广东省自然科学基金(10151006001000012)
- 作品数：11 被引量：40H指数：4
- 相关作者：刘朝晖梁志科范伟关丽君马碧蔓更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性阻塞性肺疾病骨骼肌与泛素-蛋白酶体途径降解的研究进展被引量：2
- 2013年
- 慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种常见的慢性呼吸系统疾病,也是一种具有气流受限特征的肺部疾病,气流受限不完全可逆,呈进行性发展。2002年世界卫生组织（WHO）公布的资料显示,COPD是目前世界上死亡的第5位病因[1]。COPD患者由于长期处于不同程度的缺氧状态下,不仅肺功能呈进行的衰退,
- 关丽君刘朝晖
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病泛素-蛋白酶体途径骨骼肌慢性呼吸系统疾病降解气流受限
- 白介素15与慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌降解的相关性研究
- 2013年
- 目的 研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型骨骼肌降解途径——泛素-蛋白酶体途径与白介素15（IL-15）的相关关系,为有效防治COPD患者骨骼肌蛋白高分解提供理论与依据.方法 成年雄性SD大鼠45只,分为模型组30只,健康组15只,采用反复熏香烟加气管内注入脂多糖法复制COPD大鼠动物模型.实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中E2-14K、MAFbx、Ub基因和蛋白表达.ELISA法检测大鼠血清、膈肌、腓肠和肋间肌中IL-15和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量.结果 COPD模型大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中E2 14K、MAFbx、Ub基因和蛋白表达分别较健康组升高.COPD模型组大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15、TNF-α的水平较健康组升高.大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15和TNF-α水平呈正相关（血清r=0.75;膈肌r =0.81;腓肠肌r=0.82;肋间肌r=0.78,P值均＜0.05）.膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15均与E2-14K、MAFbx、Ub相对表达量呈正相关（膈肌r=0.88、r=0.86、r=0.87；腓肠肌r=0.85、r=0.87、r=0.76;肋间肌r=0.85、r =0.80、r=0.84,P值均＜0.05）.大鼠造模结束后体质量净增长与血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15呈负相关（血清r=-0.90,膈肌r=-0.85,腓肠肌r=-0.82,肋间肌r=-0.82,P＜0.05）.结论 在COPD模型大鼠中,IL-15可能通过TNF-α共同作用于泛素-蛋白酶体途径影响骨骼肌降解的作用.
- 关丽君刘朝晖梁志科马碧蔓曾祥富
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病泛素-蛋白酶体途径白介素15肿瘤坏死因子Α
- 蛋白酶体抑制剂MG-132对脂多糖致急性肺损伤大鼠的抗炎作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对急性肺损伤(ALI)大鼠的抗炎作用机制。方法将雄性SD大鼠54只随机分为对照组、ALI组和MG-132组,每组18只。对照组尾静脉注入生理盐水,ALI组、MG-132组尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg,MG-132组于实验前30 min腹腔注射MG-132 10 mg/kg。三组动物在注射生理盐水或LPS后2、4、8 h各随机处死6只,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿重/干重比值(W/D),酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞间粘附分子1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,Western blot法测定肺组织核因子κB(NF-κB)P65蛋白的表达。结果 ALI组大鼠病理切片可见明显肺组织充血、水肿、大量炎性细胞浸润等典型ALI表现,MG-132组病理学损伤明显减轻。与对照组比较,ALI组大鼠2、4、8 h肺组织W/D比值及BALF中ICAM-1、TNF-α的表达、肺组织NF-κB P65蛋白的表达均明显升高(P<0.05),MG-132组大鼠2、4、8 h肺组织W/D比值及BALF中ICAM-1、TNF-α的表达、肺组织NF-κB P65蛋白的表达均较ALI组明显降低(P<0.05)。肺组织NF-κB P65蛋白的表达与ICAM-1、TNF-α的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论 MG-132可改善内毒素性急性肺损伤炎症反应,其抗炎作用可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关。
