国家自然科学基金(11101092)
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- 大鼠血管内皮细胞siRNA转染条件的优化
- 2015年
- 目的:旨在优化siRNA转染大鼠血管内皮细胞的转染条件.方法:将0.75μL和1.5μL的脂质体LipofectamineTM3000分别与20、40、60、80nmol带荧光标记的FAMsiRNA组合,转染6、12、18、24h后,用荧光显微镜计数阳性细胞率、MTT法检测各浓度条件下内皮细胞的存活率,筛选最优转染条件.结果:(1)转染12h后,用荧光显微镜检测20、40、60、80nmol各组,均可观察到绿色荧光(2)siRNA浓度为60nmol/L,脂质体为1.5μL的组合转染效率最高,继续增加siRNA的浓度,转染效率提高不明显.(3)转染时间超过24h,各组细胞荧光减弱,细胞死亡率显著增加.结论:结果表明,以1.5μL LipofectamineTM3000与60nmol/L的siRNA浓度组成转染混合物转染12h可以实现对大鼠血管内皮细胞高效转染并保持较高的细胞活性.
- 郭昭涵李银河庞振凌彭明星黄冉涛王燕华
- 关键词：血管内皮细胞脂质体SIRNA转染
- 力-血管代谢组学与心血管疾病
- 2013年
- 血液在以心脏为中心的脉管系统中流动,对血管产生了压力、切应力和张应力等力学作用。血液动力学因素已被证明是动脉粥样硬化等心血管疾病的重要危险因素之一。但是,血管如何感知这些力学因素的改变,并做出相应的适应性反应,其机制尚不清楚。伴随着细胞分子生物学的发展,生物力学研究从器官、组织水平深入到细胞、分子和基因水平,血管细胞力学生物学研究正在蓬勃发展。然而,生命活动是一个复杂的网络系统,需要从整体层次了解并阐明复杂的生物学现象与机制。机体的代谢活动处于生命活动调控的末端。因此,代谢组学研究作为基因组学和蛋白质组学的延伸,在疾病的病理机制和诊断研究等方面具有优势。目前,在血管力学生物学研究领域中,有关代谢组学的研究刚刚起步,而这些研究结果有可能为心血管疾病的预警、诊断和治疗带来有应用价值的新理论和新技术。作者提出了"力-血管代谢组学"的概念,并就代谢组学、力-血管代谢组学与相关心血管疾病的研究进展做一介绍。
- 王燕华武福华姜宗来
- 关键词：生物力学力学生物学血管内皮细胞心血管疾病
