贵州省科技攻关计划(2000)
- 作品数：11 被引量：64H指数：5
- 相关作者：张学俊张文坤吴彤徐在品张登祥更多>>
- 相关机构：贵州大学中国科学院浙江大学更多>>
- 发文基金：贵州省科技攻关计划贵阳市科学技术计划项目教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 导致群养幼犬腹泻的病毒性传染病的临床诊治被引量：1
- 2006年
- 对贵州某特种动物养殖场群养幼犬进行调查,发现导致幼犬腹泻的病毒性传染病主要为犬瘟热、犬轮状病毒感染、犬细小病毒病、犬冠状病毒感染和犬传染性肝炎,并从临床角度总结上述五种传染病的诊断、鉴别诊断、预防和治疗方法。
- 徐在品杨粤勇郭爽骆飞代军王雪梅文忠琴
- 关键词：幼犬腹泻病毒性传染病
- 杜仲叶多糖的提取分离、抗补体活性及结构研究被引量：20
- 2011年
- 经石油醚脱脂、除胶后,采用热水提取、分步醇沉工艺获得杜仲叶水溶性多糖PsEUL1、PsEUL2、PsEUL3,分别经S-8大孔树脂脱色,Sevag法脱蛋白及透析,其中PsEUL1经DEAE-52纤维素柱层析分离得多糖组分PsEUL11、PsEUL12、PsEUL13,抗补体活性实验表明,其中有多个组分有不同程度的抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。活性多糖PsEUL13经硫酸-咔唑反应及气相色谱法测定,单糖组成为:L-鼠李糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡糖糖、D-半乳糖、糖醛酸,含量比为11.8∶1.6∶37.7∶4.2∶10.7∶12.8∶21.2。
- 张学俊伊廷金孙黔云张文坤闫银萍龚桂珍宫本红
- 关键词：杜仲叶多糖抗补体活性
- 犬瘟热病毒Guizhou株血凝素基因的克隆及序列分析被引量：12
- 2006年
- 参照已发表的文献合成1对引物，以犬瘟热病毒Guizhou分离株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，RT-PCR扩增获得血凝素蛋白基因（H）901～1661位大小为761bp的片段，并将PCR扩增产物进行克隆和测序。将Guizhou株与GenBank数据库中的31株CDV及国内NanjingOP株的H基因序列进行同源性和系统发生树分析，发现Guizhou株的H基因部分序列与疫苗毒株Convac和Onderstpoort的同源性最低，只有90％；与日本野毒株Tanu96、KDK-1、Hmanatsu、Yanaka、UENO的同源性较高，为96％～98％；且与国内从大熊猫和小熊猫分离的野毒株GP和LP的同源性也较高，为98％和96％。系统发生树分析显示，Guizhou株与国内野毒株GP和LP，及日本的5个野毒株应属同一类，其中和GP株基因型最近，推测这些毒株间有更近的共同祖先。因此怀疑该病毒较适应于野生动物，且在我国某些地区的野生动物中可能存在自然疫源性传播。
- 朱军莉余旭平张登祥沈琴芳徐在平李永明周碧君吴彤
- 关键词：犬瘟热病毒H基因同源性
- 犬瘟热诊断方法研究进展被引量：7
- 2004年
- 概述了犬瘟热的细胞生物学与分子生物学诊断方法。在细胞生物学方面,对犬瘟热的诊断主要依靠病毒分离培养、动物回归实验、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查、包涵体检查等。随着分子生物学的发展,对犬瘟热的诊断从细胞水平发展到分子水平,国内外相继建立起CDV核酸杂交和RT PCR诊断法,这些方法比传统诊断法具有更高的敏感性和特异性,尤其在犬瘟热的发病早期,机体尚未产生免疫应答时RT-PCR诊断法便能够作出早期诊断。
- 徐在品张登祥鲜思美陶玉顺吴彤
- 关键词：犬瘟热细胞生物学分子生物学核酸杂交RT-PCR免疫应答
- 角质酶的研究与应用进展被引量：7
- 2013年
- 角质酶(EC3.1.1.74)是一种可以降解角质的水解酶,可水解可溶性酯、不溶性甘油三酯和各种聚酯,同时还能催化酸与醇的酯化、脂肪酸盐与醇的转酯化反应。由于其目前在纺织工业、食品工业、农药化学工业等方面具有极为广泛的应用,引起国内外广泛研究。该文就目前角质酶在育种、诱导、表达和酶活性测定,以及应用推广等方面进行了较详尽的分析阐述。