- 孟文刘朝晖范伟梁志科蔡广平
- 关键词：急性肺损伤MG-132细胞间粘附分子1核因子KB
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌中NF-κB通路的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究COPD大鼠骨骼中磷酸化NF-κB通路蛋白的表达情况及意义。方法:采用气管内滴入脂多糖+反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Western blot方法测定大鼠骨骼肌内磷酸化NF-κB蛋白的表达,ELISA法测定大鼠血清及膈肌中IL-1β的表达。结果:Western blot结果显示,COPD大鼠骨骼肌中磷酸化NF-κB蛋白的表达均较对照组明显升高(P<0.01);ELISA结果显示,IL-1β在血清及骨骼肌中的表达均升高(P<0.01);NF-κB与IL-1β水平呈显著正相关(r=0.55,P<0.01)。结论:COPD大鼠骨骼肌中NF-κB表达上调,IL-1β可激活骨骼肌中NF-κB通路。
- 范伟刘朝晖张溪林梁志科曾祥富
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病骨骼肌NF-ΚBIL-1Β
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌萎缩信号通路与白细胞介素17相关性的研究被引量：8
- 2011年
- 目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌萎缩信号通路——泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx和MuRF-1蛋白表达及核转录因子κB(NF-κB)p50表达情况,以及前炎症因子白细胞介素17(IL-17)在大鼠血清及膈肌中的表达,探讨膈肌萎缩的可能调控机制。方法采用气管内滴入脂多糖+反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Western blot法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50表达,ELISA法测定大鼠血清及膈肌中IL-17的表达。结果 Westernblot结果显示COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50蛋白的表达均较对照组明显升高(0.96±0.12比0.53±0.09,0.99±0.10比0.53±0.08,0.95±0.08比0.51±0.16,1.11±0.10比0.64±0.50,P均<0.01)。ELISA结果显示IL-17在血清及膈肌中的表达均升高(P均<0.01)。NF-κB p50与E2-14K、MAFbx、MuRF-1水平呈显著正相关(r值分别为0.82、0.92、0.86,P均<0.01);血清IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(r值分别为0.94、0.90、0.85、0.84及0.79,P均<0.01);膈肌IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(r值分别为0.88、0.90、0.72、0.86及0.80,P均<0.01);血清IL-17与膈肌IL-17呈显著正相关(r=0.84,P<0.01)。结论 COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路与NF-κB通路表达上调可能是导致膈肌萎缩的主要原因之一,IL-17可能参与了膈肌萎缩的调控。
- 范伟刘朝晖张溪林梁志科曾祥富
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病膈肌泛素-蛋白酶体通路白细胞介素17
- COPD大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体降解通路与IL-10相关性的研究被引量：1
- 2016年
- 目的：研究 COPD 大鼠模型的骨骼肌泛素（Ub）-蛋白酶体降解途径中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达,肿瘤坏死因子α（TNF-α）和炎症抑制因子 IL-10在大鼠血清和骨骼肌中含量变化,探讨 IL-10在 COPD 骨骼肌蛋白高分解过程中的作用及调控机制。方法成年雄性 SD 大鼠45只,其中分为模型组30只、对照组15只,采用反复熏香烟＋气管内注入脂多糖法复制 COPD 大鼠动物模型。蛋白质印迹法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达。用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中 IL-10和 TNF-α的含量。