国家自然科学基金(30972132)
- 作品数：11 被引量：40H指数：5
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- 脯氨酸存在下酪蛋白ACE抑制肽的Plastein反应修饰被引量：3
- 2010年
- 利用枯草杆菌碱性蛋白酶水解酪蛋白制备ACE抑制肽,其IC50为47.1μg/mL;采用相同酶催化ACE抑制肽和脯氨酸进行Plastein反应,对ACE抑制肽进一步修饰,并用响应面分析法优化反应条件。在ACE抑制肽质量分数为35%,反应时间为6h,以反应体系游离氨基减少量为指标,得到适宜的反应条件为:温度为47.8℃、脯氨酸比例为0.54、酶添加量为9.5kU/gpro,此条件下体系游离氨基减少量约195.7μmol/gpro。在适宜条件下改变反应时间对酪蛋白ACE抑制肽进行不同程度的Plastein反应修饰,制备出6个修饰程度不同的多肽混合物并测定它们的ACE抑制活性、计算其IC50值。结果表明:修饰产物的ACE抑制活性随修饰程度的增加不规则变化,当反应体系的游离氨基减少量为195.7μmol/gpro时,修饰产物的IC50降低至0.2μg/mL。
- 李亚云赵新淮
- 关键词：酪蛋白类蛋白反应ACE抑制肽碱性蛋白酶修饰
- 酪蛋白水解物的Plastein反应修饰及ACE抑制活性变化被引量：6
- 2011年
- 采用中性蛋白酶水解酪蛋白,一定条件下制备水解度为13.0%、IC50质量浓度为40.4 mg/L的酪蛋白水解物。利用中性蛋白酶对所制备出的水解物进行plastein反应修饰,以反应体系的游离氨基量的变化为评价指标,通过单一因素试验研究酶添加量、底物质量分数、反应时间和反应温度对修饰反应的影响。结果表明,适宜的反应条件为中性蛋白酶添加量3 kU/g蛋白质、底物质量分数60%、反应时间6 h、反应温度20℃。制备5个不同反应程度的修饰产物,ACE抑制活性分析结果显示,修饰产物的IC50降至14.7~31.1 mg/L,表明中性蛋白酶催化的plastein反应修饰提高酪蛋白水解物的ACE抑制活性,且ACE抑制活性的提高程度与plastein反应程度有关。
- 徐微赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物中性蛋白酶ACE抑制活性
- 酪蛋白水解物的中性蛋白酶修饰及其ACE抑制活性被引量：7
- 2010年
- 采用碱性蛋白酶水解酪蛋白，制备水解度为13．5％、IC50为45．23μg／mL的酪蛋白水解物，然后利用中性蛋白酶对水解物进行类蛋白反应修饰，并研究酶添加量、底物浓度、反直温度和时间对修饰反应的影响。结果表明，修饰反应体系中水解反应占优势，表现为游离氨基含量增加；酶添加量、底物浓度、反应时间对修饰反应的影响显著，而反应温度的影响不大；在低酶添加量、高底物浓度和短反应时间下，修饰反应体系的游离氧基的增加幅度减少，水解反应相对降低。制备6个不同反应程度的修饰产物，ACE抑制活性分析结果显示，修饰产物的IC50降至15．56～19．98μg／mL，表明中性蛋白酶催化的类蛋白反应修饰可以提高酪蛋白水解物的ACE抑制活性。
- 徐微赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物类蛋白反应ACE抑制活性中性蛋白酶
- 三种氨基酸添加下酶法修饰酪蛋白水解物的ACE抑制活性被引量：3
- 2011年
- 采用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备水解度为12.4%、IC50为42.19μg/mL的酪蛋白水解物。在添加外源氨基酸的情况下对水解物进行类蛋白反应修饰,并响应面法研究氨基酸添加量、酶添加量、反应温度及3种氨基酸的影响。结果表明:氨基酸添加量、反应温度、氨基酸种类对修饰反应影响显著,而酶添加量的影响不大;分别添加苯丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸制备3个酪蛋白水解物修饰产物,其IC50降低至21.03～25.13μg/mL,表明添加外源氨基酸可提高修饰产物的体外ACE抑制活性,但添加不同氨基酸的影响不显著。
- 汪敬科赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物类蛋白反应氨基酸ACE抑制活性响应面
- 苯丙氨酸添加下酪蛋白类蛋白反应修饰物的抗氧化性质被引量：3
- 2011年
- 采用木瓜蛋白酶水解酪蛋白制备水解度为9.6%、DPPH·清除率为38.7%的水解物,添加苯丙氨酸于水解物并利用响应面法优化木瓜蛋白酶催化的类蛋白反应条件。在反应时间固定为5h下得到适宜的条件为:温度30℃、底物浓度50%(w/v)、酶添加量3kU/g蛋白质、氨基酸添加量0.74mol/mol水解物游离氨基。此条件下分别制备出5个修饰产物,以不添加苯丙氨酸的修饰产物或水解物和苯丙氨酸混合物为对照,评价它们的抗氧化活性。结果表明,与酪蛋白水解物或混合物或不添加苯丙氨酸的修饰产物相比,添加苯丙氨酸的修饰产物的DPPH·清除能力、还原能力和·OH清除能力显著提高;但是抗氧化性质与所采用的氨基酸添加量、反应时间之间的关系不显著。
