国家自然科学基金(31201927)
- 作品数：69 被引量：293H指数：11
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- 相关机构：吉林农业大学吉林出入境检验检疫局河北科技师范学院更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 被膜态与浮游态猪源乳杆菌上清液抑菌活性比较分析被引量：2
- 2019年
- 试验旨在比较分析猪源约氏乳杆菌L-76和嗜淀粉乳杆菌L-102被膜态和浮游态下其上清液对病原菌的抑菌活性。采用结晶紫染色法测定L-76和L-102的生物被膜形成能力,研究其被膜态和浮游态乳杆菌上清液及上清液与不同影响因素作用后的抑菌活性,并利用扫描电镜观察其两种状态下的上清液对指示菌形态的影响。结果显示,L-76、L-102乳酸菌具有较强的生物被膜形成能力,被膜态和浮游态乳杆菌L-76、L-102具有良好的抑菌活性,其上清液经蛋白酶作用后,被膜态L-76和L-102上清液的抑菌圈直径比浮游态明显变小;经过氧化氢酶和不同温度作用后,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌活性无明显变化(P>0.05),但在pH 3.0作用下,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌效果最好;扫描电镜结果显示,被膜态乳杆菌上清液对金黄色葡萄球菌的形态影响略大。综上所述,两种状态下乳酸杆菌上清液中均含有抑菌物质,且被膜态乳酸杆菌上清液中的抑菌物质含量略多或活性略高。
- 靳胜男舒慧萍张冬星赵泽林康元环张蕾单晓枫钱爱东
- 关键词：乳杆菌生物被膜抑菌性
- 维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌的构建及其表达产物的免疫原性分析被引量：3
- 2017年
- 为构建维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,将目的基因克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体p SIP409中,并电转至植物乳杆菌中,经诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌出现一条约42 ku的印迹,与预期大小相符,表明重组蛋白具有反应原性。LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌免疫鲫鱼后,在第25天血清中Ig M水平达到高峰;RT-PCR检测发现免疫后鲫鱼肝、脾、肾及心组织中的细胞因子IL-8、IFN-γ与IL-1β表达水平均有不同程度提升;攻毒后LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫组的保护率在65%以上,高于对照组的存活率。结果表明,应用重组植物乳杆菌LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫鲫鱼能刺激机体产生免疫应答反应,为预防鱼类维氏气单胞菌感染的重组植物乳杆菌口服制剂的研发奠定了基础。
- 张冬星康元环田佳鑫安鼎杰贾俊鹏孙武文吴同垒单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌免疫原性
- 青虾源维氏气单胞菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析被引量：2
- 2017年
- 为了研究维氏气单胞菌胞外产物在青虾感染中的致病作用以及维氏气单胞菌的致病机理,本试验以青虾源维氏气单胞菌QXF0711B为研究对象,提取其胞外产物,采用打孔法测定其胞外产物的酶活性,并对溶血活性进行溶血谱分析,同时分析其致病性。应用液相质谱与串联质谱相结合方法(LC-MSMS)对其胞外产物蛋白成分进行鉴定,利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白进行生物学过程、分子功能和细胞组分的分类分析。结果表明:QXF0711B菌株胞外产物具有淀粉酶活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性,不具有明胶酶活性;其可溶解多种动物红细胞,尤以对鱼类红细胞溶血性更强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性。通过对菌株胞外产物蛋白成分分析显示有90种蛋白:共参与45种生物学过程,主要涉及碳水化合物代谢过程、运输等;共有46种分子功能,主要涉及DNA结合、ATP结合、金属离子结合等;为12种细胞组分,主要包括膜的有机组成、细胞质、细胞外膜等。
- 单晓枫张海月孙武文康元环陈龙张冬星安鼎杰田佳鑫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌胞外产物酶活
- 猪源生物被膜乳酸菌的筛选与体外益生特性评价被引量：3
- 2019年
- 为了研制优良的猪用微生态制剂,从健康猪的新鲜粪便中成功分离获得1株抑菌效果较好、生物被膜形成能力较强的L-11乳酸菌,经16S rDNA分子生物学鉴定,确定该分离株为约氏乳杆菌。并进一步对其体外益生特性包括产酸能力,耐酸碱、耐胰蛋白酶、耐高温、生长曲线、抑菌性能、黏附性以及对小鼠的致病性进行了检测。结果表明,该菌株具有一定的产酸能力,对pH4.0~10.0、10 g/L胰蛋白酶、50和60℃高温环境具有耐受能力;并在MRS液体培养基中培养大约4 h后进入对数生长期,12 h后达到稳定期;此外,该乳酸菌分离株具有广泛的抑菌谱和一定的黏附性,安全、无毒性。这说明乳酸菌L-11分离株可作为猪用益生菌研制的菌株。
- 靳胜男舒慧萍张冬星赵泽林康元环张蕾单晓枫钱爱东
- 关键词：乳酸菌生物被膜益生特性
- 维氏气单胞菌TH0426株外膜蛋白lamB基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：5
- 2017年