结果模型组膈肌、肋间肌、腓肠肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白的相对表达量显著增加。在模型组中,血清和骨骼肌肌内 TNF-α较对照组显著升高,IL-10表达均下降[血清（44.68±8.67）vs （75.96±10.59）,膈肌（50.55±7.41）vs （80.06±9.22）,肋间肌（47.47±8.98）vs （78.10±7.21）,腓肠肌（48.60±10.88）vs （76.77±8.92）,P 〈0.01]。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10和 TNF-α水平呈负相关（血清 r =-0.67,膈肌 r =-0.78,肋间肌 r =-0.80,腓肠肌 r =-0.77,P 〈0.05）。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10都与中性粒细胞百分比、E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白相对表达量呈负相关（血清 r =-0.80、r =-0.73、r =-0.69、r =-0.81；膈肌 r =-0.83、r =-0.81、r =-0.75、r =-0.79；肋间肌 r =-0.81、r =-0.80、r =-0.74、r =-0.54；腓肠肌 r =-0.74、r =-0.69、r =-0.71、r =-0.62,P 〈0.05）。血清 IL-10与骨骼肌IL-10呈显著正相关（膈肌 r =0.83、肋间肌 r =0.80、腓肠肌 r =0.73,P 〈0.01）。结论 IL-10的下调在 COPD 炎症中起重要作用,可能参与骨骼肌 Ub-蛋白酶体降解途径降解机制的调控。
- 汪新龙刘朝晖梁志科范伟关丽君马碧蔓
- 关键词：骨骼肌泛素-蛋白酶体通路白介素-10
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠模型中骨骼肌蛋白降解机制的研究被引量：5
- 2011年
- 目的研究慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）大鼠模型的骨骼肌蛋白降解机制，为有效防治COPD患者骨骼肌蛋白高分解，功能障碍等难题提供科学理论和依据。方法成年雄性SD大鼠30只，分为模型组18只，对照组12只，采用反复熏香烟和气管内注入脂多糖复制COPD大鼠模型。酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清和膈肌组织中的白介素6（IL-6），肿瘤坏死因子a（TNF—α ），γ干扰素（IFN- γ）等含量。蛋白免疫印迹法测定大鼠膈肌和腓肠肌内的E214K、MAFbx、MuRF-1的蛋白表达。结果在模型组中，血清和膈肌内的IL-6、TNF-a均较对照组显著升高，IFN- γ则较对照组显著降低。Western blot的结果显示：膈肌组织中E2—14K、MAFbx、MuRF-1均较对照组表达明显增强（各蛋白的相对表达量分别为0．96±0．12VS0．53±0．09、0．99±0．10VS0．53±0．08、0．95±0．08VS0．51±0．16，P〈0．01）。腓肠肌中E214K、MAFbx、MuRF-1亦较对照组表达增强（各蛋白的相对表达量分别为0．98±0．06VS0．83±0．05、1．00±0．04VS0．81±0．05、0．92±0．05VS0．71±0．05，P〈0．05）。体质量与TNF—α呈显著负相关（血清r=-0．84，膈肌r=-0．75，P值均〈0．01），与IFN-γ呈正相关（血清r=-0．71，膈肌r=-0．69，P值均〈0．01）；中性粒细胞百分比与IL-6呈正相关（血清r=0．82，膈肌r=0．91，P值均〈0．01）；膈肌组织中，IL-6、TNF—α的水平与膈肌的E2—14K、MAFbx、MuRF-1灰度值呈显著正相关，相关系数分别为r=0．86、r=0．94、r=0．89，P〈0．01和r=0．84、r=0．83、r=0．84，P〈0．01；IFN-γ与E2—14K、MAFbx、MuRF-1灰度值呈显著负相关，相关系数为r=0．81、r=0．80、r=0．78，P〈0．01。结论在COPD大鼠模型中，炎症因子、免疫调节因子的表达失衡和骨骼肌内泛素及泛素化蛋白的过度表达可能是引起骨骼肌蛋白降解加快的重�
- 曾祥富刘朝晖梁志科范伟
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病骨骼肌蛋白降解白介素6肿瘤坏死因子ΑΓ干扰素
- 蛋白酶体抑制剂MG-132抑制慢性阻塞性肺疾病大鼠模型膈肌萎缩的研究被引量：6
- 2013年
