湖南省科技计划项目(2009JT3054)
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
- 相关作者：胡瑞成戴爱国甘桂香郑成功彭艳更多>>
- 相关机构：南华大学湖南省人民医院湖南中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Derlin-1的研究进展被引量：3
- 2013年
- Dedin-1也称为内质网相关降解蛋白1。编码Derlin-1蛋白及其DNA分子序列结构在各种生物种间高度保守，从传统模式生物（线虫，酵母）到哺乳动物（小鼠，大鼠，狗）及人类，都存在与Derlin-1同源的一些基因。在人类中，Derlin-1有2个同系物，Derlin-2和Dedin．3。Derlin-1分子主要分布于细胞内质网中，由4个跨膜区域组成，它的氨基端与羧基端均存在于胞液中，而且与多种蛋白分子发生相互作用。
- 彭艳胡瑞成戴爱国
- 关键词：未折叠蛋白反应
- Sirt1在呼吸系统疾病中的研究进展被引量：6
- 2017年
- 沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2 homolog 1,Sirt1)在生物体中广泛表达,属于第III类组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)。它可通过氧化应激、炎症、内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)等机制影响细胞的凋亡和衰老,广泛参与多种疾病的发生与发展。
- 郑成功胡瑞成戴爱国
- 关键词：氧化应激炎症内质网应激支气管哮喘
- 泛素连接酶Hrd1与呼吸系统疾病被引量：1
- 2016年
- 肺部的细胞在受到缺氧、烟雾等外界刺激时会发生内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）,而ERS参与多种肺部疾病的发生发展-[1]。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（Hmg-Co A reductase degradation 1,Hrd1）为一个六次跨膜的内质网膜蛋白,其生物学功能是作为E3泛素连接酶参与内质网相关性降解（ER-associated degradation,ERAD）。
- 陈文琼胡瑞成戴爱国
- 关键词：泛素连接酶呼吸系统疾病酶降解CFTRREDUCTASE
- 吸烟慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织内质网相关凋亡基因Caspase-12的表达被引量：14
- 2011年
- 目的观察吸烟COPD模型大鼠肺组织内质网相关凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)的基因和蛋白表达。方法 40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组及戒烟1个月组。采用单纯被动吸烟法复制大鼠COPD模型。检测各组大鼠第0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV0.3/FVC)和呼气峰流速(PEF)。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺内Caspase-12 mRNA表达,免疫组化、Western blot检测其蛋白表达,荧光酶标法检测其活性。结果大鼠吸烟2个月后,肺功能较对照组明显下降(P<0.05),肺结构出现破坏;吸烟4个月后,FEV0.3/FVC显著下降(P<0.05),肺结构破坏明显;戒烟1个月组肺功能较吸烟4个月组稍好转,肺结构破坏仍明显(P>0.05)。与对照组比较,Caspase-12表达及活性在吸烟2个月大鼠模型中升高(P<0.05),在吸烟4个月大鼠中明显升高(P<0.05),在戒烟1个月组较吸烟4个月组稍下降但无显著差异(P>0.05)。结论吸烟能够诱导肺内内质网相关凋亡基因Caspase-12表达增加,促进COPD的发生与发展。
- 甘桂香胡瑞成戴爱国谭双香
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病内质网应激凋亡
- 吸烟COPD患者中内质网相关凋亡基因CHOP表达研究被引量：3
- 2020年
- 目的:观察吸烟慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中内质网相关凋亡基因肺内CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因和蛋白表达。方法:通过肺癌肺叶切除手术收集不吸烟非COPD、吸烟非COPD、吸烟COPD患者肺组织标本各10例;细胞凋亡情况选用TUNEL法检测,CHOP mRNA表达水平选用原位杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测,CHOP蛋白的表达水平选用免疫组织化学和Western-blot方法检测。结果:TUNEL结果显示凋亡细胞主要是肺泡上皮细胞,血管内皮细胞和支气管上皮细胞。对照组人群肺组织的凋亡率最低(13.5±2.4)%,在吸烟非COPD组人群较对照组明显升高[(25.5±1.7)%比(13.5±2.4)%,P<0.05],在吸烟COPD组人群中则进一步明显升高[(32.0±2.9)%比(25.5±1.7)%,P<0.05],CHOP的表达在吸烟非COPD患者中明显增加,在吸烟COPD患者中则进一步增加。结论:吸烟能够诱导COPD患者肺内内质网相关凋亡基因CHOP表达增加,从而促进COPD的发生、发展。
- 甘桂香胡瑞成戴爱国谭双香
- 关键词：内质网应激
- 内质网膜蛋白Derlin家族与肺疾病被引量：1
- 2014年
- Derlin是内质网膜上的四次跨膜蛋白,近年来已经发现其三个成员,即Derlin-1,Derlin-2和Derlin-3。Derlin在内质网相关性降解信号通路中与其它蛋白相互作用,参与错误折叠蛋白的降解过程,其表达异常在许多疾病的发生、发展中起重要作用,其中在肺疾病发病过程中的作用正日益受到重视。
