浙江省重大科技专项基金(2012C12912-9)
- 作品数：6 被引量：76H指数：6
- 相关作者：斯金平朱玉球高燕会章晓玲李东宾更多>>
- 相关机构：浙江农林大学浙江森宇实业有限公司丽水市农业科学研究院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 铁皮石斛WRKY5基因的克隆与表达分析被引量：15
- 2016年
- 目的克隆铁皮石斛Do WRKY5基因,并对生物信息学和表达模式进行分析。方法通过转录组测序和RT-PCR方法相结合首次从铁皮石斛中克隆到一个WRKY基因,利用生物信息学工具对其进行分析,并利用荧光定量PCR分析其在铁皮石斛中的组织表达模式及在低温胁迫、脱落酸(ABA)胁迫和蔗糖渗透胁迫下的表达模式。结果获得长1 336 bp的Do WRKY5基因转录因子c DNA全长序列,开放阅读框为834 bp,编码277个氨基酸残基,含有一个WRKY基因保守结构域和一个C2H2锌指结构域,属于WRKY基因家族的第II类成员。q RT-PCR分析表明,Do WRKY5基因在铁皮石斛根、茎、叶中均有表达,但在叶中的表达量最高。在不同低温和4℃不同时间诱导处理后,该基因表达量均显著升高,并且该基因在ABA胁迫和蔗糖渗透胁迫下均可被诱导表达。结论 Do WRKY5基因在铁皮石斛应答低温胁迫等多种非生物胁迫中可能起重要的调控作用,为进一步研究铁皮石斛的抗寒机制和抗寒性品种的选育提供基础。
- 蒋园朱玉球高燕会斯金平
- 关键词：铁皮石斛WRKY转录因子实时荧光定量PCR低温胁迫
- 铁皮石斛DoCDPK基因的克隆与表达分析被引量：11
- 2016年
- 利用RACE技术和RT-PCR相结合,从铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)中克隆得到长度分别为1 863和1 729 bp的钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase)基因DoCDPK1与DoCDPK2的cDNA全长序列,开放阅读框分别为1 539和1 536 bp,编码512和511个氨基酸,编码蛋白表现为亲水性,结构稳定,二级结构主要由α–螺旋和无规卷曲构成。qRT-PCR分析结果表明DoCDPK1和DoCDPK2主要在铁皮石斛叶片中表达;4℃低温和400 mmol·L^(-1) NaCl处理后,DoCDPK1和DoCDPK2在各个时间点上(2、4、8、12和24 h)的表达量有不同程度提高,而100 mmol·L^(-1) ABA处理后DoCDPK1和DoCDPK2的表达量呈现不同变化趋势,推测DoCDPK1和DoCDPK2参与低温等非生物胁迫的响应。
- 盛况高燕会斯金平朱玉球
- 关键词：铁皮石斛基因克隆逆境胁迫基因表达
- 铁皮石斛良种选育进展与对策被引量：22
- 2013年
- 品种是中药材规范化栽培的源头,"十五"以来,随着铁皮石斛产业的快速发展,良种需求的增加,铁皮石斛品种选育开展了大量的研究,并取得了显著成效。文章系统地阐述了铁皮石斛种质资源收集与差异性评价、良种选育理论与实践、种苗组织培养与低碳高效生产、DNA分子标记与辅助育种等进展,分析了当前良种选育中存在的主要问题,提出进一步开展良种选育的重点与关键。
- 斯金平何伯伟俞巧仙
- 关键词：铁皮石斛种质资源良种选育种内杂交
- 冷胁迫下铁皮石斛抗寒相关基因的SCoT差异表达分析被引量：23
- 2013年
- 为了探讨铁皮石斛在冷胁迫下相关基因表达差异的分子机制,选用抗寒性较强的铁皮石斛种质,分别构建了冷胁迫处理总RNA混合池,利用反转录cDNA进行SCoT PCR进行差异表达分析。通过64条引物筛选了约500个cDNA片段,获得差异片段11个,并进行割胶回收、克隆、测序和序列分析。结果表明,利用SCoT方法可以筛选出冷胁迫下铁皮石斛的抗寒相关基因,获得的基因片段分别与膜相关蛋白、渗透调节蛋白、CBF转录因子、抗逆性蛋白有很高的同源性,还有1个基因片段功能未知,可能与铁皮石斛的抗寒有关。
- 李东宾高燕会斯金平
- 关键词：铁皮石斛冷胁迫抗寒基因
- 铁皮石斛无性系繁育培养基专用性的研究被引量：6
- 2013年
- 以浙江雁荡山×云南广南种质的杂交组合茎段为外植体,筛选出1/2MS+IBA 1.0 mg.L-1+6-BA 1.0 mg.L-1腋芽诱导培养基与1/2MS+IBA 1.5 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1芽增殖培养基,在浙江、云南、广西、湖南等159个铁皮石斛野生与人工种质中应用,腋芽诱导率达94.3%,具有较好的通用性;芽增殖培养时,不同种质分化出单芽、丛芽、原球茎3种增殖途径,增殖效果存在显著差异。研究结果表明,不同种质铁皮石斛的增殖对培养基有专用性需求,开发铁皮石斛无性系繁育专用培养基具有紧迫性和重要的应用价值。
- 章晓玲张玲菊朱玉球王林华
- 关键词：铁皮石斛无性系
- 铁皮石斛F_1代苗期农艺性状研究被引量：13
- 2013年
- 目的:选育铁皮石斛优良交配组合。方法:选取4个种源26个优良亲本设计26个交配组合,测量统计各组合F1代农艺性状,用DPS等软件分析数据。结果:不同交配组合F1代家系间农艺性状存在显著差异,全同胞家系间变异显著高于半同胞家系,全同胞家系内变异显著低于半同胞家系;12个农艺性状简化为4个主成分,累计贡献率达84.13%,26个交配组合划分为6个类群,其中第Ⅴ与第Ⅵ类群综合性状表现较好。结论:在铁皮石斛杂交优势利用时,应重视杂交亲本的选择与控制,开展全同胞F1代选择与利用比半同胞能获得更高的遗传增益,家系内一致性更好;在参试的26个家系中,初步筛选出8个苗期农艺性状较好的全同胞家系(83×34,66×9,68×2,91×69,66×65,69×91,17×66,66×17)。
- 刘志高朱波斯金平章晓玲高亭亭朱玉球
- 关键词：铁皮石斛F1代