- 张效宁冉琴琴张学俊
- 关键词：克隆
- 棉花枯萎病菌产角质酶的连续诱导被引量：2
- 2013年
- 角质酶(EC3.1.1.74)是水解酶,可以降解角质产生脂肪酸,属于α/β水解酶,也可以水解甘油三酯等化合物。角质酶的应用十分广泛,但菌株对角质酶的表达量非常有限,因此提高角质酶表达量的研究具有广泛的理论与实践意义。角质酶是一种诱导酶,角质的存在能激活产该酶病菌的角质酶基因,诱导其高效转录表达。本实验经过角质诱导及诱导强度的变化,真菌的角质酶基因转录量大大增加,而未经过角质诱导的真菌角质酶基因转录量非常少。本研究中诱导棉花枯萎病菌的产酶量最高可以达到29.46U/mL,比未诱导的提高至4倍。
- 冉琴琴张效宁张文坤张学俊
- 关键词：番茄角质
- 适于木本植物油脂的催化剂研究:纳米固体超强酸催化剂对游离脂肪酸的酯化
- 2012年
- 木本植物油脂与草本相比多为高酸价,用碱性催化剂进行酯交换时易发生皂化。两步法是先将游离脂肪酸酯化,再进行碱催化生产,可以提高资源的利用率,拓展原料的来源,降低成本。锡是少数几个可制备固体超强酸的金属。本文以掺锑二氧化锡纳米材料为基体,进行表面硫酸化。在330℃煅烧得到催化剂 /Sb-SnO2,酸性强(H0 ≥ –14.5),超过100%硫酸(–11.9)近1000倍,为固体超强酸。TEM照片显示为纳米催化剂。将其应用在高酸值米糠油的酯化反应中,在常压、常温(70℃)下进行游离脂肪酸的酯化催化反应,对游离酸的酯化率为95%以上,残余米糠油的酸值由58.94 mg/g降到3~4 mg/g,可用液体碱催化剂继续进行酯交换反应。从而证实该催化剂可用于高酸价木本油脂两步法生成生物柴油,提高资源的利用率。
- 张学俊张文坤李搏欧阳寒梅周蓉钟辉
- 关键词：固体超强酸催化剂
- 产角质酶酵母菌的发现与鉴定及产酶条件的优化被引量：2
- 2014年
- 为得到有效水解杜仲角质层的角质酶,通过生物酶法提取杜仲中的活性成分。从病变的杜仲叶中分离出一株能高产角质酶的菌种,鉴定分析证实该菌株是胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa),这是首次从植物病原真菌以外发现产角质酶的酵母菌,并对该菌株发酵产角质酶的条件进行优化。这一发现意义重大,因为酵母菌比植物病原菌安全许多,更利于大规模生产。
- 冉琴琴张效宁张文坤张学俊张萌萌
- 贵州犬瘟热病毒的分离鉴定被引量：1
- 2006年
- 对流行病学调查、临床症状检查和ELISA检测为犬瘟热阳性的自然发病犬,取肠内容物为病料,采用同步培养方法接种于犬肾细胞系(MDCK)进行病毒的分离,并对分离株进行了形态学特征、血凝特性、动物感染及RT-PCR鉴定。结果表明:病料接种MDCK细胞产生明显的细胞病变(CPE),电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的犬瘟热病毒粒子。分离株不凝集鸡及人“O”型红细胞,接种犬出现明显的临床症状和病理变化。用RT-PCR技术检测病毒细胞培养液,扩增出的片段长为760 bp,与预期设计的长度相同,由此确证分离株为犬瘟热病毒,命名为CDV-GZ2株。
- 鲜思美徐在品张登祥李永明吴彤周碧君陶玉顺
- 关键词：犬瘟热病毒
- 犬瘟热病毒的分离被引量：14
- 2005年
- 对流行病学调查、临床症状检查和血清学(ELISA)检测为阳性的自然发病犬,取肠内容物为病料,采用同步培养方法分别接种于非洲绿猴肾细胞系(Vero)、犬肾细胞系(MDCK)进行病毒的分离。用多聚酶链式反应(RT-PCR)检测感染细胞中的病毒核酸。结果表明,病料接种Vero细胞、MDCK细胞均产生明显的细胞病变(CPE);用RT-PCR技术检测病毒感染的细胞培养液,扩增出特异性的产物带,扩增出的片段大小分子长为760bp,与预期设计的长度相同。用Vero细胞同步培养从肠内容物中分离出的病毒命名为犬瘟热病毒GZ1株;用MDCK细胞同步培养从另一只犬的肠内容物中分离出的病毒命名为犬瘟热病毒GZ2株。
- 鲜思美徐在品张登祥吴彤周碧君陶玉顺
- 关键词：犬瘟热病毒多聚酶链式反应细胞病变
