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国家自然科学基金(30672307)

作品数：17 被引量：48H指数：5
相关作者：褚汉启周良强崔永华王燕黄孝文更多>>
相关机构：华中科技大学武汉市儿童医院咸宁学院更多>>
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文献类型

  • 17篇中文期刊文章

领域

  • 17篇医药卫生

主题

  • 11篇小鼠
  • 6篇耳蜗
  • 5篇细胞
  • 3篇蛋白
  • 3篇血管
  • 3篇血管纹
  • 3篇小鼠耳蜗
  • 3篇C57BL/...
  • 2篇缘细胞
  • 2篇听觉
  • 2篇听觉丧失
  • 2篇听力
  • 2篇听力损失
  • 2篇听性
  • 2篇听性脑干
  • 2篇听性脑干反应
  • 2篇肿瘤
  • 2篇蜗内电位
  • 2篇毛细胞
  • 2篇脑干

机构

  • 15篇华中科技大学
  • 2篇武汉市儿童医...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇北京医院
  • 1篇咸宁学院

作者

  • 16篇褚汉启
  • 15篇崔永华
  • 15篇周良强
  • 11篇王燕
  • 10篇黄孝文
  • 9篇陈金
  • 9篇熊浩
  • 7篇李志勇
  • 7篇陈请国
  • 5篇刘云
  • 5篇李建玲
  • 5篇张平
  • 4篇黄红彦
  • 2篇冰丹
  • 2篇倪坤
  • 2篇王春芳
  • 1篇宋海涛
  • 1篇吴振恭
  • 1篇孔维佳
  • 1篇王少立

