国家重点实验室开放基金(SKL2009SR03) 作品数:7 被引量:17 H指数:3 相关作者: 何晨阳 吴茂森 陈华民 武晓丽 孙蕾 更多>> 相关机构: 中国农业科学院植物保护研究所 东北林业大学 更多>> 发文基金: 国家重点实验室开放基金 国家公益性行业科研专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
水稻白叶枯病菌双组分调控系统应答调节子基因gacAxoo的功能鉴定 2010年 为了阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)双组分系统(TCS)的调控作用,本研究通过基因克隆、序列分析、缺失突变和互补、表型测定,对TCS应答调节子基因gacAxoo的功能进行了鉴定。克隆的gacAxoo基因编码蛋白GacAxoo与其它病原黄单胞菌的同源序列高度保守。GacAxoo是LuxR蛋白家族成员之一,具有磷酸受体结构域(REC)和DNA结合保守结构域(HTH)。用基因标记交换法,构建了△gacAxoo基因缺失突变体。与PXO99A相比,△gac-Axoo的致病性、致敏性、胞外降解酶类活性和嗜铁素产生能力无显著变化,但运动性明显减弱,基因互补可以使之恢复。因此,gacAxoo基因可能参与了Xoo运动性的调控。 许景升 吴茂森 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 运动性 水稻白叶枯病菌EAL结构域蛋白VieAxoo基因缺失突变和功能分析 被引量:5 2011年 【目的】旨在揭示水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,简称Xoo)环鸟苷二磷酸(c-di-GMP)信号蛋白VieAxoo的生物学功能。【方法】本研究通过标记置换法对vieAxoo基因(PXO_04753)进行了缺失突变研究,采用表型测定进行了功能鉴定。【结果】从野生型菌株PXO99A中克隆的vieAxoo基因序列与其它病原黄单胞菌的同源序列高度保守。VieAxoo具有参与c-di-GMP降解的磷酸二酯酶(PDE)EAL结构域和磷酸信号识别受体REC结构域。与PXO99A相比,△vieAxoo基因缺失突变体对水稻的致病性、胞外多糖(EPS)产生和运动性无明显改变;但对烟草的致敏性和生物膜形成显著降低;基因互补可以使之完全恢复。【结论】VieAxoo正向调控了Xoo对烟草的致敏性和生物膜形成能力。 梁士敏 杨凤环 管文静 吴茂森 陈华民 田芳 许艳丽 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 缺失突变 应用GDPs转录物标记法进行水稻白叶枯病菌早期侵染表达谱分析 2009年 【目的】揭示水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)在侵染水稻叶组织早期的基因表达谱差异。【方法】采用GDPs-Finder计算法,设计了能够覆盖KACC10331基因组全部ORFs的定向引物(GDPs),对Xoo与水稻互作1、3和7d的总RNA进行反转录,对病菌cDNA探针进行Cy3/Cy5选择性标记,与含有371个Xoo致病相关基因的芯片进行杂交。【结果】在水稻侵染的不同时期,Xoo致病相关基因表达谱存在差异。与在NBY中生长相比,Xoo在侵染1、3和7d时分别有42个(18个上调和23个下调)、51个(29个上调和22个下调)和33个(16个上调和17个下调)基因发生了差异表达;其中5个基因是共有上调表达的,5个是共有下调表达的。推测这些基因的差异表达可能与病菌适应寄主体内环境、生长与定殖以及为害与显症过程有关。【结论】应用GDPs转录物标记技术可以成功地进行Xoo侵染过程的表达谱分析,鉴定出的差异表达的基因可以作为功能研究的靶标基因。 张新建 高世强 吴茂森 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 表达谱 差异表达基因 OsCtBP-A基因过量表达和RNAi沉默对水稻根系生长和抗性的影响 被引量:2 2010年 为了阐明己克隆的水稻C端结合蛋白家族基因O sC tBP-A的功能,构建了该基因的过量表达和RNA i沉默载体,通过农杆菌介导转化水稻品种日本晴愈伤组织,分别获得了45个过量表达和75个RNA i沉默T0代转基因植株,并进行了PCR和GUS染色鉴定。T1代过量表达株O sC tBP-A基因表达量明显增加,苗期根系生长增加,对水稻白叶枯病抗性无明显变化;而基因沉默株O sC tBP-A基因表达量显著下降,苗期根系发育迟缓,抗旱性明显降低,抗病性减弱。表明O sC tBP-A基因的表达可能对水稻苗期根系发育、抗旱性和抗病性具有不同程度的调控作用。 