- 岳楠赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物苯丙氨酸类蛋白反应
- 两步法制备高活性酪蛋白ACE抑制肽的工艺参数研究被引量：3
- 2010年
- 为了制备高活性ACE抑制肽,研究两步法高活性酪蛋白ACE抑制肽的制备工艺条件参数。利用枯草杆菌碱性蛋白酶55℃水解酪蛋白6h制备酪蛋白ACE抑制肽,IC50为38.6μg/mL;采用相同的酶进行Plastein反应来修饰酪蛋白ACE抑制肽,并应用响应面分析法优化修饰反应条件。固定酪蛋白ACE抑制肽质量分数为35%,以ACE抑制肽的游离氨基减少量为指标,优化的修饰反应条件为酶添加量7.7kU/g蛋白质、温度42.7℃、反应时间6h,在此条件下,酪蛋白ACE抑制肽的游离氨基减少量达到179.72μmol/g蛋白质。ACE抑制活性分析结果表明,修饰后ACE抑制肽的抑制活性显著提高且与修饰反应程度相关,IC50可降至0.5μg/mL。
- 李亚云赵新淮
- 关键词：酪蛋白ACE抑制肽
- 耦合Plastein反应的大豆蛋白降压肽酶法制备技术被引量：8
- 2010年
- 利用碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白,制备出水解度为16.6%的大豆蛋白水解物,随后对水解物进行Plas-tein反应修饰。利用响应面分析优化修饰反应条件,得到适宜参数:底物质量分数45%、酶添加量275U/g蛋白质、反应时间3～4h、温度30℃。制备修饰反应程度不同的9种修饰产物并评价其体外ACE抑制活性,发现修饰产物的IC50值为0.64～1.30mg/mL,均小于大豆蛋白水解物IC50值(1.45mg/mL)。排阻色谱分析结果确认,修饰产物中有更多的高分子质量肽段存在。结果显示,大豆蛋白的酶解以及耦合Plastein反应修饰,是一种制备高ACE抑制活性大豆蛋白降压肽的新技术。
- 高博赵新淮
- 关键词：大豆蛋白水解物ACE抑制活性碱性蛋白酶
- 类蛋白反应在食品蛋白质和活性肽研究中的应用被引量：9
- 2011年
- 文章综述类蛋白反应的化学机制,以及其在食品蛋白质研究工作中的应用。同时,介绍类蛋白反应在改善生物活性肽的ACE抑制作用和抗氧化活性方面的新应用,以及可能的机制—肽分子结构重组机制。
- 赵新淮孙辉
- 关键词：类蛋白反应食品蛋白质活性肽
- 乙醇-水相中酪蛋白水解物修饰及对2个性质的影响
- 2013年
- 利用AlcalaseCg解酪蛋白。制备水解度为11．6％、IC50值为42．8mg／L的酪蛋白水解物。在乙醇一水体系中采用A1calase催化类蛋白反应修饰酪蛋白水解物．固定反应时间6h，优化得到酶添加量、乙醇体积分数、底物质量浓度、反应温度分别为：8．36kU／g，56．8％，568g／L，37．5℃。制备不同反应程度的修饰产物，评估其ACE抑制活性及Zn^（2＋）螯合能力变化，发现修饰产物的ACE抑制活性得到改善，抑制最高达到62．5％（ic50达到27．7mg／L），但是与反应程度有关；Zn^（2＋）螯合能力则由4．22mg／g降低至1．97～3．86mg／g。修饰产物的Zn^（2＋）螯合能力与类蛋白反应程度无关，与ACE抑制活性也不存在相关性。
- 张阳赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物类蛋白反应ACE抑制活性
- 酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰及其产物ACE抑制活性特征被引量：4
- 2011年
- 采用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备水解度为10.9%、IC50值为52.6μg/mL的酪蛋白水解物,并利用响应面法优化碱性蛋白酶催化的类蛋白反应修饰条件。修饰反应时间固定为6h时,适宜的条件为酶添加量3.1kU/g pro、底物质量浓度50g/100mL、反应温度25℃。制备9个修饰程度不同的修饰产物,结果显示:修饰产物ACE抑制活性均提高,并且活性最高的修饰产物的IC50降低至14.9μg/mL。该修饰产物离心分级后,上清液部分和沉淀部分的ACE抑制活性分别低于和高于修饰产物,表明沉淀部分是提高ACE抑制活性的主要原因;Tricine-SDS-PAGE电泳分析表明,修饰产物及沉淀部分有较大分子质量的肽分子生成;该修饰产物和上清液部分、沉淀部分的进一步酶水解处理则显示,酶水解会导致它们的ACE抑制活性降低,但是仍然高于最初的酪蛋白水解物。
- 孙辉赵新淮
- 关键词：酪蛋白水解物碱性蛋白酶类蛋白反应ACE抑制活性