传媒

  • 5篇华中科技大学...
  • 4篇听力学及言语...
  • 4篇中华耳鼻咽喉...
  • 1篇中华老年医学...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇Journa...
  • 1篇临床耳鼻咽喉...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2012
  • 3篇2011
  • 6篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
  • 2篇2007
共 17 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
PDCD5和caspase 3在不同年龄段C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达被引量：3
2011年
目的检测程序化细胞死亡分子5（programmed cell death 5，PDCD5）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）在不同年龄段C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达，初步探讨其在年龄相关性听力下降发生、发展中的作用。方法选择3、6、9及12月龄段C57BL／6J小鼠各15只，即按月龄分为四组。检测各组小鼠双侧短声（click）及短纯音（6、8kHz）听性脑干反应（ABR）阈值。采用免疫组化和蛋白质印迹杂交（Western blotting）检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和Caspase3蛋白的表达，实时荧光定量PCR（real—time PCR）检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和caspase3基因mRNA的表达。结果随着年龄的增长，C57BL／6J小鼠各频率ABR阈值逐渐提高，耳蜗PDCD5和Caspase3蛋白的表达亦逐渐增强。3月龄和6月龄小鼠耳蜗毛细胞和血管纹细胞仅出现少量PDCD5和Caspase3蛋白表达，9月龄时表达有明显增加，至12月龄时表达最强，各月龄组间比较，差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。Real—time PCR检测显示PDCD5和caspase3基因mRNA随着年龄的增长表达逐渐增强，与其蛋白变化趋势相一致。结论C57BL／6J小鼠耳蜗PDCD5和caspase3随着年龄的增长表达增强，与耳蜗的老化密切相关，可能是老年性聋发病机制中的一个重要因素。
王燕褚汉启周良强陈金李志勇刘云张平黄孝文崔永华
关键词：肿瘤蛋白质类凋亡调节蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3耳蜗
新生大鼠螺旋神经节细胞体外生长特点及脂质体介导的转染效率被引量：3
2010年
目的探讨螺旋神经节细胞（spiral ganglion cells,SGCs）体外生长规律及特点,并观察阳离子脂质体转染SGCs的情况。方法从出生3~4 d的SD大鼠耳蜗中分离螺旋神经节组织,消化后放在含10%胎牛血清的DMEM/F12中培养,第2 d换用含2%B27及5μmol/L阿糖胞苷的Neurobasal培养基纯化SGCs,取第4 d活性良好的细胞爬片后,通过免疫荧光法用NF-200抗体鉴定SGCs;另外用质粒pEGFP-C2联合Lipofectamine 2000转染SGCs,观察其转染效率及对细胞活性的影响。结果体外培养的SGCs胞体饱满透亮,折光性好,一般能存活2周左右,第3~7 d活性最好。细胞对NF-200染色阳性;约10%的SGCs能被Lipofectamine 2000转染,但小部分细胞轴突缩短,甚至漂浮起来。结论含B27的Neurobasal培养基能培养出活性良好的SGCs;脂质体和质粒pEGFP-C2能成功地转染SGCs,但转染效率较低,并在一定程度上影响细胞的活性。
陈请国褚汉启王显红陈金李建玲周良强熊浩王燕李志勇崔永华
关键词：螺旋神经节细胞LIPOFECTAMINEB27
C57BL/6J小鼠听力及耳蜗毛细胞活性的年龄相关性研究被引量：9
2009年
目的建立年龄相关性听力损失（age-related hearing loss,AHL）的小鼠动物模型,探讨C57BL/6J小鼠发生AHL与毛细胞活性变化的关系,并初步对C57BL/6J小鼠AHL模型进行AHL的病理分类。方法按3、8、9、10、17、18月龄段分6组培育C57BL/6J小鼠,各组分别进行听性脑干反应（ABR）测试,对耳蜗毛细胞行琥珀酸脱氢酶染色并作基底膜硬铺片,观察各年龄段小鼠内外毛细胞线粒体琥珀酸脱氢酶的活性。结果C57BL/6J小鼠随年龄增大,ABR阈值明显增高,在3月龄到9月龄期间ABR平均反应阈值增大比较缓慢,差异无统计学意义;在10月龄时,出现明显的听力下降,平均阈值比3月龄时约高18-23 dB,差异有统计学意义（click：t=5.78,P〈0.01;6 kHz：t=3.93,P〈0.01;8 kHz：t=3.01,P〈0.05）。10月龄后小鼠听力继续下降,21月龄时平均阈值比3月龄时增高约60-68 dB,差异有显著统计学意义（click：t=31.23,P〈0.01;6 kHz：t=30.44,P〈0.01;8 kHz：t=33.83,P〈0.01）。琥珀酸脱氢酶染色显示,随年龄增大,毛细胞线粒体活性丧失逐渐加重：先是底回外毛细胞活性下降,接着发生活性消失,并逐渐向顶回发展,最后累及内毛细胞。结论C57BL/6J小鼠具有典型的年龄相关性听力损失特点,其听力下降的原因早期可能主要是外毛细胞及内毛细胞活性的丧失,晚期可能是由于基底膜结构混乱,导致电生理屏障消失,致耳蜗内电位（EP）不能维持而引起。C57BL/6J小鼠可作为感音型老年性听力损失动物模型。
周良强吴绍苓王燕褚汉启崔永华
关键词：年龄相关性听力损失听性脑干反应外毛细胞
C57BL／6J小鼠耳蜗钾离子转运蛋白KCNQ1和NKCC1的年龄相关性表达及其与听力的关系被引量：5
2011年
