中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2007JB0264)
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 相关作者:刘超马志永邱亚峰史子学彭丽娜更多>>
- 相关机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:上海市浦江人才计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析被引量:6
- 2010年
- 流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于NS1、NP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。
- 王晓杜陈培君沈阳邱亚峰邓绪芳史子学彭丽娜罗金燕刘超马志永
- 关键词:H3N2猪流感病毒多克隆抗体