河南省杰出青年科学基金(74100510007)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学医药卫生更多>>
- 利用Agilent 2100 Bioanalyzer检测食源性致病志贺氏菌被引量：3
- 2010年
- 探讨Agilent 2100 Bioanalyzer芯片分析系统在检测食源性致病志贺氏菌的应用。根据致病志贺氏菌的致病基因ipah设计特异性引物,优化PCR扩增条件,检测致病志贺氏菌引物的特异性,然后分别用常规琼脂糖电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度。实验表明:PCR反应最佳退火温度为62℃,最佳Mg2+浓度为1.6mmol/L,最佳引物浓度为80nmol/L。Bioanalyzer在准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,Bioanalyzer的准确度在95%以上,琼脂糖凝胶电泳仅为85%;Bioanalyzer的检测灵敏度也比琼脂糖凝胶电泳高。Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对食源性致病菌进行特异、准确、稳定、灵敏的检测,具有重要的推广价值。
- 景建洲赵培培王博飞
- 关键词：食源性致病菌志贺氏菌聚合酶链反应AGILENT
- 食源性致病菌O157:H7的生物检测研究被引量：1
- 2011年
- 根据致病性大肠杆菌O157:H7的致病基因rfbE设计特异性引物扩增出致病性O157:H7特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖电泳技术和Agilent 2100 Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的灵敏度、准确度和重复性。结果表明,Bioanalyzer的灵敏性较琼脂糖凝胶电泳法高;其能准确地确定片段的大小(误差率小于5%),可提供PCR目的片段的质量浓度和摩尔浓度。Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对食源性大肠杆菌O157:H7进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和鉴定,具有重要的推广价值。
- 冯健白艳红王云龙景建洲
- 关键词：大肠杆菌O157:H7聚合酶链反应琼脂糖凝胶电泳
- 利用Agilent 2100 Bioanalyzer检测食源致病性沙门氏菌被引量：3
- 2009年
- 探讨Agilent 2100 Bioanalyzer芯片分析系统在检测食源致病性沙门氏菌的应用。根据致病性沙门氏菌的致病基因invA设计特异性引物扩增出致病性沙门氏菌特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度。Bioanalyzer的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,Bioanalyzer的准确度在95%以上,琼脂糖凝胶电泳仅为85%;Bioanalyz-er的检测灵敏度也比琼脂糖凝胶电泳高。Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对食源性致病菌进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和鉴定,具有重要的推广价值。
- 景建洲赵培培王云龙陈小科
- 关键词：食源性致病菌沙门氏菌琼脂糖凝胶电泳
- 海产品中副溶血弧菌的分离和PCR检测被引量：1
- 2011年
- 为了建立一种快速、特异的PCR方法检测副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp),根据Genebank库中收录的Vp的tlh基因序列进行引物设计,应用PCR技术扩增tlh基因。利用TCBS和TSI2种选择性培养基从海产品总分离出68株疑似副溶血弧菌,经生化鉴定68株均为副溶血弧菌。用Chelex100法提取基因组DNA,进行tlh基因的PCR检测,tlh基因在不同副溶血弧菌中都广泛存在,而大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等其他食源性致病菌均为阴性。tlh基因具有种属特异性,因此可以用来检测副溶血弧菌。
- 王芬王云龙景建洲
- 关键词：副溶血弧菌PCR检测
- 应用DPO技术检测食源性致病菌的多重PCR的研究被引量：2
- 2012年
- DPO是经特殊设计的特异性引物,本研究根据单增李斯特菌的prfA gene、O157的rfb Egene和副溶血弧菌的tlgene和志贺氏菌的ipaH gene设计四对DPO引物,采用多重PCR的方法,建立了检测单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7、副溶血弧菌和志贺氏菌的快速检测体系。实验结果表明:该体系特异性强,操作简单,为食源性致病菌的检测提供了新型的有效手段。
- 卢富山王云龙景建洲
- 关键词：多重PCR食源性致病菌
- 基于DPO引物的多重PCR在检测单增李斯特菌中的应用被引量：1
- 2011年
- 根据单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的hly、prfA和iap基因设计了3对常规引物和DPO(Dual priming oligonucleotide)引物,采用多重PCR的方法,建立了单增李斯特菌的快速检测体系,并比较了常规引物和DPO引物的优劣,结果表明DPO引物的特异性强,能够快速准确地检测单增李斯特菌。
- 刘纯真王云龙景建洲
- 关键词：单增李斯特菌PRIMING多重PCR