目的观察钾离子转运蛋白KCNQ1和Na-K-2C1联合转运子1（Na—K-2C1CO—transporter1，NKCC1）在C57BL／6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关．陛表达，探讨这两种转运蛋白在年龄相关性听力减退发病中的作用。方法通过听性脑干反应（ABR）检测C57BL／6J小鼠各年龄段（4、8、14、24、40周龄）的听力变化。应用免疫组化法确定KCNQ1和NKCC1在C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达定位，并检测各年龄段小鼠耳蜗中两种转运蛋白含量随着年龄增加的表达变化。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测KCNQ1和NKCC1的mRNA在不同鼠龄小鼠耳蜗中的表达水平。结果随着C57BL／6J小鼠年龄的增加，其ABR反应阈值逐渐升高，4周龄小鼠的短声（click）和4kHz、8kHz的ABR反应阈值与8周龄小鼠相比，差异均无统计学意义（P值均〉0．05）；14周龄后，三种刺激声的ABR反应阈逐渐升高，与低龄组小鼠相比其差异均具有统计学意义（P值均〈0．05）。KCNQ1蛋白主要表达于耳蜗血管纹的边缘细胞顶膜，而NKCC1蛋白主要表达于血管纹边缘细胞、螺旋韧带的Ⅱ型纤维细胞及螺旋缘下的纤维细胞。随着年龄的增加，血管纹KCNQ1和NKCC1蛋白的表达逐渐减少。KCNQ1和NKCC1mRNA的表达量也随着年龄的增加呈现减少的趋势。结论C57BL／6J小鼠随着年龄的增加其听力逐渐下降。KCNQ1和NKCC1两种钾离子转运蛋白随着小鼠年龄的增加逐渐减少；KCNQ1和NKCC1mRNA表达水平亦呈现随年龄增加而逐渐减少的趋势。耳蜗侧壁KCNQ1和NKCC1可能在年龄相关性听力减退的发生中起一定作用。
李建玲褚汉启周良强熊浩王燕陈请国陈金李志勇刘云崔永华
关键词：老年性聋小鼠近交C57BL
2种钾离子转运蛋白在血管纹性老年性聋发病中的作用(不同基因型小鼠的听觉生理研究)被引量：5
2010年
目的探讨Na-K-2Cl联合转运子1(Na-K-2Cl cotransporter1,NKCC1)和α2Na,K-ATP酶(α2Na,K-AT-Pase)在血管纹性老年性聋(strial presbycusis)发病过程中的作用。方法分别以不同基因型的NKCC1小鼠(杂合子和野生型)和α2Na,K-ATPase小鼠(杂合子和野生型)为实验对象,检测小鼠生长过程不同阶段的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)和耳蜗内电位(endocochlear potential,EP),以观察NKCC1和α2Na,K-ATPase基因缺陷与血管纹性老年性聋的关系。结果听性脑干反应检测结果显示,与NKCC1+/+野生型小鼠相比较,NKCC1+/-杂合子小鼠的ABR阈值在所有周龄组的各测试频率均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。NKCC1+/-杂合子小鼠的听力随鼠龄增长而下降,与低龄小鼠相比,老龄小鼠的ABR阈值显著升高(均P<0.05)。NKCC1+/-小鼠的EP也随年龄增长而呈下降趋势,老龄小鼠的EP值与低龄小鼠相比明显降低(P<0.05)。α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力及EP低于同周龄组野生型小鼠,其听力随鼠龄增长而下降,高龄小鼠的ABR阈值与其低龄时相比明显升高(P<0.05)。结论只携带1个NKCC1或α2Na,K-ATPase等位基因的小鼠(杂合子)可呈现伴EP下降的年龄相关性听力下降,耳蜗侧壁的NKCC1和α2Na,K-ATPase基因缺陷可能在血管纹性老年性聋的发病中起一定作用。
褚汉启周良强熊浩王燕陈请国陈金李志勇李建玲黄孝文黄红彦崔永华
关键词：耳蜗内电位小鼠NA,K-ATP酶老年性聋
自制小鼠显微手术拉钩
2010年
目的 介绍一种显微手术用磁力底座拉钩及其在小鼠显微微创手术中的应用.方法 磁力底座拉钩由纽扣磁铁、螺栓、螺母及牙用不锈钢丝弯折而成的拉钩组成.螺栓倒扣在磁铁上组成简易的磁力底座 不锈钢丝拉钩经两个螺母夹持固定在磁力底座的螺栓上,组成简易的磁力底座拉钩 纽扣磁铁具有较强的磁性,可使磁力底座拉钩吸附在不锈钢手术平台上.利用该拉钩辅助小鼠听泡暴露手术,并与传统常规拉钩进行比较.结果 磁力底座拉钩可方便并有效牵引手术切口及肌肉等软组织,牵引方向、高度及强度均可调节,可获得良好的术窗暴露效果 与常规拉钩相比,可明显缩短手术切口,对肌肉及血管损伤少,减少意外出血机会.结论 磁力底座拉钩可方便有效地暴露小鼠听泡显微手术窗口,具有微创特点,可作为一种简单有效且易于推广的小鼠显微手术器械.
周良强褚汉启崔永华黄孝文黄红彦熊浩王燕陈请国张平
关键词：外科器械显微外科手术小鼠动物实验
ABR和DPOAE检测研究NKCC1在不同基因型小鼠耳蜗听觉中的作用被引量：5
2008年
目的应用听性脑干反应(ABR)和畸变产物耳声发射(DPOAE)技术检测不同基因型NKCC1小鼠的听觉功能,研究NKCC1在耳蜗听觉功能中的作用。方法利用ABR和DPOAE实验检测不同基因型NKCC1小鼠的听觉功能。结果NKCC1+/+野生型小鼠听力正常,ABR检测的短声(click)阈值为(23.13±3.78)dBSPL;NKCC1+/-杂合子小鼠听力低于NKCC1+/+野生型小鼠,其短声阈值为(38.49±12.29)dBSPL。NKCC1+/+和NKCC1+/-小鼠ABR的阈值均值在各个频率的差异有极显著性意义(均P<0.01);NKCC1-/-突变纯合子鼠的ABR的各个频率在100dB均无反应,呈现全聋。与NKCC1+/+小鼠比较,NKCC1-/-小鼠没有DPOAE的检出。结论耳蜗NKCC1在小鼠的听觉生理中有重要作用,NKCC1缺失或是功能受限均可影响耳蜗的听觉功能。
褚汉启周良强王春芳黄孝文黄红彦崔永华孔维佳
关键词：NKCC1听性脑干反应畸变产物耳声发射
拉莫三嗪对豚鼠娱乐性噪声所致听力损失的保护作用被引量：1
2008年
