国家教育部博士点基金(20090182110008)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：蒋汶洮黄宝锋吴风瑞王德寿杨世杰更多>>
- 相关机构：西南大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 尼罗罗非鱼微阵列Fosmid基因组文库的构建及基因筛选被引量：4
- 2011年
- 以pCC2FOS为载体构建尼罗罗非鱼Fosmid基因组文库,共挑选115 200个单菌落,保存在300块384孔样品板中,构建4 800个行池、7 200个列池、300个板池和25个超级池,形成微阵列,并对其进行复制备份。该文库插入片段平均长度约为40 kb,覆盖约罗非鱼基因组的3倍。连续传代实验研究表明,文库具有良好的稳定性。由于构建超级池-板池-行、列池三级池系统形成的微阵列,有助于快速、准确、有效地筛选目的基因,仅需77个PCR反应(超级池25+板池12+行池16+列池24)就能筛选到含有目的基因的一个单克隆,解决了普遍存在的文库筛选难题。通过文库尝试筛选18个与性别分化和生长相关基因,均获得2～5个阳性克隆,说明文库具有较好的实用性。
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- 关键词：尼罗罗非鱼基因组文库微阵列基因筛选
