上海市自然科学基金(08ZR1407300)
- 作品数：5 被引量：38H指数：4
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- 壬基酚对斑马鱼精巢组织及性激素合成酶基因表达的影响被引量：17
- 2011年
- 壬基酚(NP)是广泛存在于水体中的环境内分泌干扰物,会影响鱼类的生殖和发育.为了解NP影响鱼类精巢发育的分子机制,将成年雄性斑马鱼(Danio rerio)暴露于不同浓度(0、125、250、500μg·L-1)NP下21d,用常规组织学方法研究试验鱼精巢组织结构的变化,并用荧光定量PCR(QRT-PCR)方法检测试验鱼精巢性激素合成酶及雌、雄激素受体(ERα、AR)基因的表达.结果表明,暴露于250μg·L-1NP的斑马鱼精巢内精子及精小囊的数目减少,非细胞区域增加;500μg·L-1NP组斑马鱼生精小管内精子凝集于管腔中央.250μg·L-1NP可导致精巢CYP17mRNA的表达量显著下调,125μg·L-1NP可导致CYP11B mRNA的表达量显著下调,并呈现出明显的负剂量-效应关系.但是,NP对精巢AR mRNA的表达无明显影响,精巢中CYP19A mRNA及ERαmRNA的表达与NP暴露浓度之间呈正剂量-效应关系,125μg·L-1NP即可显著上调CYP19A mRNA及ERαmRNA的表达.NP可通过抑制精巢中雄激素合成相关酶基因的表达影响精巢发育,同时可诱导精巢内源雌激素合成和雌激素受体的表达,提高雌激素效应.
- 刘晓丽汪奇贾林芝周忠良
- 关键词：壬基酚CYP17
- 芳香化酶抑制剂对暗纹东方鲀CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分化的影响被引量：11
- 2013年
- 采用组织学和分子生物学方法,研究了投喂芳香化酶抑制剂来曲唑(LE)后暗纹东方鲀(Takifugu obscures)初孵仔鱼CYP19A、DMRT1基因表达以及性腺的组织学变化,以期进一步了解P450芳香化酶(P450arom)在鱼类早期性别分化过程中的作用。RT-PCR结果显示,对照组样品CYP19A和DMRT1表达显示性二态,雌性表达CYP19A基因,雄性表达DMRT1基因。LE处理组在性别分化期间,雄性样品单一表达DMRT1,雌性样品则同时表达CYP19A和DMRT1。qRT-PCR结果显示:LE处理组雌性仔鱼CYP19A基因表达被显著抑;虽然在仔鱼出膜后22d(dph)的表达水平高于9 dph,但仅为同日对照组的2.11%。LE处理组雌性样品22 dph时DMRT1基因表达量上调,至150 dph时达对照组雄性水平。55 dph的性腺组织学结果表明,LE处理可导致暗纹东方鲀稚鱼原始卵巢退化,并向功能性精巢发育。150 dph的LE处理组性腺均为精巢,并与对照组精巢发育同步。结论认为,暗纹东方鲀性腺分化期间P450arom是卵巢形成和维持发育所必须的,抑制P450arom活性可导致雌性暗纹东方鲀发生雄性化逆转。
- 黄波杨小玉戴奇汪奇云丹周忠良
- 关键词：暗纹东方鲀性别分化DMRT1
- 来曲唑对暗纹东方鲀性腺分化及相关基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 为了解雌激素在鱼类雌性性别分化中的作用,在克隆暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)性腺CYP19A和DMRT1基因部分序列基础上,采用不同浓度芳香化酶抑制剂来曲唑(letrozole,LE)(0、25、125、625、3 125μg/L)处理暗纹东方鲀初孵仔鱼,每个平行组各20尾鱼,观察CYP19A和DMRT1基因的表达情况和组织学变化。RT-PCR结果显示:25μg/L LE实验组中样本CYP19A和DMRT1表达水平与对照组相比无显著差异;LE 125μg/L以上各浓度组中约30%的样本同时表达CYP19A和DMRT1基因,且随着LE浓度增加,CYP19A表达量下调,而DMRT1表达量上调;组织学研究表明,125μg/L LE以上各实验组样本中可见由雌性向雄性转变的间性体性腺。孵化后56 d,125μg/L LE实验组样本中约有20%显示雌性;625μg/L LE实验组样本显示表型雄性和间性体,未见雌性;最高浓度3 125μg/L LE组中所有样本均显示表型雄性,CYP19A和DMRT1基因表达与对照组雄性相同。上述结果说明,抑制内源雌激素合成可使暗纹东方鲀仔稚鱼CYP19A基因表达下调,同时DMRT1基因表达上调,并发生雄性化性逆转。
