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国家自然科学基金(81001700): 作品数：17 被引量：93H指数：7; 相关作者：张春朱烨何颖罗茂庄元春更多>>; 相关机构：泸州医学院西南医科大学自贡市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金四川省卫生厅科研基金四川省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程生物学更多>>

富含多糖的植物组织miRNA提取方法的改进被引量：1: 2013年; 目的:建立冻融法结合小分子RNA分离试剂盒简便快速提取富含多糖的植物组织miRNA的方法。方法:利用乙醇/醋酸钾沉淀法、小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取方法和结合反复冻融法改进的小分子RNA分离提取方法分别提取玉米胚乳组织小分子RNA,通过小分子RNA浓度、纯度及完整性检测,以及内参5s rRNA扩增验证模板真实性等比较3类方法小分子RNA的提取效果。结果:乙醇/醋酸钾沉淀法易丢失大量小分子RNA;小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取所获小分子RNA浓度、纯度较低,富含大量多糖杂质;反复冻融法结合小分子RNA分离试剂盒提取的小分子RNA浓度、纯度较高,有效去除多糖杂质,内参5s rRNA扩增验证真实性表明其所获miRNA的cDNA模板质量较高。结论:结合反复冻融法和小分子RNA分离试剂盒,可以简便快速去除多糖内杂质,保证小分子RNA完整性,加尾及引物延伸RT-PCR、所获miRNA的cDNA模板质量较高,可用于后续miRNA实验研究。; 罗茂李蓉张春罗波; 关键词：玉米胚乳 MIRNA

大孔树脂纯化蝴蝶花总黄酮及其体外生物活性研究被引量：6: 2020年; 目的优化筛选大孔树脂富集纯化蝴蝶花中总黄酮的工艺条件,并测定其总黄酮抗肿瘤及抗氧化的生物活性。方法采用静态解析/吸附试验对5种不同型号的大孔树脂进行筛选。以吸附、解析效果为指标,考察大孔树脂纯化黄酮的工艺参数,并利用CCK-8法考察蝴蝶花总黄酮对Hela、Hccc-9810及H460肿瘤细胞株的体外增殖抑制活性;采用铁氰化钾还原法、DPPH法测定蝴蝶花总黄酮体外抗氧化活性。结果 AB-8型大孔树脂用于富集纯化蝴蝶花黄酮效果最好。最佳工艺条件如下:上样液质量浓度为5.00 mg·mL-1,pH值为6.0,吸附4h,上样量5BV,13BV 95%乙醇洗脱。蝴蝶花总黄酮对Hccc-9810及H460肿瘤细胞株具有明显抑制作用(P<0.05),对DPPH自由基有较好的清除能力。蝴蝶花叶总黄酮抗肿瘤及抗氧化活性明显高于其根茎总黄酮。结论 AB-8型大孔树脂适用于蝴蝶花黄酮的分离纯化,确定的工艺条件稳定可行,重复性好。纯化总黄酮具有良好的抗肿瘤及抗氧化活性。; 魏静杨倩郑茜冯跃平张春; 关键词：蝴蝶花总黄酮大孔树脂纯化工艺

自制冰冻切片包埋剂在紫花地丁种子RNA提取中的应用: 2013年; [目的]通过比较使用自制包埋剂和合成胶水包埋紫花地丁种子提取RNA的效果,证明提取紫花地丁种子RNA时,使用自制包埋剂能获得高质量的RNA。[方法]用自制包埋剂和合成胶水分别包埋紫花地丁种子,冰冻切片机切片破碎种子,提取RNA,通过RNA浓度、纯度及完整性的检测,比较2种方法提取RNA的效果。[结果]自制包埋剂组和合成胶水组提取的RNA浓度分别为3.42和1.04μg/μl;1.0%琼脂糖凝胶电泳显示2组RNA都可见2条明显的条带,28S rRNA与18S rRNA条带亮度之比大于1,但合成胶水组有较为明显的拖带。[结论]该试验结果显示,自制包埋剂包埋紫花地丁种子进行切片破碎,完全能满足提取RNA的需要,是一种成本低、效果好、操作简便、具有实用价值的方法。; 庄元春朱烨何颖张春; 关键词：包埋剂冷冻切片 RNA提取

