国家自然科学基金(30571024)
- 作品数：6 被引量：46H指数：4
- 相关作者：潘杰张晾叶红燕荆文尹苗更多>>
- 相关机构：山东师范大学济南市中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省教育厅科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- apoE/LDLR双基因突变小鼠肝脏脂代谢相关基因的表达研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨载脂蛋白 E 和低密度脂蛋白受体双基因缺失(apoE^(-/-)/LDLR^(-/-))小鼠肝脏脂代谢相关基因表达特征与动脉粥样硬化早期病变的关系及发生机制。方法应用 RT-PCR 技术检测 apoE^(-/-)/LDLR^(-/-)与野生型小鼠肝脏脂代谢相关基因表达差异,并进行血生化指标检测及主动脉形态学观察。结果所检测的11个脂代谢相关基因中,apoE^(-/-)/LDLR^(-/-)小鼠与野生型小鼠相比,载脂蛋白 B100和脂肪酸转运体(FAT/CD36)的 mRNA水平从14天龄至3月龄均升高。载脂蛋白 AⅣ、载脂蛋白 AVmRNA 水平分别于14天龄和3月龄时明显降低。载脂蛋白AⅠ、载脂蛋白F、过氧化物增殖物激活型受体α、肝 X 受体α、血管生成素样蛋白3、酰基辅酶A氧化酶1及肉碱棕榈酰转移酶ⅠmRNA 表达水平无明显差异。血清总胆固醇、总甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平分别高于同龄野生型小鼠约7、2和30倍。随年龄增长 apoE^(-/-)/LDLR^(-/-)小鼠主动脉内膜出现典型的动脉粥样硬化早期病变。结论上述脂代谢相关基因表达变化表明它们在动脉粥样硬化发生发展过程中起重要作用。
- 杜会芹尹苗叶红燕商允菊戴学栋荆文张晾肖宁李继峰潘杰
- 关键词：载脂蛋白类动脉硬化动物
- ROS对不同基因型小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的 NADPH氧化酶(Nox)来源的活性氧(reactive oxygen species,ROS)在巨噬细胞泡沫化过程中发挥重要作用,然而Nox在动脉粥样硬化(As)发生发展中的作用尚存在争议。研究表明,氧化应激可通过调节核转录因子及胆固醇内流和外流相关受体影响巨噬细胞泡沫化进程,影响As的发生发展。本实验拟探讨Nox来源的ROS对不同基因型小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化的影响及其作用机制。方法同过ox-LDL诱导apoE-/-和WT小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化,并用Nox抑制剂二亚苯基碘(diphe-nyleneiodonium chloride,DPI)抑制ROS的产生,借助形态学、实时定量RT-PCR和免疫细胞化学等手段在细胞水平和分子水平检测巨噬细胞泡沫化不同阶段的变化特征。结果 ox-LDL处理24 h,可诱导两种小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化,且随着时间延长,泡沫化程度逐渐加重。ApoE-/-小鼠Nox的活化对小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化较WT小鼠明显。在两种小鼠巨噬细胞中,Nox活性均可明显被DPI抑制,且DPI可明显减少ox-LDL诱导小鼠腹腔巨噬细胞O2-和总ROS的产生(P<0.05)。ox-LDL诱导48 h,在两基因型之间,O2-和总ROS的变化无明显差异(P>0.05)。在apoE-/-小鼠中,24 h时,ox-LDL+DPI组与ox-LDL组相比,PPARα、ABCA1和SR-BI的mRNA水平显著上调(P<0.05),Nox2、PPARγ的mRNA水平下调,而p47phox、LXRα、NF-κB、CD36和SR-A mRNA水平差异无显著性(P>0.05)。