国家自然科学基金(81060248)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- IRF4逆转录病毒表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的将小鼠IRF4基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP质粒,得到长期稳定表达IRF4的逆转录病毒载体.方法以含IRF4 cDNA质粒作为模板,PCR扩增所需目的片段;将该片段连接入MSCV-IRES-GFP质粒;以磷酸钙法转染293T细胞,收集病毒上清感染GP+E86细胞后,流式细胞术和蛋白印迹技术检测IRF4的表达.结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功连接到逆转录病毒MSCV载体上.逆转录病毒上清成功感染GP+E86细胞系.结论成功构建了小鼠IRF4逆转录病毒表达载体,并实现了IRF4在GP+E86细胞系中的外源性表达.
- 何颖红赵文珍杨勇琴王一心
- 关键词：逆转录病毒载体小鼠
- 磷脂酶Cγ2对自身反应性B细胞的调控作用
- 2012年
- 目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况.结果 PLCγ2缺失小鼠与PLCγ2野生小鼠相比,无能B细胞数量显著减少(P<0.01),无能B细胞凋亡率显著增加(P<0.01),而无能B细胞增殖率无明显差异(P>0.05).结论 PLCγ2信号提供了存活信号,PLCγ2参与了无能B细胞的调控过程.
- 何颖红赵文珍杨勇琴王一心
- 关键词：小鼠
