国家自然科学基金(307770104)
- 作品数：14 被引量：39H指数：4
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- HPV L1 C-末端保守序列短肽体液免疫学特性被引量：4
- 2009年
- 目的探讨一段位于HPVL1C-末端、长30个氨基酸残基的保守序列的体液免疫学性质而进行此实验。方法以此序列为基础人工合成短肽,以该短肽免疫小鼠和兔,获得抗血清,通过ELISA,Western Blot及免疫组织化学的方法,分别对含HPV6b,16及18L1的细胞裂解物、重组蛋白或HPV阳性临床标本进行反应。结果抗短肽抗血清能与含HPV6b,16及18L1的细胞裂解物、重组蛋白发生针对HPVL1的反应,能使HPV6和16阳性的临床标本呈现阳性反应,而抗HPV16及抗重组HPV16L1抗血清对此短肽的反应则较弱。结论结果表明由该保守序列短肽诱导的抗血清具有一定的型间交叉反应特征,这一特性可能对研究检测用广谱HPVL1抗体有一定的意义。该序列短肽抗血清对不同型HPVL1反应的差异性及抗血清对多型别HPVL1的反应是否具有中和性,尚需进一步的研究。
- 姜波玲肖长义袁太宁叶红王雅琴黎家华黄利鸣
- 关键词：HPV保守序列免疫
- L1C-末端共同序列多肽抗体检测宫颈液基细胞学标本中人乳头瘤病毒被引量：1
- 2014年
- 目的确定由人乳头瘤病毒(HPV)主要外壳蛋白L1 C-末端保守序列多肽诱导的多肽抗体对宫颈脱落细胞内的HPV是否具有良好的检测能力。方法收集宫颈脱落细胞,一式两份,一份采用巢氏PCR检测HPV DNA,另一份以兔抗多肽纯化抗体和小鼠抗多肽抗血清为探针做夹心法ELISA检测标本中的HPV L1,比较两种方法对HPV的检出率差异。用多肽抗体对部分标本做免疫细胞化学检测。结果对收集到的269例宫颈脱落细胞标本用MY09/11引物扩增,检出HPV DNA阳性标本30例,检出率为11.15%;对MY09/11扩增后结果为阴性的标本再用引物GP5+/6+进行扩增。又检出阳性标本51例,检出率为21.34%。将两个PCR检测合计,共检测到81例HPV DNA阳性标本,HPV DNA总检出率为30.11%。对263例脱落细胞标本进行ELISA检测,共检出阳性标本91例,HPV阳性检出率为34.60%,与PCR检测结果相比差异无统计学意义。免疫细胞化学检测结果表明多肽抗体能够特异性地显示有HPV感染的宫颈脱落细胞。结论HPV L1多肽抗体对宫颈脱落细胞内HPV的感染具有良好的检出能力,该抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的HPV检测试剂盒方面具有一定的潜力。
- 孙伟肖长义李志英叶红王雅琴袁太宁李红军
- 关键词：宫颈脱落细胞
- 临床宫颈组织标本HPV16 L1蛋白检测被引量：3
- 2010年
- 目的检测HPV16阳性宫颈标本L1蛋白的表达,研究宫颈损伤程度与L1蛋白表达的规律。方法应用PCR法对宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CINⅠ～Ⅱ)、原位癌、早期浸润癌及中晚期癌标本进行型别检测,ELISA法及免疫组化法检测HPV16阳性标本中HPV L1蛋白表达。结果 54例宫颈组织中HPV16阳性为46例(85.2%)。随着宫颈损伤加重,HPV16阳性标本的抗原抗体反应逐渐减弱;免疫组化阳性反应仅出现于上皮组织内,反应强度及分布与宫颈损伤程度及癌变组织的分化状态有关。结论 HPV16 L1蛋白的表达同时受宫颈组织损伤程度及宿主细胞分化状态的影响。早期对HPV L1蛋白进行检测,可为宫颈癌的早期预防及临床诊治提供理论指导。
- 时艳梅肖长义叶红王雅琴吴江锋
- 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链式反应
- HPV E2蛋白及其在宫颈癌演变中的作用机制被引量：2
- 2009年
- 时艳梅陈建玲肖长义叶红
- 关键词：E2基因宫颈癌高危型人乳头瘤病毒DNA结合蛋白病毒基因组
- 宫颈癌变组织HPV DNA存在状态对病毒蛋白表达影响的研究被引量：3
- 2009年