在WT小鼠腹腔巨噬细胞中,与ox-LDL处理组相比,6 h时,DPI处理组显著下调Nox2、PPARα、LXRα、CD36和SR-A的mRNA水平(P<0.05),显著上调PPARγ、NF-κB和SR-BI的mRNA水平(P<0.05),ABCA1、p47phox mRNA水平变化差异无显著性(P>0.05);24 h时,ox-LDL+DPI处理组与ox-LDL处理组相比,p47phox、PPARα、PPARγ、LXRα、NF-κB、CD36、SR-A、ABCA1和SR-BI mRNA水平均被显著上调(P<0.05),Nox2mRNA水平无显著变化(P>0.05)。在apoE-/-和WT小鼠腹腔巨噬细胞中,24 h时,ox-LDL可通过ROS激活NF-κB,且DPI处理组NF-κB活性明显降低(P<0.05)
- 张晾孙延荣潘杰
- 关键词：活性氧氧化型低密度脂蛋白
- ApoE基因缺失幼龄小鼠动脉粥样硬化相关基因的时序表达研究被引量：15
- 2008年
- 利用RT-PCR技术检测apoE基因缺失(apoE-/-)小鼠在1、2和3月龄3个年龄段主动脉以及14天、1、2和3月龄4个年龄段肝脏中动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)重要相关基因的时序表达特点,并通过血清生化检测结合主动脉根部病理形态学特征的分析,探讨AS重要相关基因时序表达特点与AS早期病变的关系.在主动脉检测的9条AS相关基因中,apoE-/-与野生型(WT)小鼠相比,1、2和3月龄时IL-1β的mRNA表达水平均显著上调.1月龄时VCAM-1、IκB和TGF-β,2月龄时PDGF-α和CD36,3月龄时TNF-α和MMP2的mRNA表达水平均显著上调,其他年龄段无显著变化.在肝脏检测的2条AS相关基因中,C反应蛋白(CRP)的mRNA表达水平在14天到2月龄时无显著变化,3月龄时显著上调.NF-κB在各年龄段apoE-/-小鼠主动脉和肝脏中的基因表达量与同龄WT小鼠相比均无显著差异.不同年龄段的apoE-/-小鼠血清TC、TG和LDL-C水平均明显高于同龄WT小鼠.2月龄apoE-/-小鼠主动脉内膜出现散在的脂质沉积,并随年龄增长逐渐加重.上述结果显示,时序表达上调的AS重要相关基因构成了以NF-κB为核心的复杂调控网络,它们之间相互作用,共同参与慢性炎症过程,在apoE-/-小鼠AS的早期发生发展中发挥重要作用.
- 荆文尹苗杜会芹叶红燕张圣强商允菊戴学栋曲志萍张晾潘杰
- 关键词：RT-PCRAPOE基因主动脉
- apoE/LDLR双基因缺失幼龄小鼠主动脉中动脉粥样硬化相关基因的表达被引量：16
- 2008年
- 利用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测11个动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)相关基因在1、2和3月龄的载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)/低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor, LDLR)双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠主动脉中的表达变化,同时应用血生化指标和病理形态学观察AS 早期病变特点,探讨apoE和LDLR 基因联合缺失引发的血脂代谢紊乱和血管炎症损伤的关系以及AS 的炎症反应机制。结果显示,apoE-/-/LDLR-/-小鼠IL-1β、TLR2、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1、GM-CSF、CD36和 ET-1表达在1月龄时较同龄野生型(wild type, WT)小鼠显著上调(P<0.05, P<0.01),PDGF-α和TNF-α表达在2 月龄时较同龄WT 小鼠显著上调,除ET-1表达在2龄时以及TLR2、VCAM-1和ICAM-1表达在3月龄时降至WT小鼠水平以外,其余各基因表达随年龄增长继续升高(P<0.05, P<0.01),其中 MCP-1 表达在 2 月龄时达到峰值。NF-κB在各年龄段apoE-/-/LDLR-/-小鼠中的表达与同龄WT 小鼠相比均无显著差异。各年龄段apoE-/-/LDLR-/- 小鼠血清TC、TG、LDL、HDL、TNF-α、IL-1β和 ox-LDL含量均显著高于同龄WT小鼠(P<0.05, P<0.01),并随年龄增长逐渐升高。apoE-/-/LDLR-/-小鼠1月龄时主动脉内膜出现少量的散在的脂质沉积,随着年龄增长病变区域增多,脂质沉积增厚。上述结果提示:apoE 和LDLR 双基因缺失形成的高脂血症可能通过刺激主动脉中炎症基因时序表达,起始并扩大病变部位的炎症反应,共同促进AS的发生发展。