- 目的研究蛋白酶体抑制剂MG-132抑制烟草烟雾所致慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠模型骨骼肌萎缩的可能机制。方法采用反复烟草烟雾暴露联合气管内注入脂多糖法成功制备成年雄性sD大鼠慢阻肺模型，分为非十预组、高剂量组（MG-132 0．1mg·kg^-1·d^-1）和低剂量组（MG-1320．05mg·kg^-1·d^-1），每组12只，另设对照组。各组分别于实验1周和4周处死6只大鼠，分离大鼠膈肌并称重，采用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清和膈肌中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的表达，逆转录-PCR法和Western blot法检测大鼠膈肌内的肌萎缩F—box蛋白（MAFbx）、核因子-κB p65和抑制性因子κB—α（IKB-α）mRNA和蛋白表达。多组间比较采用方差分析，两组问比较采用t检验，相关性检验采用Pearson直线相关性分析。结果实验1周和4周非干预组[（0．83±0．09）mg和（1．01±0．06）mg]、高剂量组[（0．85±0．02）mg和（1．11±0．06）mg]及低剂量组[（0．83±0．03）mg和（1．04±0．02）mg]大鼠的膈肌重量均低于对照组[（0．99±0．06）mg和（1．20±0．04）mg]，高剂量组和低剂量组大鼠膈肌重量下降程度均小于非干预组，高剂量组干预4周时更明显；实验4周时在高剂量组和低剂量组膈肌中TNF-α含量[（106±8）ng／L和（122±7）ng／L]显著低于非干预组[（143±24）ng／L]，高剂量组膈肌中核因子-κBp65和MAFbx蛋白表达水平（1．13±0．04和1．27±0．05）及mRNA含量（2．17±0．42和1．74±0．14）显著低于非干预组（1．32±0．04和1．44±0．07及2．81±0．31和4．87±0．34），IKB—α基因和蛋白表达水平（0．96±0．08和0．83±0．06）显著高于非干预组（0．25±0．02和0．58±0．06），差异均有统计学意义（t值为1．57—24．9，P〈0．05）。各组大鼠血清和膈肌中TNF-α表达水平与膈肌中核因子-κBp65蛋白和mRNA表达水平呈显著正相�
- 马碧蔓刘朝晖梁志科关丽君汪新龙
- 关键词：呼吸肌蛋白酶体抑制剂
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症与白细胞介素10的相关性研究被引量：13
- 2014年
- 目的研究慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠模型中白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子ɑ(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)在血清和肺组织中的表达,探讨IL-10在慢阻肺气道炎症中的作用及调控机制。方法成年雄性SD大鼠45只,分为模型组30只,对照组15只,采用反复熏香烟+气管内注入脂多糖法建立慢阻肺大鼠模型。ELISA法检测大鼠血清、肺组织中IL-10、TNF-ɑ和IFN-γ的表达。结果模型组血清和肺组织内TNF-α较对照组显著升高,IFN-γ、IL-10[血清(44.68±8.67)ng/L比(75.96±10.59)ng/L,肺组织(64.55±9.03)ng/L比(94.06±8.71)ng/L,P均<0.01]表达均下降。IL-10和TNF-ɑ水平呈负相关(血清r=-0.67,肺组织r=-0.80,P<0.01)。IL-10和IFN-γ水平呈正相关(血清r=0.64,肺组织r=0.72,P<0.01)。结论 IL-10的下调在慢阻肺大鼠气道炎症中起重要的调控作用。
- 汪新龙刘朝晖梁志科范伟马碧蔓关丽君
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病气道炎症白细胞介素10肿瘤坏死因子ΑΓ-干扰素
- 地塞米松对COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路调控机制的研究
- 2012年
- 目的:探讨地塞米松对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白表达的影响,分析其调控机制。方法:SD大鼠42只,随机分为对照组13只、模型组15只及干预组14只。采用气管内注入脂多糖加反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。蛋白免疫印记方法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1的表达。酶联免疫吸附法测定大鼠血清及膈肌中的TNF-α水平。分析TNF-α及与E2-14K、MAFbx、MuRF-1的相关性。结果:成功建立COPD大鼠模型;COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白的表达均较对照组明显升高(P<0.01),干预组膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1较模型组降低(P<0.01);TNF-α水平与E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(P<0.01)。结论:COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路的表达与TNF-α水平有关,地塞米松降低COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体表达可能与下调TNF-α的抗炎作用有关。
- 范伟刘朝晖张溪林梁志科曾祥富
- 关键词：膈肌泛素-蛋白酶体通路肿瘤坏死因子-Α