- 孙银辉胡瑞成戴爱国
- 关键词：内质网应激肺部疾病
- 吸烟COPD模型大鼠肺组织内质网相关凋亡蛋白CHOP的表达被引量：12
- 2018年
- 目的:研究吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的情况。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组及戒烟组。采用单纯被动吸烟法复制大鼠COPD模型,测各组大鼠0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比(FEV0.3/FVC)和最高峰值流速(PEF);采用TUNEL法检测肺结构细胞凋亡情况;采用原位杂交和RT-PCR检测肺组织CHOP的mRNA表达水平;免疫组化和Western blot检测其蛋白质水平;同时采用Western blot检测蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、真核生物起始因子(e IF)2α和p-e IF2α的蛋白水平。结果:大鼠吸烟2个月后,肺功能较对照组明显下降(P<0.05),肺结构细胞凋亡明显增加,凋亡细胞主要是肺泡上皮细胞、血管内皮细胞和支气管上皮细胞,肺结构出现破坏;吸烟4个月后,FEV0.3/FVC显著下降(P<0.05),肺结构凋亡细胞进一步增加,肺结构破坏明显;戒烟组肺功能较4个月组稍好转,肺结构破坏仍明显。与对照组相比,p-PERK、p-e IF2α和CHOP表达在吸烟2个月大鼠中升高(P<0.05),在吸烟4个月大鼠中进一步升高(P<0.05);戒烟组大鼠CHOP较吸烟4个月大鼠稍下降但差异无统计学意义;PERK和e IF2α在各组大鼠中表达的差异无统计学显著性。肺结构细胞凋亡与CHOP表达呈正相关;结论:吸烟可通过PERK/e IF2α/CHOP信号通路促进CHOP表达,从而促进COPD的发生与发展。
- 甘桂香胡瑞成谭双香
- 烟草烟雾诱导的慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织中Derlin-1表达被引量：4
- 2013年
- 吸烟是导致慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）的主要危险因素。烟草烟雾中的氧化性物质可导致肺结构细胞发生内质网应激，过度的内质网应激可引起肺结构细胞凋亡，从而促进慢阻肺的发生与发展。Derlin-1是位于内质网的跨膜蛋白，与内质网相关性降解有密切关系。本研究采用免疫组织化学法、Western blot法和聚合酶链反应检测烟草烟雾暴露大鼠模型的Derlin-1表达，为慢阻肺发病机制研究提供实验资料。
- 彭艳胡瑞成戴爱国甘桂香
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病烟草烟雾大鼠模型肺组织聚合酶链反应检测免疫组织化学法BLOT法
- 香烟烟雾提取物对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的影响
- 2015年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1蛋白及其mRNA表达的影响。方法体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549),加入10%浓度的CES作用于细胞0、3、6、12、24、48 h,采用免疫蛋白印迹(WB)检测Derlin-1蛋白表达水平的变化,并运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Derlin-1 mRNA含量的变化。结果 10%浓度的CSE作用下,Derlin-1蛋白的表达逐渐提高,并在6 h达最高,随后逐渐下降,Derlin-1 mRNA含量变化与Derlin-1蛋白表达一致。结论香烟烟雾可影响Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的变化,可能与Derlin-1是内质网应激诱导凋亡的抑制剂有关。
- 彭艳胡瑞成
- 关键词：香烟烟雾提取物内质网应激
- 大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞传代培养可行性研究
- 2012年
- 目的通过对离体培养的原代细胞和第3代Ⅱ型肺泡上皮细胞（alveolartypeⅡepithelialcells，AECⅡ）进行分化表型鉴定，探索AECⅡ离体传代培养的可行性。方法联合应用肺循环灌注、支气管肺泡灌洗、双酶联合螯合剂灌注消化、物理过滤、差速离心、贴壁纯化、免疫吸附等方法分离和纯化大鼠AECⅡ。纯化的AECⅡ接种于基质胶包被的培养皿，在含10μg／L角质细胞生长因子、5％胎牛血清的DMEM／F12培养基中进行离体培养。收集原代和第3培养细胞，透射电镜观察细胞超微结构，免疫细胞化学染色检测肺泡表面活性蛋白A（surfactantproteinA，SP-A）表达情况，并进行碱性磷酸酶染色鉴定细胞分化表型。结果AECⅡ产量为（21．3±5．8）×10^5／鼠，活细胞比例为（96．5±0．8）％。细胞培养至第3代，其形态、生长特征与原代培养细胞无明显差异。透射电镜观察证实原代细胞及第3代细胞均具备AECⅡ的特征性结构，SPA免疫细胞化学染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例均超过95％，碱性磷酸酶染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例分别为（85．2±3．7）％和（90．4±4．2）％。结论在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于离体实验。
- 姜迪譞胡瑞成戴爱国谭双香
- 关键词：原代培养传代培养表型分化