- 官颈癌是全世界妇女中最常见的恶性肿瘤之一,是多因素协同作用而引发的疾病,其中人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌发病中起重要作用。由于不同宿主间HPV感染的清除能力差别很大,同时HPV基因组DNA在宿主基因组中的生物状态(游离、整合)亦有显著差异,故宫颈损伤程度差异很大,这势必会影响HPV生活周期中早、晚期蛋白的表达。现就影响宫颈癌变的病毒因素及癌变进程中HPV差异性表达的研究近况做一综述。
- 时艳梅叶红肖长义
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌蛋白表达
- HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质的探讨
- 2007年
- 目的探讨HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质。方法以合成HPV L1保守序列短肽、点突变该序列中酰胺化酶作用位点后的短肽以及15个氨基酸残基长的该序列交错合成的4个小肽免疫动物。采用T细胞增殖实验确定各肽是否含有T细胞表位;以ELISA方法确定各肽有无B细胞表位及有效免疫位点。结果不同肽免疫鼠T细胞增殖实验差异无统计学意义(P>0.05),两短肽免疫兔血清中IgG抗体滴度显著强于4个小肽,但兔和鼠分泌物中均未测出抗体IgG。两短肽的免疫血清对相应短肽的反应明显强于交叉反应的强度。原序列短肽的免疫血清对来自于该短肽的N-末端序列短肽的反应略强,而点突变酰胺化酶作用位点后短肽的免疫血清对C-末端序列的短肽反应略强。结论HPV L1保守序列短肽和点突变酰胺化酶作用位点后短肽在诱导体液免疫的能力方面相似,但在交叉免疫反应性及有效免疫位点方面存在差异;两短肽的免疫原性显著强于4个小肽。
- 王丽芳肖长义
- 关键词：表位短肽
- HPVL1在不同宫颈病变组织中的表达规律探讨被引量：1
- 2014年
- 目的探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表达情况。结果共收集到48例标本,其中42例HPV16阳性,3例HPV18阳性。HPV16阳性标本中,25例病毒基因组为游离型,7例为混合型,10例为整合型;HPV18阳性标本全部为整合型。ELISA及蛋白质印迹检测显示,随着病变程度的加重,HPV L1的表达量有逐渐降低的趋势。免疫组织化学显示,组织内的HPV L1阳性反应有多种形式,依病变组织内病毒基因组物理状态、病变组织分化程度以及病变进程的不同而不同。结论 HPV L1在宫颈病变组织内的表达有一定的结构基础,其表达量与病毒基因组在病变组织和细胞内的物理状态、肿瘤组织的分化程度、病毒基因组插入宿主基因组基因序列的状态有着非常密切的关系。
- 肖长义时艳梅李慧弘叶红李志英王雅琴李红军
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈肿瘤基因组
- 卵巢癌术后化疗引发低钠血症及精神症状1例被引量：2
- 2009年
- 时艳梅叶红黄若易凤仙陈建玲
- 关键词：卵巢癌化疗低钠血症精神症状
- HPV16阳性宫颈组织标本L1蛋白表达的初步检测被引量：5
- 2009年
- 目的：分析HPV16阳性宫颈标本衣壳蛋白L1的表达，找出L1蛋白表达的规律，为宫颈癌的早期预防和治疗提供理论指导。方法：PCR法筛选出宫颈炎、CINI～Ⅱ、原位癌、早期浸润癌及中晚期癌中HPV16阳性标本，采用Western Blot及免疫组化两种方法定性、定位检测检测HPV16L1蛋白的表达。结果：Western Blot实验中，宫颈炎组在56KD处出现明显的显色条带，随着损伤程度加重，条带逐渐变淡。中晚期癌标本除1例在56KD处呈现浅色条带外，其余无目的条带出现。免疫组化结果：阳性反应限定在上皮层之内，随损伤程度的加重，阳性反应强度减弱。至晚期宫颈癌，除1例呈淡染外，余均无阳性反应。反应强弱受分化状态影响。结论：HPV16阳性标本中，L1的表达随宫颈组织病变程度的加重而逐渐降低，但L1蛋白的表达水平亦受癌变组织分化状态的影响。早期检测HPVL1蛋白，将有助于早期预知宫颈病变程度及其恶性进展趋势，也为今后研制靶向于L1的检测试剂盒、指导HPVL1疫苗的使用提供重要理论依据。
- 时艳梅肖长义叶红吴江锋
- 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链式反应
- 评价疫苗保护性的病毒中和试验被引量：4
- 2008年
- 查锦芬肖长义
- 关键词：注射疫苗病毒细胞水平后血清中和抗体