- 戴学栋尹苗荆文杜会芹叶红燕商允菊张晾邹艳艳曲志萍潘杰
- 关键词：动脉粥样硬化主动脉RT-PCR
- 脂代谢相关基因在apoE基因缺失幼龄小鼠肝脏中的表达被引量：11
- 2008年
- 本文旨在分析脂代谢相关基因在载脂蛋白E(apolipoproteinE,apoE)基因缺失(apoE-/-)幼龄小鼠肝脏中的表达特征及其与血脂紊乱和动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)早期病变的关系。利用半定量RT-PCR和荧光实时定量RT-PCR技术,分析14d龄、1、2和3月龄apoE-/-小鼠及同龄野生型(wildtype,WT)小鼠肝脏脂代谢相关基因的表达,并进行血生化指标及主动脉病理形态学检测。apoE-/-小鼠肝脏中apoAI、apoAIV表达在14d龄时即发生显著变化(P<0.05);在1月龄时apoB100表达较同龄WT小鼠明显上调(P<0.05);apoAV表达则在2月龄时较同龄WT小鼠上调(P<0.05),此时可观察到apoE-/-小鼠主动脉内膜出现AS早期病变;Fat/CD36和Angptl3表达在3月龄时较同龄WT小鼠上调(P<0.05);实验中检测的其它基因的mRNA表达与同龄WT小鼠相比无显著性差异。apoE-/-小鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇含量均高于同龄WT小鼠,并随年龄增长而升高。apoE-/-小鼠和同龄WT小鼠血清中apoB100蛋白浓度在14d龄到3月龄间变化趋势与其在肝脏中mRNA表达及血清中低密度脂蛋白胆固醇含量变化趋势基本一致。上述部分脂代谢相关基因表达在幼龄小鼠即发生改变,与血脂紊乱以及主动脉AS病变发生发展过程呈正相关,说明其可能在幼龄小鼠脂质代谢紊乱发生过程中起重要作用,从而引起动脉内皮细胞功能改变乃至AS早期病变的发生。
- 叶红燕尹苗商允菊戴学栋张圣强荆文杜会芹张晾潘杰
- 关键词：肝脏RT-PCR
- 脂代谢相关基因在低密度脂蛋白受体基因缺失幼龄小鼠肝脏中的表达分析被引量：2
- 2008年
- 目的探讨脂代谢相关基因在低密度脂蛋白受体（LDLR）基因缺失（LDLR^-/-）小鼠肝脏中的表达特征及其与血脂紊乱和动脉粥样硬化早期病变的关系。方法应用RT-PCR技术分析14、30、60和90天龄LDLR^-/-与野生型（WT）小鼠靶基因表达差异，并进行血生化及主动脉形态学检测。结果与同龄WT小鼠相比，LDLR^-/-小鼠肝脏中载脂蛋白AⅣ、脂肪酸转运酶和肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ的mRNA水平在14天龄时即显著下调（P〈0．05）；30天龄时载脂蛋白AⅠ显著上调，载脂蛋白F则显著下调（P〈0．05）；60天龄时肝X受体α显著升高（P〈0．05），酰基辅酶A氧化酶1在90天龄时显著下调（P〈0．05）；载脂蛋白AⅤ、载脂蛋白E、过氧化物增殖物激活受体α和血管生成素样蛋白3差异无统计学意义（P〉0．05）。血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白C含量从14天龄起均显著高于同龄WT小鼠（均P〈0．05），并随年龄增长持续升高。结论上述脂代谢相关基因在幼龄小鼠即发生表达水平的改变，与血脂紊乱及主动脉病变发生过程呈正相关，说明其可能共同参与幼龄小鼠的脂质代谢紊乱，进而影响动脉内皮细胞功能改变乃至动脉粥样硬化早期病变的发生。
- 商允菊戴学栋荆文杜会芹叶红燕尹苗张晾张圣强李继峰潘杰
- 关键词：LDL脂代谢障碍肝脏
