国家自然科学基金(30070255)
- 作品数：51 被引量：270H指数：11
- 相关作者：丁斐顾晓松王晓冬张沛云刘梅更多>>
- 相关机构：南通医学院南通医学院附属医院南通大学更多>>
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- 人工组织神经移植物修复狗坐骨神经缺损的实验研究被引量：11
- 2002年
- 为了解复合型医用可降解材料制成的人工组织神经移植物辅加神经再生素修复狗坐骨神经缺损的可行性,将人工组织神经移植物连接在7只狗的坐骨神经缺损30mm处.以自体神经桥接的5只狗为对照组I;神经缺损的4只狗为对照组Ⅱ.经大体现察、免疫学检测、电生理学检测、荧光素示踪、形态学观察及计量学分析,结果表明,术后6个月,再生神经修复了坐骨神经的缺损,实验动物未出现排斥反应及明显炎症反应,实验组各项检测指标优于对照组,狗坐骨神经缺损30 mm经修复后,功能恢复效果明显.因此证明人工组织神经移植物对缺损的坐骨神经修复具有良好的桥梁作用和促神经生长的作用.
- 顾晓松张沛云王晓冬丁斐彭聿平成红兵
- 关键词：移植物缺损周围神经再生
- 中药神经再生素作用于背根神经节细胞过程中基因的表达变化被引量：7
- 2003年
- 目的 探讨中药神经再生素 (NRF)作用的分子生物学机制。 方法 采用半定量PCR方法 ,观察和比较NRF组、NGF组和空白对照组中生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、低分子量神经丝蛋白 (NF L)、翻译延伸因子 2A3 2(EF Ts ,RRAJ5 16 1)和锌指样蛋白DDP2 (F196 315 )基因水平的表达变化。 结果 在NRF作用于离体培养的DRG细胞过程中 ,GAP 4 3、NF L、2A3 2和DDP2基因表达在不同时间呈不同程度的上调。 结论 NRF促神经生长的作用与NGF相似 ,可作用于蛋白翻译水平 ,促进神经细胞的生长 ;作用于细胞骨架蛋白水平 ,维持神经细胞的形态和神经细胞正常生理活动 ;作用于神经细胞特异的蛋白水平 ,具有维持细胞生存及促进神经细胞突起生长的作用 ;还可以作用于反式因子调控水平 ,影响相关基因的表达 。
- 刘梅王林芳丁斐王东顾晓松
- 关键词：神经再生素背根神经节细胞分子生物学生长相关蛋白43
- 神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究被引量：10
- 2003年
- 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。
- 强亮顾星星丁斐
- 关键词：神经再生素U0126PCI2细胞信号传导途径
- 神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响被引量：28
- 2002年
- 目的 :观察神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法 :将新生 SD大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端 ,海绵内加入神经再生素 ,术后 3、6、1 2 h用 TUNEL法在光镜下检测 L4 -L5脊髓细胞凋亡情况 ,分别以神经生长因子和生理盐水作为阳性和阴性对照。结果 :新生大鼠在坐骨神经切断后脊髓细胞出现大量凋亡 ,神经再生素组凋亡细胞数量较生理盐水组显著减少 ( P<0 .0 1 ) ;神经再生素组与神经生长因子组之间凋亡细胞数量的差别无显著性意义 ( P>0 .0 5 )。结论
- 陈罡王晓冬张沛云丁斐
- 关键词：神经再生素新生大鼠坐骨神经脊髓细胞凋亡
- HRP逆行示踪对人工组织神经移植物辅加NRF修复大鼠坐骨神经缺损的评价被引量：3
- 2002年
- 目的 :用 HRP逆行示踪法评价人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的效果。方法 :壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维组成人工组织神经移植物并辅加神经再生素 ,修复大鼠的坐骨神经缺损 ( 10 mm)。术后 2 4周时 ,进行大鼠 HRP逆行示踪试验。结果 :脊髓及背根神经节中均出现数量不等的被 HRP标记的神经元胞体。结论 :人工组织神经移植物辅加神经再生素对缺损的神经修复具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。
- 张沛云王晓冬吕广明吴坚蔡云平
- 关键词：坐骨神经缺损人工组织神经移植物神经再生素ARP
- 周围神经43kD蛋白在损伤坐骨神经中的表达
- 2001年
