广州市卫生局医药卫生科技项目(201102A212025)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：陈晓燕许艳丽高宗银张伟金敏更多>>
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- 发文基金：广州市卫生局医药卫生科技项目更多>>
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- 一种新的角膜缘干细胞分选方法被引量：2
- 2012年
- 目的用平板离心法建立一种新的角膜缘干细胞分选方法。方法用人角膜缘组织块培养法培养出角膜上皮细胞,收获细胞后用转速1400r·min-1和1800r·min-1分别将细胞用平板离心法于未包被的六孔板上进行分选。ATC1为1400r·min-1贴壁的细胞,ATC2为1800r·min-1贴壁的细胞,NAC为1800r·min-1离心力作用下漂浮而不能贴壁的细胞。分选出的三群细胞采用免疫组织化学、克隆形成实验、Ki67流式细胞仪进行分析。结果细胞计数显示用转速1400r·min-1筛选出的ATC1占总体细胞量的(11.32±2.46)%。在离心速度为1800r·min-1时,筛选出ATC2为(18.55±2.79)%,而NAC则为(68.29±4.07)%。ATC1表达角膜缘干细胞标志ABCG2、p63,而不表达角膜上皮细胞分化标志K3。ATC2较少表达ABCG2和p63,大部分表达K3。NAC则不表达ABCG2、p63,而几乎完全表达K3。在这三群细胞中ATC1细胞群具有最强的细胞增殖活性,其克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(3.90±0.17)%和(56.78±2.39)%。ATC2克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(2.48±0.19)%和(9.67±1.88)%。NAC克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(0.84±0.89)%和(4.76±0.57)%。结论平板离心法是一种新的角膜缘干细胞的分选方法。ATC1、ATC2和NAC可能分别为角膜缘干细胞、短暂扩充细胞和终末分化细胞。
- 张伟杨为中金敏高宗银陈晓燕许艳丽张玉平
- 关键词：人角膜上皮细胞角膜缘干细胞
- 原子力显微镜在平板离心法筛选的人角膜缘上皮细胞研究中的应用
- 2012年
- 目的用原子力显微镜研究平板离心法筛选出的三群角膜缘上皮细胞,确定细胞的类型。方法用人角膜缘组织块培养法原代培养出角膜缘上皮细胞,收获细胞后将细胞置于未包被的六孔板上1400r.min-1和1800r.min-1进行离心分群。ATC1为1400r.min-1离心后贴壁的细胞,ATC2为1800r.min-1离心后贴壁的细胞,NAC为1800r.min-1离心后漂浮而不能贴壁的细胞。用BrdU标记延迟实验和原子力显微镜来分析这三群细胞。结果在三群细胞中ATC1几乎全被BrdU标记延迟,占分选前总体细胞的10.14%±1.21%。原子力显微镜显示ATC1、ATC2和NAC的细胞形态和细胞膜表面有显著的差异。整体细胞粗糙度在ATC1、ATC2和NAC中分别为(20.91±1.42)nm、(80.37±3.43)nm和(102.94±4.52)nm,核部位膜的粗糙度分别为(33.79±1.66)nm、(13.12±0.79)nm和(8.48±0.64)nm。结论原子力显微镜是一种非常好的区分和观察三群细胞的方法。BrdU标记延迟实验和原子力显微镜分析参数表明ATC1、ATC2和NAC可能分别为角膜缘干细胞、短暂扩充细胞和终末分化细胞。
- 张伟杨为中金敏高宗银陈晓燕许艳丽张玉平
- 关键词：原子力显微镜人角膜缘干细胞
