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外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1对基质金属蛋白酶-9高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响被引量：1: 2012年; 目的观察外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）对基质金属蛋白酶-9（MMP-9）高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响，为寻找治疗糖尿病足的新方法提供实验依据。方法应用sD大鼠皮肤成纤维细胞株CRL-1213用高糖（22mmol／L）＋高同型半胱氨酸（100μmol／L）联合培养建立体外MMP-9高表达皮肤成纤维细胞模型，用外源性TIMP-1（100μg／iJ）抑制MMP-9的活性，采用实时PCR法和ELISA法检测MMP．9基因及蛋白表达量，用明胶酶谱法检测MMP-9蛋白活性，采用流式细胞术检测细胞增殖功能、CCK-8检测细胞活力、ELISA法检测细胞胶原（羟脯氨酸）分泌能力、划痕实验评价细胞横向迁移能力、Transwell法评价细胞纵向迁移能力。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果TIMP-1干预组大鼠皮肤成纤维细胞MMP-9mRNA和蛋白的表达量与MMP-9高表达组比较差异无统计学意义（P〉0．05），但MMP-9蛋白活性受到明显抑制（1．47±0．13VS0．434-0．13，t=12．495，P〈0．01）。与对照组比较，MMP-9高表达组大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[（9．31±0．24）％VS（6．54±0．29）％]、增殖指数[（13．8±0．5）％VS（11．3±0．6）％]、细胞活力（1．76±0．13V81．35±0．12）、胶原（羟脯氨酸）分泌量[（1126-1-63）vs（353±61）μg／L]、6h横向迁移率[（38．7±2．6）％VS（21．3±2．1）％]和纵向迁移细胞数（91±4vs71±4）均明显减少（t=16．433、7．328、5．113、19．847、11．529、8．124，均P〈0．05）；TIMP-1干预后，大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[（6．54±0．29）％VS（7．75±0．27）％]、增殖指数[（11．3±0．6）％vs（12．5±0．5）％]、细胞活力（1．35±0．12VS1．64±0．14）、胶原（羟脯氨酸）分泌量[（3534-61）vs（829±59）仙g／L]、6h横向迁移率[（21．3±2．1）％VS（31．5±2．7）％]和纵向迁移细胞数（71±4vs85±4）与MMP; 薛声能雷娟杨川林刁珠朱平徐明彤严励; 关键词：基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1

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广东省科技计划工业攻关项目(20098091300128)

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机构

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