- 目的 :探索SD大鼠损伤坐骨神经组织中 43kD蛋白的表达。方法 :采用周围神经 43kD蛋白单克隆抗体 ,以WesternBlot方法检测大鼠损伤坐骨神经中相应蛋白的表达情况。结果 :正常大鼠坐骨神经组织与大鼠损伤后 2周的坐骨神经远侧端组织 ,在 43kD处均有免疫反应阳性条带 ,在大鼠损伤后 2周的坐骨神经远侧端组织中阳性反应产物着色较深。结论 :大鼠坐骨神经组织中有 43kD蛋白的表达 ,而损伤神经远侧端 43kD蛋白表达增强。
- 何江虹丁斐张沛云顾晓松
- 关键词：周围神经免疫印迹动物实验坐骨神经损伤
- 人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的实验研究被引量：16
- 2002年
- 目的 用人工组织神经移植物辅加神经再生素 (NRF)桥接修复大鼠周围神经缺损。 方法 用壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维制成人工组织神经移植物 ,辅加促神经生长的中药有效组分NRF ,桥接大鼠坐骨神经缺损10mm。术后作足迹试验 ;2 4周时对再生神经进行电生理学测试、形态学观察和计量学统计。 结果 术后 2 4周内 ,动物未见炎症及排斥反应。实验组的再生神经在足迹试验、电生理学、形态学及计量学上优于硅胶管桥接组。结论 人工组织神经移植物辅加NRF与周围神经组织具有良好的生物相容性 ;
- 王晓冬顾晓松张沛云曹涌马红萍
- 关键词：人工组织神经移植物神经再生素周围神经再生周围神经缺损动物实验
- 神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究被引量：10
- 2003年
- 目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA ,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC 40s基因表达谱芯片杂交 ,芯片扫描、数据处理。结果 :实验组和对照组大脑皮层细胞出现 64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有 :钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因 ;下调基因有 :抑制细胞分裂因子等基因。结论 :神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞 。
- 丁斐顾星星王东顾晓松
- 关键词：神经再生素皮层细胞基因表达基因芯片
- 大鼠损伤神经组织中Tropic1808基因相关蛋白的亲和层析法纯化
- 2002年
- 目的 :纯化大鼠损伤坐骨神经组织中 Tropic180 8基因特异表达的蛋白。方法 :将 Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体与 CNBr- activated Sepharose 4 B交联 ,用亲和层析的方法 ,提取在大鼠损伤坐骨神经组织中Tropic180 8基因特异表达的蛋白 ,并将纯化的蛋白进行 SDS- PAGE分析。结果 :(1)经层析系统紫外检测 ,亲和层析后洗脱 ,在 2 80 nm波长处获得两个不同的紫外吸收峰。 (2 )亲和层析的洗脱液 ,经冷冻浓缩 ,SDS- PAGE分析 ,出现4 3.0 k Da、32 .0 k Da、31.0 k Da和 14 .4 k Da蛋白条带 ,其中在 32 .0 k Da的蛋白条带与预期的 Tropic180 8基因在组织中的编码蛋白基本相符 ,而 4 3.0 k Da、31.0 k Da、14 .4 k Da蛋白 ,预测为 Tropic 180 8基因在大鼠损伤坐骨神经组织中表达的相关蛋白。结论 :用亲和层析的方法 ,获得了大鼠损伤坐骨神经组织中 Tropic180 8基因特异表达的相关蛋白 。
- 姚登兵王云丹陈雪丁斐
- 关键词：TROPIC损伤坐骨神经相关蛋白单克隆抗体SDS-PAGE
- 人工组织神经移植物桥接狗缺损坐骨神经后腓肠肌内琥珀酸脱氢酶表达含量的变化被引量：2
- 2002年
- 目的 :了解人工组织神经移植物辅加神经再生素桥接狗坐骨神经缺损后相应腓肠肌形态与酶的变化。方法 :人工组织神经桥接修复狗的坐骨神经 30 mm缺损为实验组 ,自体神经桥接或神经缺损的为对照组 I或 II。术后 6个月时取腓肠肌 ,按 Nitro- BT法显示琥珀酸脱氢酶光镜标本。图像分析仪分析琥珀酸脱氢酶 (SDH)染色后灰度值及腓肠肌截面积。结果 :实验组腓肠肌 SDH的灰度值及截面积均与对照组 II有明显差别 ,而与对照组 I无明显差别。结论 :人工组织神经修复缺损神经后 ,重新支配靶器官 ,使腓肠肌萎缩明显减弱 ,琥珀酸脱氢酶活性的下降也明显减轻。
- 林巍巍张沛云王晓冬吴坚
- 关键词：神经缺损腓肠肌琥珀酸脱氢酶
