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人肝癌细胞2-DE实验技术条件优化: 2012年; 双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）是目前比较蛋白质组学研究中最常用蛋白质的技术,通过利用蛋白质的等电点与分子量特性将蛋白质分离,与质谱技术（mass spectrometry,MS）联用,已被广泛应用于分析细胞或组织样品中整体蛋白质表达的差异情况〔1-2〕。然而实验操作过程中,; 韦艳张海英梁钢; 关键词：双向凝胶电泳人肝癌细胞

表没食子儿茶素没食子酸酯体外代谢的方法研究被引量：1: 2011年; 目的研究体外代谢EGCG的方法,并用高效液相色谱法对EGCG及其产物进行测定。方法在适当的pH和温度下,在正常大鼠的肝脏匀浆加入底物S-腺苷蛋氨酸(SAM)和Mg2+,进行EGCG体外代谢,用高效液相色谱法检测EGCG及其代谢物。结果 EGCG可在体外大鼠肝匀浆作用下进行有效代谢,可用高效液相色谱法对EGCG及其代谢产物进行检测。结论这种体外代谢EGCG的方法简便灵敏,精密度高,可有效用于EGCG的体外代谢研究。; 廖作庄梁钢欧冰凝; 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯体外代谢高效液相色谱法

5-FU诱导人肝细胞癌MDR的比较蛋白质组学研究被引量：1: 2012年; 目的寻找与人肝细胞癌多药耐药相关的蛋白质分子,为进一步研究人肝细胞癌多药耐药机制提供依据。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞Bel-FU,MTT法检测Bel-FU的多药耐药性,双向凝胶电泳技术分析细胞Bel-7402与Bel-FU之间的差异表达蛋白,经MALDI-TOF/TOF质谱鉴定。Western blot验证2-DE及质谱的检测结果。结果与Bel-7402比较,Bel-FU中有24个蛋白表达上调,其中包括FAK、TM3、ORP150、CRT、hnRNP K、80K-H protein、EF-1-D、phosphoprotein等,12个蛋白表达下调。Western blot法检测到蛋白FAK、CRT在Bel-FU中高表达,与2-DE结果一致。结论通过建立人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU的2-DE图谱筛选了多药耐药相关的差异蛋白,为人肝细胞癌MDR的分子机制研究奠定了基础。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：肝细胞癌比较蛋白质组学双向凝胶电泳

槲皮素逆转人肝癌细胞MDR作用的研究被引量：9: 2012年; 目的:在基因转录水平上探讨槲皮素逆转人肝癌多药耐药(MDR)的作用机制。方法:采用体外培养人肝癌耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU,MTT法测定槲皮素的体外细胞毒性及浓度依赖的逆转耐药作用。实时定量PCR以及Westernblot检测槲皮素作用后细胞中基因mdr1、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、H-ras和P-糖蛋白(P-gp)的表达变化。结果:槲皮素对Bel-FU细胞的IC10和IC50分别为58.2、193.9μmol/L。16.5、33.0、49.5μmol/L的槲皮素对Bel-FU的逆转耐药倍数分别为1.14、1.68、2.38倍;槲皮素可下调耐药细胞中基因mdr1、MRP、GST-π、H-ras表达(P<0.05),下调倍数分别为0.38、0.27、0.36、0.42,而对TopoⅡα无影响(P>0.05)。槲皮素可下调P-gp蛋白在耐药细胞中的表达量(P<0.05)。结论:槲皮素可下调耐药细胞中耐药相关基因的表达量,从而逆转人肝癌细胞的多药耐药性。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：槲皮素 P糖蛋白多药耐药相关蛋白质类印迹法蛋白质

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广西省自然科学基金(0728113)