山东省自然科学基金(Y2007C143)
- 作品数：4 被引量：8H指数：3
- 相关作者：胡涛董孟华刘希伟于晓锋杜镇镇更多>>
- 相关机构：滨州医学院滨州医学院附属医院临淄区人民医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非编码区基因突变对Tn＋肿瘤细胞Cosmc mRNA的影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨Tn＋肿瘤细胞分子伴侣（Cosmc）非编码区基因突变的方式及其对Cosmc转录水平的影响。方法免疫磁珠分选肿瘤组织中Tn＋、Tn-细胞，提取基因组DNA（gDNA）和总RNA；RT-PCR检测T-synthase及CosmcmRNA转录水平的表达状况；PCR扩增Cosmc非编码区基因，基因测序寻找突变位点。结果Tn-细胞中未发现基因突变，但部分病人肿瘤组织Tn-细胞存在等位基因嵌合体。Tn＋肿瘤细胞均可见基因突变，但突变方式和位点并不完全一致。部分病人表现为杂合缺失，部分病人表现为点突变。Tn＋、Tn-细胞T—synthasemRNA转录水平无明显差异，Tn＋细胞CosmcmRNA转录水平明显降低。结论Tn＋肿瘤细胞Cosmc非编码区存在基因突变，可能影响Cosmc基因转录导致肿瘤细胞表达Tn抗原。
- 胡涛刘希伟董孟华
- 关键词：肿瘤基因突变杂合缺失
- 活化T细胞表面Tn抗原动态变化与Cosmc之间的关系研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨T细胞活化过程中表面Tn抗原的表达状况与Cosmc转录及蛋白表达水平之间的关系。方法30例健康志愿者,男15例,女15例,平均年龄(34±8.9)。抽取志愿者外周静脉血,肝素抗凝,采用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),免疫磁珠法分选纯化的CD3+T细胞,分别采用T细胞活化剂Cocktail、CD3/CD28Dynabeads刺激12、24、36、48、60、72h。流式细胞术检测两种活化剂刺激活化前后不同时间点CD3+T细胞中Tn+细胞的百分率及Tn抗原平均荧光强度,采用RT-PCR和Western blot检测两种活化剂刺激活化前后不同时间点T细胞中Cosmc转录及蛋白表达状况,采用荧光分析法检测T-synthase活性,应用SPASS13.0软件进行统计学分析,阐明活化T细胞表面Tn抗原动态变化与Cosmc之间的关系。结果 Cocktail、CD3/CD28Dynabeads均能促使活化T细胞表面表达Tn抗原,以及Tn抗原表达的平均荧光强度随活化时间的延长先升高后下降。CD3/CD28Dynabeads活化组Tn+细胞百分率的峰值出现在活化后48h,而Cocktail活化组峰值出现在活化后60h,差异具有统计学意义(P<0.05)。Cosmc转录及蛋白水平、T-synthase活性随活化时间延长先降低后升高,变化趋势与Tn抗原表达水平相反,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 T细胞活化过程中Tn抗原表达呈动态变化,表达水平与Cosmc转录及蛋白水平下降、T-synthase活性降低密切相关,为以Tn抗原为靶点治疗由T细胞活化引起的免疫性疾病提供了重要依据。
- 石传芹徐雪于晓锋刘栋于泽顺河恩玲杜镇镇胡涛
- 关键词：T淋巴细胞
- T—Synthase活性对胃癌Tn／STn及T／ST抗原表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨T—Synthase活性对胃癌组织中Tn、STn、T、ST抗原表达的影响。方法不连续密度梯度离心分离胃癌组织中的肿瘤细胞并进行培养，流式细胞仪检测胃癌组织中Tn＋与Tn-细胞的表达状况；免疫磁珠分选Tn＋、Tn-细胞，Westernblot检测Tn、STn、T、ST抗原的表达状况，RT—PCR检测T—SynthasemRNA的表达水平，液体闪烁计数仪检测T—Synthase活性。结果39．66％的病人胃癌细胞均为Tn＋细胞，29．31％Tn＋、Tn-I细胞同时存在，31．03％均为Tn-细胞；Tn＋细胞同时表达Tn／STn抗原，不表达T／sT抗原，Tn＋I及Tn-细胞均表达sT抗原，部分Tn。I细胞可见T抗原表达；Tn＋、Tn- I及Tn-细胞间T—SynthasemRNA无明显差别，T．Synthase活性在Tn’细胞明显下降。结论不同TNM期胃癌组织中Tn、STn、T、ST抗原表达存在差异，T．Synthase活性降低可能导致胃癌细胞表达Tn抗原。
- 胡涛刘希伟付强董孟华张海霞张骞
- 关键词：胃癌T抗原
- 人结肠癌细胞 HT-29表达 Tn 抗原的机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨结肠癌细胞株HT-29中Tn（＋）细胞表达Tn抗原的机制。方法免疫磁珠分选结肠癌细胞株HT-29中HT-29-Tn（＋）细胞与HT-29-Tn（－）细胞；RT-PCR、PCR 扩增Cosmc基因，测序比对是否存在基因突变。野生型Cosmc转染正常及肿瘤细胞；Western blot检测转染后Cosmc蛋白表达状况；荧光分析法检测转染前后T-synthase活性。结果分选后的HT-29-Tn（＋）细胞缺乏T-synthase活性，Cosmc基因编码区缺失，转染WtCosmc可恢复Tn抗原阳性细胞的T-synthase活性，抑制Tn抗原表达。结论 Cosmc基因编码区缺失引起T-synthase活性丧失导致人结肠癌HT-29-Tn（＋）细胞表达Tn抗原。
- 于晓锋杜镇镇孙旭红石传芹张怀祥胡涛
- 关键词：HT-29细胞基因突变
