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湖南省科技计划项目(2010NK3042)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
刘臻
肖调义
张建设
鲁双庆
王赏初
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相关机构:
长沙学院
湖南农业大学
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发文基金:
湖南省高校科技成果产业化培育项目
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湖南省科技计划项目
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相关领域:
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农业科学
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生长激素
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毕赤酵母
机构
1篇
长沙学院
1篇
湖南农业大学
作者
1篇
谢帝芝
1篇
王赏初
1篇
鲁双庆
1篇
张建设
1篇
肖调义
1篇
刘臻
传媒
1篇
淡水渔业
年份
1篇
2011
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青鱼生长激素在毕赤酵母中的表达
被引量:4
2011年
根据GenBank数据库中登记的青鱼(Mylopharyngodon picens)生长激素(bcGH)基因序列(AF389238)设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素cDNA编码区,并通过定向插入含强启动子AOX I的表达载体pPIC3.5k、电击转入毕赤酵母GS115菌株、G418多克隆子筛选和测序验证等步骤进行了重组生长激素酵母菌诱导表达等相关实验,成功获得重组生长激素酵母菌(pPIC3.5k-bcGH重组酵母菌)。蛋白表达产物经SDS-PAGE和ELISA检测,在23 kD处发现一条与预期蛋白分子量大小一致的特异性条带,并且目的蛋白能与青鱼生长激素多克隆抗体特异性结合,说明bcGH在酵母胞内得到正确表达。表达条件优化过程中发现,诱导24 h已有重组蛋白表达,pH值4.5~7.0之间都能表达重组蛋白。在pH值6.5、0.5%甲醇、温度30℃和培养时间72 h的优化条件下,目的蛋白的表达量高达893 mg/L。
谢帝芝
刘臻
王赏初
张建设
肖调义
鲁双庆
关键词:
生长激素
毕赤酵母
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