双香豆素体外抗肿瘤活性筛选及相关机制初探被引量：5: 2020年; 为初步探讨双香豆素抗肿瘤活性及相关机制,采用CCK-8法检测双香豆素对几种肿瘤细胞株生长的影响。以HepG2为研究对象,通过对几种生理生化指标的检测初步探讨其抗肿瘤的相关机制。结果显示,双香豆素对HepG2、Hccc-9810及MDA-MB-231细胞株的生长均呈剂量和时间依赖性的抑制作用,其中HepG2对双香豆素的敏感性最高(IC50=3.19±0.68μmol·L-1)。双香豆素可使HepG2细胞周期阻滞在S期,使Bcl-2蛋白的表达下调,cleaved caspase-9和Bax蛋白的表达升高。双香豆素可使HepG2细胞内还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量明显降低,丙二醛(malonaldehyde,MDA)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平明显升高。在低氧诱导下,双香豆素能使HepG2细胞中NAD(P)H醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,PDK1)及缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达量下调。上述结果表明,双香豆素可有效抑制HepG2细胞增殖,促进其周期阻滞及细胞凋亡;双香豆素可能通过抑制HepG2细胞中PDK1和NQO1的表达,导致HIF-1α下调、ROS聚集,从而产生细胞氧化应激促使HepG2细胞凋亡。; 魏静冯跃平郑茜王钦张春; 关键词：双香豆素 HEPG2 细胞周期氧化应激

基于ITS序列分析对紫花地丁的分子鉴别被引量：5: 2013年; 目的:通过研究比较紫花地丁与其易混中药材ITS序列的差异和规律,建立紫花地丁与其易混药材之间的分子鉴别方法。方法:分别从紫花地丁和易混品中提取总DNA,用ITS序列通用引物扩增,扩增产物双向测序。结果:紫花地丁与其他易混品在ITS1和ITS2区段存在特异鉴别位点共8个。结论:根据ITS序列特征,能有效区分紫花地丁和其他易混中药材。ITS序列是紫花地丁鉴定的有效的分子标记。; 朱烨张春庄元春税丕先; 关键词：紫花地丁 ITS序列分析中药鉴定

马甲子叶抗炎有效部位的筛选及其机理初探被引量：3: 2015年; 目的:观察马甲子叶不同提取部位的抗炎作用,并筛选其有效部位。方法:系统溶剂法将马甲子叶提取为氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水4个部位后,用耳肿胀法、足跖肿胀法、实验性腹膜炎法筛选马甲子叶的抗炎有效部位,并考察其作用机理。结果:马甲子叶正丁醇、水及乙酸乙酯部位为抗炎的有效部位。其中以正丁醇部位作用最佳,其对角叉菜胶液致胸膜炎大鼠胸腔渗出液及肺组织中MDA、PGE2、TNF-α及IL-1β的含量升高有显著的抑制作用(P<0.01)。结论:正丁醇和水部位是马甲子叶的有效抗炎部位,以正丁醇部位作用最佳,具有抑制炎症介质释放及抗脂质过氧化的作用。; 何颖辜义陆欧丽兰张春; 关键词：抗炎