- 汪奇郭正龙李延伸云丹黄波周忠良
- 关键词：性别分化暗纹东方鲀来曲唑
- 苯并(a)芘与壬基酚对河川沙塘鳢的联合毒性研究被引量：4
- 2010年
- 为探究环境内分泌干扰物联合毒性对鱼类的影响,选取苯并芘(benzo[a]pyrene,BaP)及壬基酚(4-nonly-phenol,NP)对河川沙塘鳢Odontobutis potamophila进行单独和联合毒性研究。研究了NP和BaP对河川沙塘鳢血清雌二醇(E2)、卵黄蛋白原(Vtg)、血清谷草转氨酶(GOT)以及肝脏7-乙氧基-3-异吩噁唑酮-脱乙基酶(7-ethoxyresou-fin-O-deethylase,EROD)和超氧化物岐化酶(SOD)的影响。结果表明,BaP单一暴露时,随着BaP剂量浓度的升高雌鱼血清E2含量下降,肝脏EROD活性升高;25mg/kg BaP试验组雌鱼肝脏EROD活性显著高于对照组;肝脏SOD和血清GOT活性与对照无差异;NP和BaP联合暴露中,200mg/kg NP+10mg/kg BaP、200mg/kg NP+2mg/kg BaP试验组雄性个体血清Vtg平均含量比200mg/kg NP组低50%左右,而血清E2含量显著高于对照组,肝脏EROD酶活性、血清GOT活性变化与BaP剂量浓度呈正相关,而肝脏SOD酶活性则与BaP剂量浓度呈负相关;200mg/kg NP+25mg/kg BaP试验组肝脏SOD活性显著低于对照组,而血清GOT活性则显著高于对照组。显示NP和BaP联合作用时BaP可拮抗NP对雄鱼Vtg的诱导效应;200mg/kg NP+2mg/kg BaP可导致河川沙塘鳢肝脏肝细胞损伤。
- 赵莉吴鹰周忠良贾林芝
- 关键词：河川沙塘鳢壬基酚联合毒性
- 双酚A对斑马鱼精巢性激素生成酶基因表达的影响被引量：7
- 2014年
- 为了解环境雌激素对鱼类精巢发育的影响,将成年雄性斑马鱼(Danio rerio)暴露于不同浓度双酚A(0、500、1 000、2 000、4 000μg·L-1)下21 d,并在此基础上,进一步研究了暴露在相同浓度(BPA2 000μg·L-1)不同暴露时间下各基因表达的动力学模式。用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测试验鱼精巢性激素合成相关细胞色素P450酶类基因(CYP17、CYP11B和CYP19A)以及雌、雄激素受体和促卵泡激素受体(ERα、ERβ、AR和FSHR)基因的表达,用常规组织学方法研究试验鱼精巢结构的变化。结果表明,BPA促进了精巢内源雌激素合成相关酶类基因CYP19A和雌激素受体ERαmRNA、ERβmRNA的表达,且BPA浓度为2 000μg·L-1时3者的表达量显著上调,同时随着暴露时间的延长,具有明显的时间累积效应。1 000μg·L-1BPA可导致斑马鱼精巢CYP17 mRNA的表达量显著下调,BPA2 000μg·L-1暴露12 d引起了CYP11B mRNA表达下调,而随着暴露时间的延长有所回升,但它对精巢AR mRNA的表达却无明显影响。同时,BPA 500μg·L-1引起了FSHR基因的显著上调,在时间动态学上,呈上升趋势。在组织学上,2 000μg·L-1BPA引起斑马鱼精巢生精小管内精子浓缩严重,精原细胞(Sg)和精母细胞(PS和SS)数目都有所减少,BPA 4 000μg·L-1组斑马鱼精巢退化。因此,BPA可诱导精巢内源雌激素合成和雌激素受体的表达,提高雌激素效应,通过抑制CYP17基因的表达,一定程度上抑制雄激素的合成,从而引起斑马鱼精巢组织的破坏。同时,据实验数据推测,雄激素的下调可能启动了下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的负反馈调节机制,而此作用机制还有待进一步研究。
- 云丹刘晓丽程乐华周忠良
- 关键词：双酚A斑马鱼
