国家自然科学基金(C030204)
- 作品数：9 被引量：40H指数：4
- 相关作者：时飒孙轶华徐长庆李弘赵雅君更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学第三军医大学大坪医院上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 圈套寡核苷酸抑制NIH3T3细胞α2Ⅰ型胶原基因表达的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 研究激活剂蛋白 1(activatorprotein 1,AP 1)圈套寡核苷酸 (decoy oligodeoxynu cleotides,Decoy ODNs)对成纤维细胞α2Ⅰ型胶原表达的影响 ,探讨病理性瘢痕的基因治疗。 方法 设计合成针对AP 1的Decoy ODNs,用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞 ,观察Decoy ODNs在细胞中的分布 ;用凝胶迁移变动分析 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)研究Decoy ODNs对AP 1的抑制作用 ,采用RT PCR观察其对细胞胶原合成的影响。 结果 AP 1的Decoy ODNs可在体外竞争抑制核转录因子AP 1的活性 ;阳离子脂质体可以将Decoy ODNs转染进入细胞浆及细胞核从而发挥作用 ;Decoy ODNs作用 2 4h后 ,NIH3T3细胞α2Ⅰ型胶原mRNA的表达明显降低。 结论 Decoy ODNs可以通过拮抗核转录因子AP 1的活性而抑制α2Ⅰ型胶的表达。
- 郝天智梁华平吕凤林徐祥国华王付龙杨文军罗艳李磊
- 关键词：圈套寡核苷酸NIH3T3细胞基因表达成纤维细胞
- 危重症患者机械通气前后不同时段内合并严重肺感染的细菌构成与转变被引量：16
- 2002年
- 目的 :探讨机械通气前后不同类型严重肺感染和抗生素应用时相应各时段的致病细菌构成与转换 ,为临床治疗提供有效依据。方法 :收集本院近年来危重症行机械通气患者共 6 2 9例 ,按肺感染的不同类型和时段 ,在使用抗生素时观察其痰中培养出致病菌的种类和构成比。结果 :院前肺感染组 (172例 )革兰阳性 (G+ )菌的构成比较混合肺感染组和院内肺感染组均高 (分别为 76 .0 % ,37.8% ,11.9% ) ,P均 <0 .0 1;而 G- 菌则表现为院内肺感染组及混合肺感染组较院前肺感染组高且差异显著 (分别为 88.1% ,6 2 .0 % ,2 4 .0 % ) ,P均 <0 .0 1。 3组中 G+ 菌以肺炎球菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌为主 ;而 G- 菌则以绿脓杆菌、不动杆菌和克雷白杆菌为主 ,同时伴有霉菌生长。在对 112例严重肺感染患者进行继续观察时发现 ,在不同时段中可见到从 G+ 菌到G- 菌的动态转变。结论 :不同类型的肺感染其致病菌有显著差异 ,同种肺感染的不同治疗阶段细菌构成比也在转变。选择抗生素时既要对其致病菌有针对性 。
- 康建利丁殿勋单毅王洪武石湘云冯华松王士雯
- 关键词：危重症细菌构成肺感染机械通气
- 多巴胺受体蛋白在大鼠心肌肥厚时的表达变化被引量：6
- 2006年
- 目的:观察多巴胺受体(DR)1和2mRNA和蛋白质在大鼠病理性心肌肥厚时的表达情况。方法:应用肾动脉缩窄术复制Wistar大鼠心肌肥厚的动物模型。于术后35d取心脏,测定心肌肥大指数,左室内压,V-G染色观察胶原含量。应用心肌原位杂交和RT-PCR,免疫荧光,Westernblotting结合图像分析系统分别检测心肌组织中多巴胺受体D1、D2mRNA和蛋白质的表达变化。结果:DR1、DR2mRNA在正常大鼠心肌组织有表达,其中血管平滑肌细胞内DR2的分布多于心室肌和心房肌细胞。模型组左心肥大明显,表现为室内压显著升高,胶原含量增多;模型组心室肌DR1和DR2mRNA和蛋白质的含量均明显低于假手术组。结论:正常大鼠心肌组织存在DR1和DR2mRNA和蛋白质的表达,心肌肥厚时其表达明显减低,两者的关系及可能机制有待于进一步研究。
- 李弘徐长庆孙轶华时飒赵雅君张力
