广东省教育部产学研结合项目(2011B090400151)
- 作品数：6 被引量：30H指数：3
- 相关作者：丁贤林黑着孙威文周世宁殷波更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院南海水产研究所中山大学中国科学院更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 饲料中不同蛋白含量对斑节对虾幼虾生长及消化酶的影响被引量：17
- 2012年
- 选用鱼粉、豆粕和大豆浓缩蛋白为主要蛋白源,配置6个蛋白质水平梯度(36%、38%、40%、42%、44%、46%)的饲料,对斑节对虾幼虾(1.03±0.02 g)进行56 d养殖实验,研究饲料中不同蛋白含量对斑节对虾幼虾生长及消化酶活性的影响。结果表明,(1)摄食40%蛋白饲料的斑节对虾的增重率(417.35%)和特定生长率(2.93%·d-1)获得最大值并显著高于36%蛋白饲料组(P<0.05),但与其它各组无显著差异。饲料蛋白水平在38%时的饲料系数(1.88)最低且与44%和46%蛋白饲料组存在显著性差异(P<0.05)。(2)虾体蛋白含量在44%饲料蛋白组最高,且显著高于36%、38%和42%组(P<0.05)。(3)斑节对虾的蛋白质表观消化率在42%蛋白组最高,44%和46%蛋白饲料组的蛋白质效率显著低于36%～42%蛋白饲料组(P<0.05)。(4)随着蛋白水平的提高,斑节对虾的蛋白酶活性呈现由高到低波动的趋势;淀粉酶活性随着饲料蛋白含量的升高而呈下降趋势,胃淀粉酶活性在38%～42%蛋白饲料组显著高于36%蛋白饲料组(P<0.05),肠淀粉酶活性在42%蛋白饲料组显著高于其它各组(P<0.05)。通过饲料中蛋白质含量与增重率的回归分析,斑节对虾幼虾饲料蛋白的适宜含量为39.70%。
- 张加润黄忠林黑着牛津吕国敏黄建华陈义方丁贤
- 关键词：斑节对虾幼虾消化酶活性
- 海洋微生物信号降解酶基因aiiA克隆与表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 根据已知的微生物信号降解酶基因aiiA的序列设计、合成特异性引物探针,以从海洋分离的微生物ZD02的基因组为模板,PCR扩增编码蛋白aiiA信号降解酶的基因aiiA序列,产物经PCR验证后用于构建克隆载体pMD18-ZD02aiiA,并以此克隆载体为模板,以带酶切位点的引物扩增基因,经BamHI和EcoRI双酶切后将其插入表达载体pET-17b,构建原核表达质粒pET-ZD02aiiA。经酶切、PCR鉴定及序列测定等,结果表明:克隆基因已正确插入到载体的多克隆位点,序列和读码框正确,为海洋微生物ZD02信号降解酶基因的体外重组和诱导表达研究打下基础。
- 丁贤殷波张善夫唐维可孙威文周世宁
- 关键词：细菌克隆
- 芽孢杆菌对草鱼消化酶活性及血清生化指标的影响被引量：3
- 2012年
- 探讨芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对质量为30.68(±2.34)g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道消化酶活性、血清生化指标的影响。试验随机分为5组,分别饲喂添加0、0.5、1.0、2.0、4.0 g/kg益生菌(109CFU/g)的饲料养殖4周,在14 d和28 d时取样。结果显示,试验组草鱼肠道蛋白酶活性显著大于对照组,各试验组之间差异不显著;而对淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶活性影响不大。试验组草鱼血清酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著大于对照组;溶菌(UL)活力在14 d时提高不显著,在28 d时活力显著提高;试验组草鱼总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化物酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化指标显著大于对照组,除个别组外,各试验组之间差异不显著。结果表明芽孢杆菌可以提高草鱼机体消化酶活性、改善理化指标和提高抗氧化能力,增强机体免疫机能。
- 丁贤唐维可张善夫李卓佳林黑着杨铿
- 关键词：草鱼消化酶血清生化指标芽孢杆菌
- 细菌群体感应淬灭的几种调控机制及其潜在应用被引量：7
- 2013年
- 群体感应(quorum sensing,QS)作为一种调控机制,细菌通过感知细胞外环境中的信号分子浓度变化调控调节着生物发光、质粒转移、抗生素合成、生物膜形成及毒力因子表达等多种重要的生物学功能,协调细菌群体行为以适应环境变化。文章简要综述细菌细胞之间的群体感应功能及其几种主要淬灭调控机制,为促进基于QS为靶标的生态防控病害新技术构建提供参考,为QS相关研究及具有潜在应用价值的QS抑制剂开发提供思路。
- 丁贤孙威文殷波刘广锋周世宁
- 关键词：细菌淬灭
- 枯草芽孢杆菌SS6N-酰基高丝氨酸内酯酶基因的克隆表达及其酶学特性被引量：1
- 2015年
- 【目的】从一株具有细菌群体感应(Quorum Sensing,QS)信号分子淬灭活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SS6中扩增N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,Aii A)基因aii ASS6并异源表达,研究此信号降解酶的酶学特性。【方法】设计特异性引物,从B.subtilis SS6中克隆N-酰基高丝氨酸内酯酶基因aii ASS6,测序并进行生物信息学分析;将此基因克隆到表达载体p ET28(a),构建重组菌株并提纯目的蛋白Aii ASS6;然后用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析目的蛋白Aii ASS6降解QS信号分子N-(3-Oxooctanoyl)-L-homoserine lactone(OOHL)的酶学特性。【结果】克隆得到基因片段,命名为aii ASS6(Gen Bank:KP125494),其编码一条含有297氨基酸残基的多肽,用p ET28(a)成功构建重组质粒p ET28-aii ASS6。生物信息学分析表明,Aii ASS6的氨基酸序列含有N-酰基高丝氨酸内酯酶典型的"HXHXDH"基序和194位的Tyr残基。在Escherichia coli BL21(DE3)中异源表达Aii ASS6,用Ni柱纯化后,Aii ASS6含量达2.76 mg/m L。HPLC检测结果表明Aii ASS6对OOHL具有很强的催化活性及耐热性,Km和Vmax分别为0.998 mmol/L和22.3 U/mg,最适pH为7.6,最适温度范围为50-90℃;此酶在4℃保存3个月后其残余活性仍达到86%,表现出较强的稳定性。【结论】从B.subtilis SS6中获得的QS淬灭酶Aii ASS6表现出降解QS信号分子的高活性,其酶学特性表明它具有作为微生物制剂防控植物或水产养殖中基于QS调控的病原菌毒力的应用潜力。
- 张盼丁贤李来好陆勇军殷波
- 关键词：酶学特性高效液相色谱
- 海洋微生物ZD02信号降解酶基因aiiA克隆及其生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 根据细菌群体感应信号降解酶(AiiA)基因设计简并引物,从海洋微生物ZD02基因组中扩增编码AiiA的基因aiiA,筛选其阳性克隆,测序后分析其基因序列。结果表明:筛选到的阳性克隆ZD02-aiiA序列全长753bp(Genbank登录号:KC756214),存在一个开放阅读框(ORF),编码由250个氨基酸残基组成的多肽,预测分子量为28.1kDa,蛋白等电点为4.78。由该序列推导得到的氨基酸残基序列含有一个保守结构域(Lactamase-B)(34AA～235AA),并预测了AiiA的三级结构。以上研究为该序列的重组表达及其相关活性研究奠定了基础。
- 丁贤孙威文张殿昌翁雄林黑着周世宁
- 关键词：海洋细菌AIIA基因
