国家自然科学基金(30571144)
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
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- 水稻红莲型不育系雄性配子发育过程中线粒体功能基因转录本的编辑位点研究被引量：11
- 2006年
- RNA编辑普遍存在于高等植物线粒体中,是线粒体产生功能蛋白所必不可少的过程。以红莲(HL)型水稻细胞质雄性不育系粤泰A、保持系粤泰B及杂种红莲优6四分体时期的花药、单核花粉和二核花粉为材料,研究了线粒体功能基因———atp6、coxⅡ及嵌合基因orfH79转录本的编辑位点。结果表明,atp6转录本的编辑能力明显受到恢复基因的影响。atp6转录本在不育系中不被编辑或部分编辑,而在引入了恢复基因的杂种一代中,其编辑能力均大幅提高。coxⅡ转录本在3个材料中编辑状态没有差别,而嵌合基因orfH79在各个材料中均不被编辑。由此推测,红莲型水稻细胞质雄性不育与atp6转录本编辑能力的基本丧失紧密相关。
- 孔进谭艳平陈祖玉李绍清朱英国
- 关键词：水稻线粒体RNA编辑细胞质雄性不育
- 水稻红莲型不育系雄性配子发育过程中线粒体功能基因转录本的编辑位点研究
- RNA 编辑普遍存在于高等植物线粒体中,是线粒体产生功能蛋白所必不可少的过程。以红莲(HL)型水稻细胞质雄性不育系粤泰 A、保持系粤泰 B 及杂种红莲优6四分体时期的花药、单核花粉和二核花粉为材料,研究了线粒体功能基因—...
- 孔进谭艳平陈祖玉李绍清朱英国
- 关键词：水稻线粒体RNA编辑细胞质雄性不育
- 文献传递
- 红莲型杂交水稻细菌双杂交系统文库的构建被引量：1
- 2009年
- 用Trizol试剂提取红莲型水稻杂种F1幼穗的总RNA,分离纯化mRNA后反转录并合成双链cDNA.经Sephrose CL-2B凝胶过滤柱层析后,收集大于400 bp以上的双链cDNA片段,将其连接到pTRG载体上,转化到XL1-Blue MRF′Kan感受态细胞后构建成红莲水稻幼穗细菌双杂交文库.经检测计算该原始文库容量为1.03×106pfu/mL,对随机挑取的100个克隆进行PCR鉴定显示重组率接近100%而且大于800 bp的插入片段达到97%.扩增后文库的容量达到1.05×1010pfu/mL.
- 王坤胡骏彭晓珏李绍清朱英国
- 关键词：水稻幼穗文库构建
- 红莲型水稻杂种F1花药噬菌体展示文库的构建被引量：1
- 2008年
- 噬菌体展示是研究蛋白质相互作用的重要手段,为深入研究红莲型水稻不育和育性恢复的分子机理,以红莲型水稻杂种F1花药为材料,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA,在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。经Mini Column纯化后,收集300bp以上的双链cDNA片段,将其连接到带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7 Select 10-3b载体上,经体外包装后,以BL T5403为受体菌构建了红莲水稻杂种F1花药的噬菌体展示文库。经测定显示,该噬菌体展示文库容量为1.03×106pfu/mL,重组率为100%,扩增后文库滴度为2.14×1012pfu/mL。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,97%的插入片段大于300bp。
- 胡朝凤彭晓珏周杨永谭艳平李绍清朱英国
- 关键词：水稻花药噬菌体展示文库构建