- 关键词：心肌肥厚
- 阻断IgG-Fcγ受体结合的短肽对粒细胞与内皮细胞黏附及内皮细胞细胞间黏附分子1表达的影响
- 2008年
- 目的观察阻断IgG-Fcγ结合的短肽tgl9320对粒细胞与内皮细胞黏附以及内皮细胞细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响，并探讨其作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）。提纯活动期血管炎患者血清抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）IgG。以多肽固相合成tgl9320。分离健康人新鲜外周血中性粒细胞。分别以肿瘤坏死因子α（TNF-α）、健康人IgG、ANCA IgG 及ANCA IgG＋tgl9320处理HUVEC，用细胞直接计数法检测粒细胞与内皮细胞间的黏附率；应用Westem印迹及实时定量PCR方法检测HUVEC ICAM-1蛋白和mRNA表达；ELISA检测细胞培养上清液中可溶性ICAM-1（sICAM-1）的水平；Westem印迹检测HUVEC磷酸化核因子KB抑制物（p-IKB）的表达。结果ANCA IgG显著上调中性粒细胞与内皮细胞间的黏附率（P〈0.05），但ANCA IgG＋tgl9320组较ANCA IgG组黏附率显著降低（P〈0．05）。ANCA IgG组与健康人IgG组相比，HUVEC ICAM-1 mRNA及蛋白表达显著增加（P〈0．05）。tgl9320分别从mRNA和蛋白水平阻断ANCA对ICAM-1的作用（P〈0．05），并显著降低ANCAIgG引起的细胞培养上清液中sICAM水平增高（P〈0．05）。ANCA IgG增加HUVEC p-IκB表达，tgl9320显著降低p-IκB的表达。结论tgl9320通过抑制IκB磷酸化进而干预NF-κB活化；抑制ANCA IgG对内皮细胞与中性粒细胞间黏附的促进作用，并阻断ICAM-1上调表达。短肽tgl9320对原发性小血管炎具有体外保护作用。
- 王湘玲俞海瑾任红王伟铭倪莉燕陈楠
- 关键词：短肽细胞黏附细胞间黏附分子1
- 多巴胺系统及L-精氨酸／一氧化氮通路在大鼠心肌肥大中的作用研究
- 2007年
- 目的 探讨多巴胺系统及L-精氨酸／一氧化氮（L—Arg／NO）通路在大鼠心肌肥大动物模型中的作用及相关机制。方法 采用腹主动脉缩窄术复制大鼠心肌肥大动物模型。将Wistar大鼠随机分为4组：①腹主动脉缩窄术（AC）组；②假手术（SO）组；③L-精氨酸（L—Arg）组；④左旋硝基精氨酸甲酯（L—NAME）组。通过心肌肥大指数，心肌组织胶原染色，心功能检测等方法分析各组大鼠心肌组织肥大状况：采用RT—PCR和Western blot结合图像分析系统，观察药物干预后，心肌组织中多巴胺受体D1、D2mRNA和蛋白质表达变化：借助紫外分光光度计，分析心肌组织匀浆中一氧化氮（NO）水平和一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 AC组左心肥大明显．表现为室内压显著升高，胶原增多；与SO组比较，腹主动脉缩窄术后D1、D2mRNA和蛋白质表达均明显降低（P〈0.01），NO、NOS水平明显下降（P〈0.01）；应用NOS抑制剂L-NAME预处理能够促进肥大的发生。使用NO合成的前体L-Arg干预，则抑制肥大发生。结论 压力负荷加大能引起心肌肥大。其机制可能与NO合成减少有关：大鼠心肌细胞内存在多巴胺受体D1、D2mRNA和蛋白质表达，心肌肥厚时二者均明显减低。
- 李弘徐长庆孙轶华时飒李全凤赵雅君
- 关键词：心肌肥大多巴胺受体一氧化氮
- 间隙连接蛋白-43的表达调控及其功能被引量：10
- 2005年
- 细胞间间隙连接通讯(G JIC)是相邻细胞之间的信息和能量物质交换的重要基础。作为G JIC重要成员之一的connexin43(Cx43)基因在转录和翻译水平受到机体的严密调控。相应地,除了调节G JIC外,Cx43也通过影响细胞增殖、分化和凋亡过程参与多种疾病尤其是肿瘤的发生和发展过程。
- 徐娅蓓陈国强
- 关键词：CONNEXIN43抑癌基因
- 转化生长因子-β诱导活化蛋白-1活化及促进NIH3T3细胞α2Ⅰ型胶原表达的研究
- 2003年
