-1)的新受体,且该受体在血管新生部位的内皮细胞中表达上调,故本研究拟构建CXCR7的真核表达载体pcDNA3.1/CXCR7,并检测其在人脐静脉内皮细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从人肝癌细胞HepG2的cDNA中扩增出约1100 bp的CXCR7基因片段。采用KpnI、XbaI将目的基因和载体pcDNA3.1进行双酶切,将酶切产物加入T4 DNA连接酶16℃连接过夜。将连接产物转化到感受态大肠杆菌中。挑取阳性克隆、提质粒,用双酶切、质粒DNA PCR扩增及DNA序列分析鉴定正确后,采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将其转染人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),通过western-blot检测目的基因在内皮细胞中的表达。结果:阳性克隆经双酶切法鉴定含有CXCR7基因片段,质粒DNAPCR扩增出与CXCR7同等大小的基因片段,基因测序结果与GenBank中序列相同。转染HUVEC后,细胞中CXCR7的表达水平显著上升。结论:成功构建了CXCR7的真核表达载体,可在内皮细胞中正常表达并。为进一步研究其作用机制奠定了基础。; 戴小珍王兰李红何浪张坤田志杰; 关键词：趋化因子受体7 真核表达载体内皮细胞

常见结直肠癌无线粒体DNA细胞株的建立被引量：1: 2015年; 目的:流行病学研究表明结直肠癌细胞线粒体DNA(mt DNA)拷贝数变异与患者预后具有显著相关性,但因缺乏相关体外细胞模型导致其细胞生物学效应及具体分子机制尚不明确。因此研究建立结直肠癌ρ0细胞株(无mt DNA)的方对该研究域具有重大意义。方法:在含有丙酮酸、尿苷及不同浓度溴化乙锭的培养基中培养大肠癌细胞株SW480、HCT 116、HCT-8,以不加溴化乙锭的细胞为对照,利用实时定量PCR技术监测不同处理组mt DNA拷贝数的变化,并观察结直肠癌ρ0细胞线粒体形态数目及细胞形态的变化。结果:SW480细胞用50 ng/m L EB处理25代后,再以100 ng/m L EB处理14代可成功构建SW480ρ0细胞株;HCT116细胞加用EB 100 ng/m L培养32代,继续用EB 200 ng/m L培养10代,再用EB 500 ng/m L培养3代,可成功获得HCT116ρ0细胞株;HCT-8细胞用200 ng/m L EB培养24代,可成功获得HCT-8ρ0细胞株。同时,ρ0细胞较亲本细胞变大变长,其线粒体的个数增多,线粒体形态变大变长。结论:利用EB处理法可成功构建大肠癌ρ0细胞株,但不同肠癌细胞方法不尽相同。mt DNA拷贝数的降低可显著影响大肠癌细胞的形态。; 吴晓邡闫秋戴小珍孟秋丽姜鹤群; 关键词：结直肠癌细胞线粒体DNA 溴化乙锭

CXCR7在肿瘤中的作用研究进展被引量：1: 2014年; 肿瘤的生长、转移受到多因素的调节，其中，趋化因子及其受体的相互作用在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。基质衍生因子1（stromal cell derived factor-1，SDF-1／CXCL12）是趋化因子家族中重要的成员之一，其在肿瘤生长、转移过程中的作用日益受到关注，但既往研究认为SDF-1是通过其唯一受体CXCR4发挥作用的。但近年来发现SDF-1还有另一受体CX-CR7，并且CXCR7与SDF-1的亲和性远高于CXCR4。 CXCR7的发现使得人们不得不重新审视SDF-1的作用机制。目前已有大量关于CXCR7在肿瘤的发生发展过程中的研究。研究发现， CXCR7在肿瘤组织中普遍表达，并且在促进肿瘤生长过程中发挥着重要的作用。但是在不同的肿瘤中，CXCR7表现出的作用及其作用机制不尽一致，表明 CXCR7的作用机制是十分复杂的。本文将综述近年来关于CXCR7在肿瘤生长及转移过程中的作用研究，为肿瘤治疗靶点的选择提供一个参考。; 吴晓邡戴小珍姜鹤群; 关键词：CXCR7 肿瘤增殖凋亡

跳远运动员血管紧张素转化酶基因插入/缺失多态性研究被引量：2: 2015年; 目的研究汉族跳远运动员血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态分布特点。方法采用PCR扩增、DNA测序、Hardy-Weinberg遗传平衡定律、SPSS统计学分析跳远运动员ACE基因I/D多态性特点,并与普通人群。结果ACE基因16号存在II、DD、ID 3种,Hardy-Weinberg检验结果显示该研究受试对象具有群体代表性。跳远运动员ACE基因DD型和D等位基因明显高于普通汉族人群(P<0.05)。结论 ACE基因DD型和D等位基因可作为跳远运动员遗传选材的分子标记。; 张坤江雪鲜贵平胡小川张俊英杨浩余大伟邓文骞戴小珍; 关键词：体育运动跳远运动员肽基二肽酶A

CXCR7在CXCL12生物学功能中的研究进展被引量：2: 2015年; 1 CXCR7的发现及其配体CXCL12CXCR7又名RDC1,是G蛋白偶联的七次跨膜蛋白受体（seven-transmembrane receptors,7-TMRs）,基因定位于人类染色体2q37,它最初是从狗的甲状腺cDNA序列中分离出来的[1]。通常认为,CXCR7有2个趋化因子配体CXCL12和CXCL11。; 邹杰戴小珍朱力; 关键词：CXCR7 CXCL12 生物学功能

大鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离培养及鉴定被引量：2: 2013年; 目的建立体外分离培养及鉴定大鼠骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的方法。方法采用密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离得到骨髓单个核细胞,并结合差时贴壁法,收集24h后未贴壁细胞,然后用添加有多种细胞因子的内皮细胞基础培养基(endothelial basal medium,EBM-2)诱导培养获取EPCs。通过形态学观察、CD133和VEGFR-2抗体免疫荧光染色并结合FITC-UEA-1和Dil-ac-LDL的摄取功能来对EPCs进行鉴定分析,同时通过体外管样结构形成能力对EPCs进行功能性评价。结果在EBM-2培养基中诱导培养7d后,出现类似于血岛样的细胞集落,集落中央的细胞呈圆形,周边的细胞呈放射状;80%以上的细胞都是CD133+/VEGFR-2+细胞,并且这些细胞同时能够摄取Dil-ac-LDL和结合FITC-UEA-1;EPCs在基质胶表面形成管腔样结构。结论密度梯度离心法结合差时贴壁法从骨髓中分离获得的单个核细胞,然后经EBM-2条件培养基诱导培养可获得较高纯度的EPCs。; 戴小珍王兰潘克俭何浪李红姜鹤群; 关键词：内皮祖细胞

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国家自然科学基金(81200917)