- 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的lamB基因进行了克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-lamB,并转化大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白Maltoporin,利用SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。将灭活菌体+弗氏佐剂、纯化的Maltoporin蛋白、Maltoporin蛋白+弗氏佐剂及PBS分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清的免疫指标:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力以及IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白Maltoporin免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在84.2%以上;免疫后鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白Maltoporin具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究A.veronii外膜蛋白基因工程疫苗奠定一定的基础。
- 康元环陈亨利张冬星张海月安鼎杰田佳鑫贾俊鹏孙武文单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌原核表达免疫原性
- 应用IVIAT对动物病原菌体内诱导抗原的筛选研究进展被引量：2
- 2013年
- 病原菌感染宿主动物是一个复杂的动态过程，这一过程需要许多病原菌毒力因子的参与以及毒力基因的相互协调作用。病原菌在体外培养和在宿主体内存在时，由于生存环境不同，病原菌基因表达情况存在很大差异。当病原菌进入宿主体内时为了适应这种变化，
- 康元环王庆奎比尔来西肯·赛都力边宇单晓枫吴同垒钱爱东
- 关键词：动物病原菌抗原宿主动物毒力基因
- 黄河鲤鱼源维氏气单胞菌的分离·鉴定及药敏试验被引量：4
- 2015年
- [目的]为研究鲤鱼感染细菌性疾病及其临床合理用药提供理论依据。[方法]从吉林省某水产养殖场患病黄河鲤鱼的脾脏中分离致病菌,并通过常规生理生化试验、16S rDNA序列分析对其进行鉴定。应用微量稀释法测定11种抗生素药物对其最小抑菌浓度。[结果]从患病鲤鱼的脾脏中成功分离到1株优势菌。该优势菌为革兰氏染色阴性杆菌,通过序列比对将其鉴定为维氏气单胞菌。动物回归试验表明该菌株可使黄河鲤发生死亡。药敏试验结果表明该病原菌对磺胺类、β-内酰胺类、氨基糖苷类药物不同程度耐药,而对氯霉素类药物、恩诺沙星较为敏感,对强力霉素中介。[结论]该研究结果可为鲤鱼源维氏气单胞菌的防治提供科学依据。
- 王家祯耿昕颖朱世馨董文龙贾小营单晓枫高云航
- 关键词：黄河鲤鱼维氏气单胞菌RDNA
- 淡水鱼水霉病及防治的研究进展被引量：6
- 2016年
- 近年来,水霉病给世界淡水养殖业带来了破坏性影响。引起该病的病原菌主要是水霉菌,隶属于卵菌纲。水霉菌流行范围广、危害性强,在土壤、淡水环境中广泛分布。水霉菌细胞壁无几丁质,不同于真菌,其菌丝体发达,纤细而分支繁多,并可深入机体内吸收营养;具有无性生殖和有性生殖两种生殖方式,生活史相对简单,包括游动孢子、孢囊与孢子囊等阶段。抗生素等应用导致耐药性的产生,所以一些新型药物被开发出来。文章概述了水霉病的分类状况、病原菌、临床症状及防治等方面的进展,旨在为深入研究该病提供理论参考。
- 毕彦晖勾长龙朱世馨张宏伟王羽单晓峰高云航
- 关键词：淡水鱼水霉病卵菌中草药
- 维氏气单胞菌TH0426株rpoN蛋白的生物学特性分析及原核表达被引量：1
- 2020年
- 为了深入研究维氏气单胞菌毒力蛋白rpoN的功能,试验采用邻近法构建rpoN基因的系统进化树,对rpoN蛋白进行生物学特性分析,PCR法扩增rpoN基因,将其与表达载体pET-32a(+)连接,再将连接产物转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达和制备抗体,测定抗体效价并进行Western-blot检测。结果表明:rpoN蛋白稳定,属于胞内蛋白,是全α型蛋白。重组表达质粒pET-32a-rpoN在大肠杆菌中成功表达,在约58 ku处可见明亮条带,rpoN多克隆抗体效价为1∶279 000,具有特异性。说明表达的rpoN蛋白具有一定的免疫原性。
- 王冬雪夏明姚贵哲孟庆峰单晓枫
- 关键词：维氏气单胞菌原核表达免疫反应
- 醇提五倍子对鳙鱼非特异性免疫功能及抗病能力的影响被引量：7
- 2015年
- 为了研究五倍子对鳙鱼抗病能力的影响,将600尾鳙鱼（Aristichtys nobilis）随机分为4组,分别饲喂含有0.00%（对照）、0.50%、1.00%、2.00%（m/m）醇提五倍子的饵料,于第15、30、45天采集血样,检测各项免疫学指标,并以嗜水气单胞菌为指示菌进行攻毒试验,观察机体抗病能力。结果发现：（1）第15天,各组溶菌酶（LSZ）浓度依次为0.30、0.32、0.32、0.35μg/mL,其中2.0%组显著高于对照组（P〈0.05）;（2）随着五倍子添加量增加,超氧化物歧化酶（SOD）活力随之升高,第45天,1.00%、2.00%组浓度达到130、138U/mL,与对照组（115U/mL）相比差异显著（P〈0.05）;（3）第15天,试验组血浆球蛋白（GLB）含量均高于对照组,第45天1.00%组与对照组差异显著（P〈0.05）;（4）经攻毒试验,1.00%组存活率最高,达46.67%,对照组存活率仅为13.33%（P〈0.05）。以上试验结果表明,醇提五倍子可提高鳙鱼非特异性免疫能力,且对嗜水气单胞菌引起的感染具有一定抵抗作用,其在饵料中添加量以0.50%~1.00%为宜。
- 耿昕颖刘蕾王家祯王巍单晓枫马红霞高云航
- 关键词：醇提五倍子鳙鱼非特异性免疫