目的探讨拉莫三嗪(lamotrigine,LTG)在豚鼠娱乐性噪声所致听力损失中保护作用的剂量依赖性。方法豚鼠随机分为正常对照组2只,噪声对照组(每天迪厅音乐暴露2h,连续14d)7只,LTG实验组(迪厅音乐暴露2h/d,每天暴露前腹腔注射LTG,连续14d)27只,实验组又分为A组[20mg/(kg.d),i.p.]、B组[30mg/(kg.d),i.p.]、C组[50mg/(kg.d),i.p.],每组各9只。采用听觉脑干诱发电位(auditory brainstem response,ABR)、畸变产物耳声发射(distort productot oacoustic emission,DPOAE)、耳蜗铺片、扫描电镜技术,观察不同剂量LTG对娱乐性噪声所致听阈损失及耳蜗损害的保护作用。结果娱乐性噪声暴露第14天,3个实验组动物较之噪声对照组,有较小听阈偏移幅度及较高DPOAE反应幅值水平,差异有显著性意义(均P<0.01)。其中B、C两组之间无显著性差异,但它们又明显强于实验A组(均P<0.01);3个实验组耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性减弱程度比噪声对照组为轻,但差异无显著性意义;扫描电镜示噪声对照组外毛细胞(outer hair cell,OHC)静纤毛异常,而各实验组均接近正常。结论拉莫三嗪能减轻噪声对耳蜗的损害,对听觉功能具有明显的保护作用。
冰丹黄红彦倪坤褚汉启
关键词：拉莫三嗪
Correlation of PDCD5 and Apoptosis in Hair Cells and Spiral Ganglion Neurons of Different Age of C57BL/6J Mice被引量：3
2012年
This study examined the expression pattern of programmed cell death 5 (PDCD5) in co-chlear hair cells and spiral ganglion neurons (SGNs) and its association with age-related hearing loss in mice.Sixty C57BL/6J (C57) mice at different ages were divided into four groups (3,6,9 or 12 months).PDCD5 expression was detected by using immunohistochemistry,real-time PCR and Western blot.Morphological change of the cochleae was also evaluated by using immunoassay.The results showed that the expression of PDCD5 had a gradual increase with ageing in both protein and RNA levels in C57 mice,as well as gradually increased apoptosis of cochlear hair cells and SGNs.In addition,we also found that caspase-3 activity was enhanced and its expression was enhanced with ageing.It is implied that overexpression of PDCD5 causes the increase in caspase-3 activity and the subsequent increase of apoptosis in cochlear hair cells and SGNs,and thereby plays a role in the pathogenesis of presbycusis.Thus,PDCD5 may be a new target site for the treatment and prevention of age-related hearing loss.
王燕褚汉启周良强高贺云熊浩陈请国陈金黄孝文崔永华
关键词：AGE-RELATEDHEARINGAPOPTOSISHAIRGANGLION
卡那霉素联合呋塞米快速诱导小鼠耳蜗损伤被引量：12
2010年
目的探讨卡那霉素和呋塞米联合应用对小鼠耳蜗的毒性作用，建立一种可靠的小鼠感音神经性聋模型。方法选用3～4周龄的CBA／J小鼠为实验对象，按1g／kg的剂量皮下注射卡那霉素，30～45min后按0．4g／kg的剂量腹腔注射呋塞米。在注射前、注射后12h、24h、48h、7d、2周、4周及12周分别应用听性脑干反应（ABR）检测小鼠听觉功能的改变；应用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽及碘化丙啶染色、半薄切片甲苯胺蓝染色、脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术、扫描电镜等观察小鼠毛细胞死亡的模式和程度；同时通过透射电镜观察记录耳蜗血管纹形态及厚度的变化。结果序贯应用卡那霉素及呋塞米后12h小鼠ABR阈值开始上升，随后的36h内持续进行性上升，继而稳定在90dB左右。应用激光共聚焦显微镜在药物注射后12h观察到耳蜗底回外毛细胞开始出现死亡，24h时底回外毛细胞基本全部消失，同时顶回外毛细胞开始出现死亡，至48h时整个耳蜗外毛细胞绝大部分死亡；而内毛细胞的损伤至给药后7d时才开始出现，随时间推移仍有部分内毛细胞完好无损。死亡的毛细胞均具有典型的凋亡细胞特征。扫描电镜观察发现在药物注射后受损毛细胞出现纤毛消失、表皮板塌陷，随后支持细胞增生并在该处形成瘢痕。血管纹表面边缘细胞在给药后出现部分胞体融合并且有坏死物自胞内排出，随后边缘细胞表面大部分微绒毛消失，胞体呈“石块”样改变。透射电镜结果显示血管纹厚度在给药后进行性下降，主要为边缘细胞萎缩造成。结论单次序贯应用卡那霉素及呋塞米能快速诱导小鼠耳蜗毛细胞大量死亡，适合应用于建立小鼠感音神经性聋模型。
熊浩褚汉启黄孝文崔永华周良强陈金李建玲王燕陈请国李志勇
关键词：卡那霉素呋塞米耳蜗小鼠
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