吴茂森 李磊 吴静 陈华民 何晨阳关键词:RNAI沉默 根系发育 抗性 水稻白叶枯病菌c-di-GMP代谢系统成员鉴定及其信号机制分析 环鸟苷二磷酸(c-di-GMP)是一种广泛存在于细菌中的新型第二信使,具有调节包括细胞信号交流、生物膜形成、运动性和毒性等生物学功能。c-di-GMP的代谢(生物合成和降解)分别受带有GGDEF结构域的鸟苷酸环化酶(DG... 杨凤环 梁士敏 王红敏 孙蕾 管文静 吴茂森 陈华民 何晨阳文献传递 应答调节蛋白基因flgRRxoo对水稻白叶枯病菌毒性表达的调控作用鉴定 被引量:1 2010年 为了阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,简称Xoo)应答调节蛋白FlgRRxoo的生物学功能,本研究通过基因克隆和序列分析、用标记交换法构建突变体以及表型测定,对flgRRxoo基因进行了分子鉴定。通过设计引物进行特异性扩增,成功地从Xoo野生型菌株PXO99A中克隆了flgRRxoo。FlgRRxoo为N端具有REC结构域的单一结构应答调节蛋白,其基因序列与其他黄单胞病菌中的同源序列高度保守。与PXO99A相比,△flgRRxoo胞外多糖(EPS)合成能力以及对水稻的毒性显著降低,基因互补可以使之恢复;△flgRRxooEPS合成基因gumBDGKM表达均有所下降;但其运动性、胞外纤维素酶和木聚糖酶活性无明显改变。表明FlgRRxoo可能主要通过调控EPS合成能力,影响了病菌在水稻上的毒性。 武晓丽 吴茂森 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 胞外多糖 毒性 水稻白叶枯病菌应答调节蛋白FlgRRxoo对毒性表达的调控作用 双份信号传导系统(TCS)是细菌主要的感应一应答调节机制,由组氨酸激酶传感蛋白(HK)和应答调节蛋白(RR)组成。HK可通过自磷酸化作用将外界信号刺激转化为细胞内的化学信号;RR一般定位在细胞质,接受组氨酸激酶传递的磷酸... 武晓丽 吴茂森 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 胞外多糖 毒性 文献传递 细菌鞭毛素对植物免疫防卫反应及其信号机制的激发 被引量:3 2011年 细菌鞭毛素(flagellin)是一类可以诱导寄主植物细胞发生防卫反应的病原物相关分子模式(PAMP)因子,其活性位点是被称为flg22的N-末端保守的22个氨基酸多肽,植物体内与其结合的模式识别受体是FLS2。flg22可以诱导植物细胞发生活性氧(ROS)的猝发、细胞培养介质碱化、一氧化氮(NO)的产生,胼胝质沉积以及MAPK级联反应、防卫基因表达等多种防卫反应。本文结合本室有关水稻白叶枯病菌的研究结果,综述近年来国内外在鞭毛素诱导植物防卫反应研究领域的最新研究进展。 武晓丽 陈华民 吴茂森 何晨阳关键词:植物防卫反应 水稻白叶枯病菌Δrpfxoo基因缺失突变体DSF信号产生和毒性表达 被引量:10 2010年 【目的】旨在阐明3个DSF/Rpfxoo信号系统成员RpfFxoo、RpfCxoo和RpfGxoo在水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)毒性表达中的功能。【方法】用标记置换法缺失突变rpfFxoo、rpfCxoo和rpfGxoo基因,测定突变体及其互补菌株的DSF(diffusible signal factor)信号分子产生、胞外多糖(EPS)产生及其对水稻的致病性。【结果】从野生型菌株PXO99A基因组中克隆了推测与DSF信号生成和传导有关的基因rpfFxoo、rpfCxoo和rpfGxoo,获得了相应的单基因或双基因缺失突变体。与PXO99A产生DSF相比,ΔrpfFxoo、ΔrpfF+Cxoo和ΔrpfF+Gxoo均不产生DSF,ΔrpfCxoo过量产生,ΔrpfGxoo产量降低;rpfFxoo、rpfCxoo和rpfGxoo可以分别互补Xoo和Xcc的相应基因突变体,恢复DSF产生表型。除ΔrpfFxoo的EPS产生无明显变化外,其余突变体的均显著减少。所有突变体对水稻的致病性均显著下降。【结论】RpfFxoo、RpfCxoo和RpfGxoo调控了Xoo的DSF信号生成、EPS产生和致病性。 孙蕾 吴茂森 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 SIGNAL 毒性 鞭毛素Fli Cxoo在水稻白叶枯病菌鞭毛运动性和水稻细胞PTI激发中的功能分析 水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,简称Xoo)引起的水稻白叶枯病是影响水稻生产的重要细菌性病害之一;同时水稻-Xoo互作体系已成为研究植物-病原细菌互作的重要模式系统之一。Xoo的... 武晓丽 吴茂森 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 运动性 文献传递