浙江省自然科学基金(301007)
- 作品数：3 被引量：37H指数：3
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- 相关机构：杭州师范大学浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省分析测试基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 芜菁花叶病毒温州分离物HC-Pro基因序列分析被引量：5
- 2002年
- 从浙江温州盘菜上获得芜菁花叶病毒温州分离物（TuMV-WZ）,病毒提纯后,经电镜观察,可发现大量长约700nm的线形粒子。利用免疫捕捉RT-PCR,通过特异性引物对TuMV-WZ的HC-Pro基因进行PCR扩增,经电泳可见1.5kb的特异条带。PCR扩增产物经过纯化后进行序列测定,序列长度为1449个核苷酸,编码482个氨基酸。其核苷酸序列与已报道的TuMV的其他分离物（Canada,UKl和Japanese）同源率分别为83.9％、96.5％和94.0％,氨基酸同源率分别为97.3％、98.8％和99.0％。
- 施曼玲李桂新陶小荣
- 关键词：芜菁花叶病毒HC-PRO基因盘菜
- 芜菁花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用被引量：26
- 2004年
- 先以芜菁花叶病毒 (TuMV)免疫BALB C小鼠 ,然后取其脾细胞使之与SP2 0鼠骨髓瘤细胞融合 ,经筛选、克隆 ,获得 4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体 (MAb)的杂交瘤细胞 ,并以之制备腹水单抗。 4株单克隆抗体腹水ELISA效价在 10 - 5～ 10 - 6 之间 ,仅对TuMV起特异性反应。Westernblot分析表明 ,4株单抗都能与TuMV34kD的外壳蛋白亚基起特异反应。利用TuMV的多抗兔血清和单抗腹水建立了三抗体夹心ELISA检测TuMV的方法 ,检测病叶的灵敏度为 1∶5 12 0倍 ,检测提纯TuMV病毒绝对量为 2 1 9ng。利用三抗体夹心ELISA测定出 7种作物上有TuMV侵染。
- 施曼玲吴建祥郭维周雪平
- 关键词：芜菁花叶病毒单克隆抗体TUMV寄主杂交瘤细胞田间作物
- 浙江榨菜病毒病病原鉴定被引量：7
- 2003年
- 从浙江桐乡和海宁的花叶或叶片皱缩、植株矮化的榨菜(Brassica juncea Coss)上分离毒源,摩擦接种5种鉴别寄主,在鉴别寄主上都出现不同症状;间接酶联免疫吸附法(In-direct ELISA)检测,芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的检出率为87.5％,黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)为73.08％,两者复合侵染率为65.38％,所有的样本都没有检测到烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV);IC-RT-PCR扩增,分别得到约0.85kb和0.7kb的两条条带,与预期的TuMV和CMV的CP基因大小吻合。CP基因序列测定也表明:所克隆产物是属于TuMV和CMV的CP基因。根据以上试验结果判断:浙江榨菜病毒病主要是由TuMV、CMV以及TuMV和CMV复合侵染引起。
- 施曼玲
- 关键词：榨菜芜菁花叶病毒黄瓜花叶病毒病毒病
