教育部“春晖计划”(Z2005-2-71005)
- 作品数：6 被引量：38H指数：5
- 相关作者：巩振辉李大伟贺晓庆马继鹏罗德旭更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：教育部“春晖计划”国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农杆菌介导的NPKI基因转化辣椒的研究被引量：6
- 2008年
- 以3个辣椒（Capsicum annuum L.）品种为试材,探讨了通过农杆菌介导法将烟草NPKI（参与细胞周期调控的MAPKKK激酶）基因转化辣椒的适宜条件。结果表明,切取14 d苗龄子叶外植体,在MS无机盐成分＋B5有机成分＋0.5 mg/L IAA（吲哚乙酸）＋5.0 mg/L 6-BA（苄基氨基腺嘌呤）的琼脂培养基上预培养2 d后,浸没于农杆菌菌液中侵染8-10 min,共培养于MB（MS无机盐成分＋B5有机成分）＋0.5 mg/L IAA＋5.0 mg/L 6-BA上2 d后转移至延迟培养基MB＋0.5 mg/L IAA＋5.0 mg/L 6-BA＋250 mg/L Cef（头孢霉素）延迟选择2 d,随后转移至MB＋0.5 mg/L IAA＋5.0 mg/L 6-BA＋250 mg/L Cef＋50 mg/L Km（卡那霉素）进行选择培养是适宜的方法。将选择得到的抗性芽再生成苗。共获得抗性植株48株,PCR检测阳性植株17株,RT-PCR检测阳性植株14株。
- 谭洁巩振辉
- 关键词：辣椒农杆菌介导
- 利用mRNA差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因片断被引量：5
- 2008年
- 利用差异显示技术,以感病对照品种B27、中抗疫病品种A3、高抗疫病品种A11为试材,用辣椒疫霉菌诱导处理6叶期幼苗,进行接种前后基因差异表达分析。采用3条锚定引物5′dT12A/G/C 3′和20条随机引物(B0301-B0320)组合,进行反转录差异显示PCR,克隆并分析辣椒疫病抗性相关基因。共获得差异表达片段7条,经BLAST检索,发现T12C/B0312-251(Gen-Bank登录号EU280142)与粉蓝烟草的推测编码ml基因的部分mRNA有90%的同源性;T12C/B0312-248(GenBank登录号EU280143)与辣椒编码区序列ERD15 mRNA有99%的同源性;T12G/B0312-339(GenBank登录号EU280144)与番茄mRNA序列113946R克隆有92%的同源性,片段T12C/B0307-170,T12G/B0317-374,T12A/B0320-235,T12A/B0320-195未发现其与已报导的序列有同源性。该试验所得的差异片段推测为与辣椒疫病抗性相关的基因。
- 王永成巩振辉李大伟
- 关键词：辣椒疫病抗病基因MRNA差异显示
- 辣椒LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析被引量：6
- 2008年
- 【目的】克隆和分析抗、感疫病辣椒材料的抗病基因同源序列，为辣椒抗疫病相关基因的克隆奠定基础。【方法】根据番茄抗叶霉病基因Cf2和Cf9C端的LRR类保守结构域设计简并引物，对6个不同抗、感疫病的辣椒种质材料基因组DNA进行抗病基因同源序列的PCR扩增。【结果】得到27个抗病基因同源序列（RGAs），其在GenBank中的登录号为EF064260～EF064286。其中，21个RGAs与番茄抗叶霉病基因Cf2和Cf9有较高的相似性。感病材料的辣椒基因组中也存在抗疫病相关RGAs。【结论】上述21个RGAs可能与辣椒抗疫病作用有关，可为辣椒抗疫病相关基因的克隆提供依据。
- 马维巩振辉李大伟贾庆利
- 关键词：辣椒LRR
- 不同辣椒材料离体再生及其影响因素的研究被引量：8
- 2007年
- 以8个辣椒（Capsicum annuum L.）纯系为材料,对不同材料、外植体种类和激素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了研究.结果表明,较高的6-BA/IAA值有利于辣椒外植体的分化再生,而6-BA/IAA值较低则适合于再生芽的伸长;不同辣椒材料的再生能力差别较大;辣椒带柄子叶再生能力比下胚轴强,是较好的外植体材料;12～16 d苗龄的外植体分化频率较高;在供试的8个辣椒材料中‘2096’、‘B4’和‘B7’的再生能力较强.高频率的不定芽分化培养基为MB（MS无机成分＋B5有机成分）＋0.8 mg/L IAA＋5.0 mg/L 6-BA＋4.0 mg/L Ag-NO3;不定芽伸长的培养基为MB＋0.8 mg/L IAA＋2.0 mg/L 6-BA＋2.0 mg/L GA3＋4.0 mg/L AgNO3;高效生根诱导培养基为MB＋0.2 mg/L IAA＋0.1 mg/L NAA.
- 贺晓庆巩振辉
- 关键词：辣椒离体培养植株再生
- 利用cDNA-AFLP研究辣椒疫病抗性相关基因
- 利用cDNA-AFLP技术分离到10个与辣椒抗疫病反应相关的TDFs(transcript-derived-fragments)。Blastn结果表明:4个TDFs与抗病信号传导途径中的一些酶类基因同源性较高,2个TDF...
- 李大伟巩振辉贾庆利
- 关键词：辣椒辣椒疫病抗病基因CDNA-AFLP
- 文献传递
- 辣椒疫病抗病性分子鉴定技术研究被引量：8
- 2008年
- 根据辣椒疫霉菌(Phytophora capsiciLeonian)核糖体(Ribosome)基因及其转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)序列设计两对引物,确定其中一对用于辣椒疫病抗病性的分子检测。用不同的辣椒品种进行接种,并设置不同的采样时间和部位,提取辣椒基因组和侵染到植株中疫霉菌的DNA,扩增后者的rDNA及其ITS序列。试验表明,在接种后24 h和48 h不能从辣椒叶片中检测到疫霉菌,而接种后24 h可从感病辣椒品种茎中检测到。接种后48 h均能从感病、抗病辣椒品种的茎中检测到疫霉菌,并且感病品种中疫霉菌的DNA的扩增量为100 ng,抗病品种中的为20 ng,前者是后者的5倍;辣椒品种N3中疫霉菌的DNA扩增量为77 ng,介于感病和抗病品种之间,更接近前者,因此该品种是感病的。
- 罗德旭巩振辉李大伟
- 关键词：辣椒辣椒疫霉菌PCR抗病性分子鉴定
- 辣椒细胞质雄性不育相关线粒体基因片段的克隆及序列分析被引量：8
- 2008年
- 【目的】探究3种不同类型辣椒细胞质雄性不育材料的不育分子机理,寻找与雄性不育相关的基因。【方法】采用高盐-蛋白酶K法提取辣椒细胞质雄性不育系及其保持系的绿色叶片线粒体DNA(mtDNA),根据已报道的辣椒细胞质雄性不育相关基因orf456序列设计特异引物,利用PCR反应,从3种不同类型辣椒细胞质雄性不育材料线粒体基因组中均扩增出330 bp左右大小的条带。【结果】经克隆测序及序列分析表明,3种不同类型辣椒细胞质雄性不育材料所获片段序列完全一致,大小为330 bp,命名为CMS330,与orf456核酸序列同源性达99%。【结论】3种不同类型辣椒细胞质雄性不育材料具有相似的不育分子机理。
- 马继鹏巩振辉黄炜
- 关键词：辣椒细胞质雄性不育线粒体DNA
