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公益性行业科研专项(201103008)
作品数:
1
被引量:2
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2015
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隐孢子虫重组蛋白包被抗原的筛选及ELISA方法的建立及初步应用
被引量:2
2015年
为建立检测牛隐孢子虫抗体的间接ELISA方法,本研究将重组表达的隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白及COWP-HSP70串联蛋白分别作为包被抗原,进行反应条件的优化,建立了3种间接ELISA检测方法。建立的这3种方法均具有较高的特异性和敏感性。与伊氏锥虫,球虫和弓形虫阳性血清均无交叉反应,最低检出血清稀释倍数分别为1∶1 600、1∶3 200和1∶3 200。经过筛选,确定COWP-HSP70串联蛋白为包被抗原的间接ELISA方法为最佳检测方法。以该方法进行的重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数分别为3.9%~8.2%和4.7%~8.3%。采用建立的ELISA方法与传统的粪检法分别对174份临床样品进行检测,隐孢子虫感染的检出率分别为9.2%和12.07%,两者符合率为97.13%。本研究建立的以COWPHSP70串联蛋白为包被抗原的牛隐孢子虫间接ELISA检测方法适用于临床牛隐孢子虫感染的检测。
李军
唐林生
唐林生
彭昊
潘艳
陶立
许力干
潘艳
杨威
陈泽祥
关键词:
隐孢子虫
热休克蛋白70
酶联免疫吸附试验
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