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黑龙江省杰出青年科学基金(JC04-05)

作品数：5 被引量：15H指数：3
相关作者：张凤民李小光钱钧宋武琦翟爱霞更多>>
相关机构：哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心更多>>
发文基金：黑龙江省杰出青年科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 2篇博尔纳病病毒
  • 1篇蛋白
  • 1篇遗传学
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇质粒
  • 1篇神经干
  • 1篇神经干细胞
  • 1篇神经元
  • 1篇神经元特异性
  • 1篇神经元特异性...
  • 1篇神经元特异性...
  • 1篇实时PCR
  • 1篇实时定量RT...
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇特异性烯醇化...
  • 1篇体外
  • 1篇体外转染
  • 1篇逆转

机构

  • 5篇哈尔滨医科大...
  • 1篇中国疾病预防...

作者

  • 5篇张凤民
  • 3篇李小光
  • 2篇翟爱霞
  • 2篇宋武琦
  • 2篇钱钧
  • 1篇答嵘
  • 1篇车洋
  • 1篇宋武奇
  • 1篇陈小贝
  • 1篇钟学宽
  • 1篇沈红
  • 1篇刘利
  • 1篇谷佳睿
  • 1篇佟雷
  • 1篇李玉军
  • 1篇李晓波
  • 1篇林志国
  • 1篇贾丽娜
  • 1篇车彦军
  • 1篇包丽丽

传媒

  • 2篇哈尔滨医科大...
  • 2篇中国地方病学...
  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 2篇2008
  • 3篇2007
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
重组腺相关病毒对大鼠神经干细胞的体外转染及其对细胞生长的影响被引量：2
2007年
目的 研究重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）载体对原代培养的神经干细胞（neural stemcells，Nsc）的体外转染及其对细胞增殖、分化和迁移能力的影响。方法 取新生24h内的Wistar大鼠的海马进行神经干细胞原代培养，用不同滴度的rAAV为载体，以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）基因作为报告基因进行体外转染NSC，通过观察有绿色荧光的NSC的数量，测定rAAV对NSC的体外转染情况；用MTT法测定不同病毒滴度下rAAV对NSC增殖能力的影响，用免疫组化法鉴定NSC、神经元及神经胶质细胞，并在倒置荧光显微镜下直接测定细胞的迁移距离。结果 rAAV对NSC的体外转染效率随着病毒滴度的增加而提高，在转染后的第11天表达水平最高，用MOI为10^4、10^5、10^6的rAAV转染后第11天的转导率分别是9．81％、56．30％、64．67％；不同滴度rAAV转染NSC后不同时间点的MTT测定A值随着病毒滴度的增加而明显减小，差异均有统计学意义；但不同滴度rAAV转染NSC，其分化为神经元和神经胶质细胞的比率以及迁移的距离未见差异。结论 较高滴度（MOI为10^5和10^6）的rAAV可以在体外有效地转染神经干细胞，且不影响神经干细胞的分化和迁移能力，但对其增殖能力有明显抑制，并表现为病毒滴度依赖性。
车彦军林志国沈红宋武奇刘利李晓波张凤民
关键词：腺相关病毒绿色荧光蛋白神经干细胞转染
癫痫患者脑组织海马神经元的形态变化和神经元特异性烯醇化酶表达被引量：3
2008年
目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和正常无精神与神经疾病的尸检者（20例）。HE染色，光镜下观察脑组织中海马区齿状回颗粒细胞层神经元形态学改变；免疫组织化学方法检测NSE表达，比较两组NSE阳性表达率。结果癫痫患者脑组织海马颗粒细胞层中均可见核固缩的神经元，约占全部神经元的15．80％，还可见到肿胀的神经元：NSE阳性表达的神经元呈棕黄色，在出现核固缩的神经元中，发生NSE阳性表达占28．66％；癫痫病人脑组织海马NSE阳性表达率为（7．9±5．6）％。对照组脑组织海马神经元形态正常，细胞核大而圆，位于胞体中央。核仁明显，NSE阳性表达率为（39．0±17．4）％。与对照组相比，癫痫患者含棕黄色颗粒的神经元数目减少，两组NSE阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=-5．13，P〈0．01）。结论癫痫患者脑组织中海马神经元形态改变和NSE表达异常．可能是癫痫患者发病的主要因素之一。
谷佳睿李小光谷佳傲林志国靳占峰刘玉芳张凤民
关键词：癫痫海马神经元特异性烯醇化酶
实时定量RT-PCR检测博尔纳病病毒方法的建立被引量：5
2007年
目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)方法。方法设计BDV-p40基因特异性引物和探针,优化反应条件;并以已知的BDV-p40基因扩增产物的克隆为标准品,建立标准曲线;然后对已知BDV RNA进行实时定量RT-PCR的特异性和敏感性检测。结果建立了特异检测BDV RNA的实时定量RT-PCR技术,并且可以检测到感染细胞中1个拷贝以上BDV RNA。结论本技术可以直接用于BDV感染的检测和定量分析。
钱钧包丽丽贾丽娜李小光佟雷宋武琦翟爱霞李玉军张凤民
关键词：博尔纳病病毒逆转录聚合酶链反应实时PCR
博尔纳病病毒p40基因重组质粒的构建及鉴定被引量：1
2007年
目的构建博尔纳病病毒p40基因重组表达质粒。方法通过PCR方法扩增获得博尔纳病病毒p40基因的完整序列,将此片段定向克隆到pEGFP-N1载体多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用PCR方法和核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。结果成功构建博尔纳病病毒p40基因重组表达质粒。结论本文构建的重组质粒将为研究博尔纳病病毒p40基因在真核细胞中的功能和作用提供实验依据。
车洋答嵘宋武琦李小光钱钧翟爱霞陈小贝张凤民
关键词：博尔纳病病毒基因重组PCR
克山病、硒缺乏和病毒感染及其变异的研究回顾与启示被引量：4
2008年
通过回顾克山病（Keshan disease）、硒（selenium）缺乏与柯萨奇病毒（Coxsackie virus）感染及其基因变异的研究结果，结合硒缺乏可以引起柯萨奇病毒与其他病毒发生基因变异，以及促进病毒感染与发病过程等研究数据，说明因宿主营养失衡所致病毒基因变异而形成的新现病毒（emerging virus）是新现病毒性疾病（emerging viral disease）发生的重要基础。
张凤民那木子钟学宽
关键词：克山病硒病毒
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