兵团博士基金(2009JCl5)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王远志陈伟袁俐米利古李永祥更多>>
- 相关机构：石河子大学中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：兵团博士基金高层次人才科研启动基金国家自然科学基金更多>>
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- 布鲁杆菌M5-90△bp26基因缺失株的构建与免疫原性的比较研究
- 2013年
- 目的构建布鲁杆菌M5-90△bp26基因缺失株，对比观察其免疫原性与M5—90亲本株的区别，研制毒力弱、安全性能好并能进行鉴别诊断的布鲁杆菌弱毒候选苗。方法利用常规分子生物学技术构建布鲁杆菌M5-90△bp26基因缺失株并进行遗传稳定性检测和常规细菌学性质鉴定；用1．0×10^9CFU／2Inl剂量的M5—90亲本株和M5-90△bp26基因缺失株分别免疫绵羊，所得血清与纯化的BP26蛋白进行Westernblot免疫印迹实验，比较M5—90Abp26基因缺失株与M5—90亲本株在体液免疫中对BP26蛋白识别上的差异；用试管凝集试验（SAT）检测受试绵羊不同时期（0、7、14、21、30、45d）的血清效价；安全性试验用1．0×10^6、6．0×10^6、2．0×10^7CFU／O．2ml的M5-90亲本株和M5-90△bp26基因缺失株分别免疫接种小鼠，观察、记录小鼠接种疫苗后的临床症状和死亡情况，比较二者的毒力。结果遗传稳定性检测M5—90亲本株PCR扩增出长度约1279bp的片段，而2—15代的M5-90△bp26基因缺失株扩增出长度约629bp的片段，后者测序结果表明出现bp26基因650bp的缺失；常规细菌学性质鉴定结果，M5-90△bp26由M5—90亲本株的单因子血清试验M型转变为R型，BK2噬菌体裂解实验由阳性转变为阴性，鉴定为深度变异菌株；Westernblot免疫印迹实验表明M5—90△bp26基因缺失株免疫绵羊所获得的血清与纯化的BP26蛋白不发生反应，而M5—90亲本株可发生反应；STA试验表明M5-90△bp26基因缺失株诱导绵羊产生抗体水平（1：50）明显低于M5—90亲本株（〉1：800）；安全性试验表明M5-90△bp26基因缺失株毒力比M5—90亲本株明显减弱。结论成功构建M5-90△bp26基因缺失株。与M5-90亲本株比较，M5-90△bp26基因缺失株具有毒力弱、能区分自然感染与疫苗免疫的特点，可作为标记疫苗的候选株。
- 王慧唐利燕范伟兴王远志陈创夫
- 关键词：布鲁杆菌免疫原性安全性
- 新疆南疆地区维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌临床分离株的基因分型研究被引量：1
- 2010年
- 目的 应用多位点数目可变串联重复序列（VNTR）分析技术,对新疆南疆地区维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型,探讨其数目VNTR基因型种类及其分布.方法 收集结核分枝杆菌,采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术,结合BioNumerics 5.0软件,对其24个VNTR位点进行结果分析.结果 分离出151株结核分枝杆菌,分为8个基因群151个基因型,其中Ⅵ群为主要基因群,占44.4%,有67个基因型,其次是Ⅷ群（23.2%）和Ⅳ群（20.5%）.结论 新疆南疆地区维吾尔族结核病患者的结核分枝杆菌存在明显基因多态性,且存在主要流行菌群.
- 米利古王远志李永祥艾尔肯江·孜帕尔曹红艳吴长东陈伟袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌维吾尔族基因分型