含当归中成药的DNA提取及其分子鉴定被引量：12: 2018年; 目的：优化含当归中成药的DNA提取方法,并利用叶绿体trn L-F基因及当归特异分子标记对当归中成药进行鉴定。方法：采用传统十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法,十二烷基磺酸钠（SDS）法,磁珠法以及改良CTAB法对10种含有当归成分的中成药进行DNA提取,利用微量紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳检测所得总DNA的完整性、纯度和浓度。对10份当归中成药的trn L-F序列进行扩增、测序,对序列进行比对分析并构建系统发育树。利用当归特异鉴别分子标记对10种当归中成药中的当归成分进行分子鉴别。结果：利用改良CTAB法获得了纯度较高,质量较好的DNA。10种中成药中当归的trn L-F序列与正品当归序列相似度为99.88%-100%,系统发育树显示10份中成药中的当归与正品当归聚为一类。利用当归特异性鉴别分子标记进行验证,10种中成药DNA样品均能得到明亮的扩增条带。结论：改良CTAB法可以有效提取当归中成药中的基因组DNA。利用trn L-F序列和当归特异性鉴别分子标记,成功对10份市售当归中成药进行了分子鉴别,为当归类中成药的分子鉴定奠定了基础。; 苟惠王译伟郑茜王钦张春; 关键词：DNA提取方法分子鉴定

低温切片破碎紫花地丁根组织提取RNA的研究: 2013年; 目的通过比较液氮研磨法和低温切片法破碎紫花地丁根组织来提取RNA的效果,以获得提取药用植物紫花地丁根RNA的最佳方法。方法用液氮研磨法和低温切片法破碎紫花地丁根组织,然后提取RNA。通过RNA浓度、纯度及完整性的检测,以及扩增GAPDH基因来比较两种方法的效果。结果液氮研磨法和低温切片法提取的RNA浓度分别为1.21,3.57μg/μl。琼脂糖凝胶电泳检测可见两条明显的条带。28S rRNA与18S rRNA条带亮度之比大于1。GAPDH基因的PCR扩增在约230 bp处有与预期长度一致的明亮条带。结论低温切片法破碎植物根组织能达到液氮研磨法的效果,是提取RNA时,破碎植物根组织的一种成本低,效果好,快速简便的方法。; 毛樱逾罗波罗茂段素群张春; 关键词：RNA提取

芦荟提取物对葡萄保鲜及贮藏品质的影响被引量：18: 2013年; 研究了不同浓度芦荟提取物对葡萄的保鲜作用及贮藏品质的影响。结果表明,芦荟提取物处理葡萄果穗后可有效降低葡萄腐烂率、脱粒率及果梗褐变指数,延缓可溶性固形物、有机酸及VC的降解,较好地维持葡萄贮藏品质,其中50%浓度的芦荟叶表皮与叶肉混合提取物保鲜作用最佳。; 罗茂李蓉张春; 关键词：葡萄保鲜贮藏品质

RNA Extraction from Herba Violae Roots with Low-temperature Sectioning Method被引量：1: 2013年; [ Objective ] This study aimed to investigate the optimal method for extracting RNA from roots of medicinal plant herba violae by comparing the effects of liquid nitrogen grinding method and low-temperature sectioning method on RNA extraction. [ Method] Roots of herba violae were respectively crushed by using liquid nitrogen grinding method and low-temperature sectioning method to extract RNA. The extraction effects of these two methods were compared based on detec- tion of RNA concentration, purity and integrity and amplification of GAPDH gene by RT-PCR. [Result] The concentration of RNA extracted by liquid nitrogen grinding method and low-temperature sectioning method was 1.21 and 3.57 p^g/~, respectively. Both RNA extracted by these two methods showed two distinct bands after agarose gel electrophoresis. The ratio of brightness of the 28S rRNA to the 18S rRNA bands was greater than 1. PCR amplification showed that the length of GAPDH gene was about 230 bp, which was consistent with the expected result. [ Conclusion ] The experimental results indicated that using low-tempera ture sectioning method to crush the roots of herba violae can meet the needs of most molecular biological experiments including gene cloning and expression analysis, which is an effective and simple method for extracting RNA from plant roots.; Chun ZHANGYingyu MAOBo LUOMao LUOSuqun DUAN

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