- 目的 研究活化蛋白 1(AP 1)在转化生长因子 β(TGF β)促进Ⅰ型胶原基因表达中的作用 ,探讨病理性瘢痕的形成机制。方法 用 5 μg/LTGF β刺激鼠成纤维细胞株NIH 3T3细胞 ,分别采用凝胶迁移变动分析 (EMSA)和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术研究TGF β对AP 1的活化及其对α2 Ⅰ型胶原mRNA水平的影响。结果 5 μg/LTGF β刺激NIH3T3细胞 ,0 .5h即可检测到AP 1被活化 ,随时间推移AP 1的活性逐渐增强 ,6h达到峰值 ,而后活性逐渐减弱 ,2 4h仍然可检测到AP 1的活性。用TGF β刺激NIH3T3细胞 ,2 4h后提取总RNA ,经RT PCR分析 ,与对照组相比α2 Ⅰ型胶原mRNA水平明显增高。结论 TGF β刺激NIH3T3细胞 ,可激活AP 1并可以上调α2 Ⅰ型胶原的表达。
- 郝天智梁华平吕凤林徐祥国华王付龙
- 关键词：转化生长因子-Β活化蛋白-1NIH3T3细胞病理性瘢痕
- 抗中性粒细胞胞质抗体对中性粒细胞表面FcγⅡ／Ⅲ受体表达的影响及其意义被引量：1
- 2008年
- 目的探讨抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）对中性粒细胞表面FcγⅡ／Ⅲ（CD32／CD16）受体表达的影响及临床意义。方法提纯活动期ANCA相关性小血管炎（AASV）患者的ANCAIgG，分离健康人新鲜中性粒细胞，以ANCA刺激粒细胞1h后，流式细胞仪检测CD32／CD16的表达。流式细胞仪检测18例系统性小血管炎患者CD32／CD16的表达，以35名健康人为对照。同时对18例患者临床表现及血管炎活动情况进行评分，与CD32／CD16表达进行相关分析。结果ANCAIgG与正常人IgG相比显著上调中性粒细胞表面CD16的表达（Mnx67±23vss54±21，P〈0．01），但对CD32的表达无影响（Mnx21±8vs16±8，P〉0．05）。系统性小血管炎患者CD16表达的平均荧光强度显著高于正常人（Mnx62±12vs53±10，P〈0．01），而CD32的表达与正常人差异无统计学意义。CD16表达与伯明翰小血管炎呈显著正相关（P〈0．01）。结论ANCA相关性小血管炎患者高表达Fcγ受体，ANCA可以干预CD32／CD16受体的表达，调控Fcγ受体表达可能是系统性小血管炎的发病机制之一，监测CD16的表达水平对于判断疾病活动具参考价值。
- 王湘玲陈楠俞海瑾任红王伟铭倪莉燕
- 关键词：抗体血管炎
- RA患者易感基因肽酰基精氨酸脱亚氨酶4mRNA的表达及其意义被引量：6
- 2007年
- 目的检测酰基精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)在类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)mRNA的表达,分析其与RA临床相关指标的相关性,探讨PADI4在RA发病机制中的作用。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)实时荧光定量法对RA组(53例)、骨关节炎(OA)组(27例)及正常对照组(30名)PBMC中PADI4 mRNA表达进行检测,并分析其与抗环瓜氨酸(CCP)抗体、疾病活动关节评分28(DAS 28)、患者病程的关系。结果RA组PADI4 mRNA表达明显高于OA组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PADI4 mRNA的表达在OA组、正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。RA组中PADI4 mRNA表达与抗CCP抗体和DAS28评分水平呈明显正相关(r=0.452,0.653,P均<0.05),与病程呈负相关(r=-0.68,P<0.05)。结论RA组PADI4 mRNA表达显著增高,并与DAS28评分和抗CCP抗体水平呈明显正相关,与病程呈负相关。提示RA患者PADI4 mRNA表达明显增高,与疾病活动程度和自身免疫功能异常相关。
- 常丽丽刘燕鹰栗占国
- 关键词：瓜氨酸
